点击显示 收起
关键词 慢性肾衰竭 甲状旁腺素 T细胞亚群 白介素-2 白介素-2受体
The alteration of the immune function of patients with chronic renal failure and hyperparathyroidism before and affter being treated by high dose activeαD 3
Lin Lin，Zhang Hua，Jin Shi kun，et al.
The Fifth Affliated Hospial of Sun Yet-Sen University，Zhuhai，Guangdong519000.
【Abstract】 Objective To investigate the effect of parathyroid hormone on Tlymphocyte and interleukin-2/interleukin-2receptor in uremic patients with secondary hyperaparathyroidism and the alteration of the immune function of the patients before and after being treated by activeαD 3 . Methods The study was performed on 30 patients with severe secondary hyperparathyroidism. iPTH、S-Ca、S-P、CD 3、CD 4 、CD 8 、CD 4 /CD 8 、IL-2and SIL-2R were determined before and after giving activeαD 3 （1-OHαD 3 ）and calciumcarbonate. Results There was a significant increase in the plasma levels of iPTH、SIL-2R and CD 8 ，a significant decrease in CD 4 and the ratio of CD 4 to CD 8 in patients as compared to control. We also found a reduction in iPTH，an increase in CD 4 and the ratio of CD 4 to CD8 after the therapy，with a positive correlation between levels of iPTH and CD8and a negative one between levels of iPTH and CD 4 and the ratio of CD 4 to CD8. Neither SIL-2R nor CD 3 level was observed to have correlation with levels of iPTH. Conclusion There was an abnormal distribution of T lymphocyte subsets and a disorder of IL-2/IL-2R system in CRF patients. The plasma level of iPTH was observed to have a positive correlation with the abnormal distribution of T-cell. The impaired function of T-cell could be improved after treating hyperparathyroidism.
Key words chronic renal failure parathyroid hormone T-cell subset interleukin-2 interleukin-2receptor active
慢性肾衰竭（尿毒症期）患者存在免疫功能缺陷，尤其细胞免疫的缺陷更为明显。近20年研究表明，甲状旁腺激素（PTH）不仅是调节钙、磷代谢的主要激素，还是一种免疫调节剂。许多研究结果显示PTH可抑制T淋巴细胞的功能，是造成慢性肾衰细胞免疫低下的因素之一［1，2］ ，但另一些研究的结论却正相反 ［3，4］ 。我们通过用1α-维生素D3（α-D 3 ）冲击治疗CRF病人的继发性甲状旁腺功能亢进，降低血清中的PTH水平，观察治疗前后患者的免疫指标的变化，进一步探讨PTH对CRF患者免疫功能的影响。
1 对象和方法
1.1 病例选择 选择2001年6月～2002年1月在我院肾内科住院的非维持性血液透析的CRF伴甲旁亢患者30名，其中男18例、女12例，年龄30～77岁，平均（49.5±2.4）岁。iPTH水平均>150ng/L，血清肌酐（Scr）均>450μmol/L，肌酐清除率（Ccr）均<10ml/min。原发病包括慢性肾炎22例，高血压肾病4例，缺血性肾病1例，糖尿病肾病1例，多囊肾1例，梗阻性肾病1例。所有患者无肺、肝、骨、前列腺、血液系统等恶性肿瘤，就诊前2周及观察期间未输血，未使用影响免疫系统的药物，无原发性及继发性免疫系统疾病。正常对照组30例，男14例，女16例，均为健康献血者，年龄22～40岁，平均（29.6±2.8）岁。
