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【摘要】 目的 研究返魂草提取物（FH）解热镇痛抗炎的作用。 方法 采用小鼠耳肿胀、大鼠足趾肿胀、大鼠棉球肉芽肿法来考察FH的抗炎作用；运用小鼠热板法和小鼠光热辐射法考察其镇痛效果。 结果 返魂草提取物各剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀、对1%角叉菜胶致大鼠足趾肿胀均有明显的抑制作用，各剂量组返魂草提取物对大鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用，且作用强度与剂量呈一定的依赖性。返魂草提取物各剂量组均具有显著提高小鼠热板法、小鼠光热辐射法疼痛反应的阈值，镇痛作用确实，作用呈量效关系。 结论 返魂草提取物具有显著抗炎、镇痛作用，具有较好的应用价值。
【关键词】 返魂草提取物 镇痛 抗炎
返魂草提取物（FH）体外试验研究结果表明：FH具有明显抑制FM1型流感病毒的作用，具有抗呼吸道合胞病毒、腺病毒的作用。试管法和琼脂平板连续稀释法研究结果表明：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、乙型溶血性链球菌、肺炎双球菌、白色念珠菌对FH均有不同程度的敏感性。笔者意在通过返魂草提取物（FH）镇痛抗炎的药效，为进一步开发此药提供药理依据。
1 实验材料
1.1 药品与试剂 返魂草浸膏：天然药化研究室提供，批号：030508，1g返魂草浸膏相当于生药4.45g。用时以0.5%CMC-Na配成所需浓度备用。返魂草颗粒：吉林华康制药有限公司，批号：021202。二甲苯：北京益新精细化学品有限公司，生产批号：20020913。角叉菜胶(carrageenin)：购自SIGMA公司。
1.2 实验动物 昆明种小鼠，SD大鼠，购于广东省医学实验动物中心。
1.3 仪器 UV9100型紫外-可见分光光度计：北京瑞利分析仪器厂；BZKW-C型电子恒温水浴锅：北京光明医药仪器厂；DST-211型电子数字温度计：河北圣芙电子有限公司；大鼠足容积测定仪：本实验室组装；小鼠光热致痛仪：由本实验室自制。电热干燥箱，热板，圆冲，烧杯，进样枪，剪刀，镊子，精密电子天平等。
2 实验方法
2.1 抗炎试验
2.1.1 返魂草提取物抗二甲苯致小鼠耳廓炎症水肿试验 昆明种小鼠，雄性，体重18～22g，随机分组， 分别灌胃不同剂量的返魂草提取物8、16、32g/kg及返魂草颗粒16g/kg，给药容积0.3ml/10g，模型对照组给予等量的溶媒（0.5%CMC-Na）。给药后1h，将30μl二甲苯均匀涂在小鼠右耳正反面两面致炎，45min后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓剪下左右两耳，用直径9mm的不锈钢圆冲沿耳缘相同部位冲下，称重，以左右两耳重量差值作为肿胀度，计算抑制率。
肿胀度=右耳重-左耳重
肿胀抑制率（%）=对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度 对照组平均肿胀度×100%
实验数据采用均值±标准差（x±s）表示，两组均数间的比较采用组间t检验。
2.1.2 返魂草提取物抗角叉菜胶致大鼠足趾肿胀试验 Wistar大鼠，雄性，体重130～150g，随机分组，每组12只，分别灌胃不同剂量的返魂草提取物5.4、10.8、21.6 g/kg和阳性对照药返魂草颗粒10.8g/kg，给药容积1.5ml/100g，对照组给予等量溶媒（0.5%CMC-Na）。1h后大鼠右后足趾皮下注射1%角叉菜胶（0.1ml/只）致炎。用自制大鼠足容积测定仪分别测定致炎前及致炎后1、2、3、4、5、6h的足容积，计算各组的肿胀度及抑制率。
肿胀度(%)=致炎后右后足容积-致炎前右后足容积 致炎前右后足容积×100%
肿胀抑制率（%）=对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度 对照组平均肿胀度 ×100%
2.1.3 返魂草提取物抗大鼠棉球肉芽肿试验 Wistar大鼠60只，随机分为5组，模型对照组、返魂草颗粒对照组（10.8g/kg）及返魂草提取物高、中、低剂量组（5.4、10.8、21.6 g/kg）。将动物用乙醚麻醉后，胸部皮肤消毒并切一1cm长小口，然后用眼科镊子将两个20mg消毒棉球分别植入左、右腋下，缝合皮肤。手术当天开始，各组分别给以相应药物1.5ml/100g体重，连续给药6天，第7天打开原切口，将棉球取出，于70℃烘干，称重，将称得重量减去棉球原重量即得肉芽肿重量。
2.2 镇痛试验
2.2.1 返魂草提取物对小鼠热板法致痛的影响 选用体重24～28g雌性纯系昆明种小鼠。首先进行痛觉敏感性筛选。实验室温度15.0～18.0℃，将小鼠置于（55.0±0.5）℃的热板上，以小鼠舔后足所经历的时间作为疼痛反应的阈值，剔出喜跳者及30s中内无反应者，筛选出60只痛觉反应敏感的小鼠，按体重随机分成五组，每组12只。返魂草提取物低、中、高剂量组（8、16、32g/kg）和阳性对照组（返魂草颗粒16g/kg）。测定给药前痛阈值后，各试验组小鼠灌胃给予相应的药物，给药容积0.3ml/10g，空白对照组给予等容积的生理盐水。用脱毛剂将小鼠双后足踝关节以下脱毛，擦干。每只小鼠以同样的方法测定给药前疼痛反应阈值，然后各受试组给药1h后，测定每鼠给药后的疼痛反应阈值，小鼠舔后足后，立即移离热板，于给药后的2、3h再测定一次疼痛反应的阈值，对各组间疼痛反应的阈值进行t检验，以评价返魂草提取物的镇痛作用。