1.2 治疗方法 治疗组病人住院后即给予αD 3 冲击治疗。用活性αD 3 （1-OHαD 3 ），0.5μg，口服，每日2次;碳酸钙，0.5g，口服，每日2次。2周后均改为常规量:活性αD 3，0.5μg，口服，每日1次;碳酸钙，0.5g，口服，每日1次。同时给予相应的针对病因及慢性肾衰的治疗。有8人因病情需要在2周观察期间行临时血液透析治疗，每人1～4次不等。
1.3 试剂及仪器 （1）血清钙（S-Ca）及血清磷（S-P）:用自动生化分析仪常规实验室方法检测。（2）血清SIL-2R;采用化学发光酶免疫法，用美国得普公司IMMULITE分析仪检测，敏感度5U/ml。（3）IL-2:采用酶联免疫吸附法即ELISA检测法，使用德国贝克曼公司提供的试剂盒检测，敏感度3pg/ml，（4）血清iPTH:采用化学发光酶免疫法，用IMMULITE分析仪检测，敏感度0.1pg/ml。（5）T细胞亚群:使用HISTOSTAIN TM -SAP试剂盒，采用酶标记的链霉卵白素-生物素方法（LAS-SA），应用免疫酶染色原理检测。试剂盒由美国ZYMED公司生产，北京中山生物技术有限公司提供。
1.4 统计学处理 各检测指标用X±s表示，治疗组治疗前后检测值的比较采用配对t检验，治疗组治疗前与对照组比较采用两组间t检验，iPTH与CD 3 、CD 4 、CD 4 /CD 8 、IL-2及SIL-2R的关系采用相关分析。以P<0.05判定差异有显著性。
2 结果
2.1 CRF患者在活性αD 3 治疗前与对照组检测指标的比较及治疗前后免疫功能的变化治疗组在治疗前血清iPTH、CD 8 、SIL-2R值及S-P水平明显高于正常对照组，差异有显著性（P<0.05～0.01）;而CD 4 、CD 4 /CD 8 、S-Ca值及血清IL-2水平较对照组明显降低（P<0.01）;CD 3 值与对照差异无显著性（P>0.05）。经活性D 3 及碳酸钙冲击治疗后，与治疗前相比血清iPTH、S-P有显著下降，差异有显著性（P<0.01）;CD 8 、SIL-2R较治前也有下降趋势，但差异无显著性（P>0.05）;而CD 4 、CD 4 /CD 8 、S-Ca较治疗前均有明显升高（P<0.01）;IL-2较前有升高趋势，但差异无显著性（P>0.05）;CD 3 值治疗前后无变化（P>0.05）。见表1。
表1 CRF伴甲旁亢患者治疗前后的相关指标的变化 （X±s）（略）注:与正常对照组相比:ˇP<0.05， ˇˇ P<0.01;与治疗前相比: △ P<0.01。
2.2 相关性分析 CRF患者血清iPTH水平与CD 4 （r=-0.35）、CD 4 /CD 8 （r=-0.37）;比值呈线性负相关，（P<0.05）;与CD 8 值呈线性正相关（r=0.35，P<0.05）;虽与CD 3 （r =-0.05），及IL-2（r=-0.08）有负相关趋势，与SIL-2R有正相关趋势（r=0.04），但均不具有统计学意义（P>0.05）。结果见表2。
表2 CRFPTH水平与T细胞亚群及IL-2、SIL-2R的相关性分析（略）
3 讨论
慢性肾衰竭及长期血液透析的患者伴有免疫机能低下，细胞免疫功能障碍尤为明显。从细胞水平讲，辅助性T淋巴细胞（T H ，CD 4 TLC）和抑制性T淋巴细胞（T S ，CD 8 TLC）之间的相互诱导和相互制约所形成的T细胞网络对于调控免 疫反应和维持免疫自稳具有重要的作用［5］ ，T H /T S 比值的动态平衡是决定人体免疫调节与免疫反应的中心环节［6］ 。CD4/CD8比值的明显降低是T细胞功能紊乱、免疫反应受到抑制的重要表现。
本实验结果显示非长期血液透析的慢性肾衰竭（尿毒症期）患者存在T细胞亚群的分布异常，其中CD 4 值明显低于正常（P<0.01），CD 8 值高于正常（P<0.05），CD 4 /CD 8 比值明显低于正常（P<0.01），与文献报道相一致 ［7］ ，且本文结果显示CRF患者的T细胞总数（CD 3 细胞）与正常相比并无减少，提示慢性肾衰患者细胞免疫低下的主要原因之一是亚群比例失调，而并非T细胞总数的减少。且这种比例失调与CD 4 降低及CD 8 增高都有关系，而不仅仅是其中一种T细胞亚群改变的结果。
PTH已被证实是参与许多尿毒症综合征的主要尿毒素因子之一 ［8］ 。本研究结果显示CR患者iPTH的升高与CD 4 下降、CD 4 /CD 8 比值降低呈显著相关（P<0.05），与Angelini ［9］和黄岫 ［10］ 等人的报道一致，提示在iPTH呈缓慢升高并且长期处于高水平的慢性肾衰竭患者中，PTH与T细胞亚群比例失调、功能受抑有关。高水平的PTH是CRF患者细胞免疫功能受损的重要原因。本研究并未发现CRF患者的T细胞总数降低，其数值与血清iPTH水平也无相关性，提示PTH导致CRP患者的免疫低下并非通过使T细胞总数减少所致。IL-2/IL-2R系统是机体免疫网络中最重要的调节系统之一。SIL-2R是一种通过酶的作用从T细胞膜上脱落下来的低亲和力的IL-2R，可被视为免疫抑制剂 ［11，12］ 。本研究显示伴有甲状旁腺功能亢进的CRF患者的血清IL-2水平明显低于正常对照（P<0.01），而SIL-2R水平明显高于正常对照组（P<0.01），提示IL-2/IL-2R系统的平衡遭到破坏，这种改变的结果使该系统的免疫抑制活性增强。这也可能是引起CR患者免疫功能低下的因素之一。PTH导致慢性肾衰竭患者T细胞功能低下的具体机制不清。Stojceva-Taneva ［13］ 和Jadwiga