2.2.2 返魂草提取物对小鼠光热辐射法疼痛反应的影响 选用体重22～24g纯系昆明种小白鼠，于室温15.0～18.0℃下进行痛觉反应敏感性筛选。将小鼠置于小鼠固定器内，安静后，选择其尾部下1/3处为致痛点，对准小鼠光热致痛仪的灯光开口处，从开始照射到小鼠甩尾的时间为其疼痛反应的阈值，筛选出痛阈在4.0～8.0s之间的小鼠60只按体重、性别随机分为空白对照组，返魂草提取物低、中、高剂量组（8、16、32g/kg）和阳性对照组（返魂草颗粒16g/kg）。测定给药前痛阈值后，各试验组小鼠灌胃给予相应的药物，给药容积0.3ml/10g，空白对照组给予等容积的生理盐水。各组于给药后1、2、3h在其尾部下1/3标记点处测定其热痛反应阈值，如果出现照射20s仍未出现致痛甩尾的试验例，则该鼠的痛阈反应值按20s计算。对各组各时间点的痛阈反应值进行组间t检验，以评价返魂草提取物对小鼠光热甩尾法的镇痛作用。
3 实验结果
3.1 抗炎试验
3.1.1 返魂草提取物对二甲苯致小鼠耳廓炎症水肿的影响 结果（见表1）表明，返魂草提取物8g/kg（低剂量组）、16g/kg（中剂量组）、32g/kg（高剂量组）给药1h后对二甲苯致小鼠的耳肿胀均有显著的抑制作用(P<0.05，P<0.001，P<0.001)，抑制率分别为16.1%、24.9%、38.0%，且作用强度与剂量有一定的依赖性。阳性药返魂草颗粒16g/kg对此模型中耳肿胀也有明显的抑制作用（P＜0.01），抑制率为23.7%。表1 返魂草提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 注:与模型对照组比较,*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001
3.1.2 返魂草提取物对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响 结果（见表2）表明，此模型在致炎后4h达水肿作用高峰。返魂草提取物在致炎后2h即显效，与溶媒对照组相比，返魂草提取物 5.4、10.8、21.6g/kg均能显著抑制1%角叉菜胶所致的大鼠足趾肿胀（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001)。阳性药返魂草颗粒10.8g/kg在致炎后2h显效，其作用可持续到致炎后6h（P＜0.05，P＜0.01）。 表2 返魂草提取物对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响 注:与对照组比较,*P<0.05;**P<0.01
3.1.3 返魂草提取物抗大鼠棉球肉芽肿的抑制作用 结果（见表3）表明，各剂量组返魂草提取物对大鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。
3.2 镇痛试验
3.2.1 返魂草提取物对小鼠热板法致痛的影响 各试验组小鼠给药前对热板法疼痛反应的阈值相近，经给药后，返魂草提取物各剂量组小鼠在1、2、3h舔后足的时间均较空白对照组显著延长，提高疼痛反应的阈值，表明返魂草提取物具有显著的镇痛作用，返魂草颗粒也显著提高小鼠热板法疼痛反应的阈值（见表4）。 表3 返魂草提取物对大鼠棉球肉芽肿的抑制作用 注:与对照组比较,*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001 表4 返魂草提取物对小鼠热板法的镇痛作用 注：与空白对照组比较，*P<0.05； **P<0.01； ***P<0.001
3.2.2 返魂草提取物对小鼠光热辐射法疼痛反应的影响 各试验组小鼠给药前对光热致痛的反应阈值接近，经给药后，返魂草提取物各剂量组小鼠在1、2、3h甩尾时间均较模型对照组显著延长，提高疼痛反应的阈值，表明返魂草提取物具有显著的镇痛作用（见表5）。 表5 返魂草提取物对小鼠光热法的镇痛作用注:与空白对照组比较,*P<0.05; **P<0.01;***P<0.001
4 讨论与结论
抗炎试验结果表明：返魂草提取物各剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀、对1%角叉菜胶致大鼠足趾肿胀均有明显的抑制作用，各剂量组返魂草提取物对大鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用，且作用强度与剂量呈一定的依赖性；解热试验结果表明：返魂草提取物各剂量组对内毒素致家兔体温升高、对啤酒酵母致大鼠发热均有显著的抑制作用，作用强度与剂量呈一定的相关性；镇痛试验结果表明：返魂草提取物各剂量组均具有显著提高小鼠热板法、小鼠光热辐射法疼痛反应的阈值，镇痛作用确实，作用呈量效关系。
综上所述，返魂草提取物具有显著地解热、抗炎、镇痛作用，具有较好的应用前景。
作者单位：510240 广东广州，广州市医药工业研究所