HPLC法检测阿魏酸钠葡萄糖注射液中5-HMF

　     【摘要】 采用高效液相色谱法测定阿魏酸钠葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛（5-HMF），用HYPERSILBDS C 18 色谱柱，以甲醇:水:冰乙酸（38:62:0.8）为流动相，检测波长为284nm，平均回收率为100.2%（RSD=0.61%）。本法简便，灵敏和准确。 

　　关键词 5-羟甲基糠醛 阿魏酸钠葡萄糖注射液 高效液相色谱法

     　Detection of5-HNF in sodium ferulate-glucose injection by HPLC  

　　Dong Wei，Meng Xiangjun

    　 Department of Chemistry，Shenyang Medical College，110034

      【Abstract】 A high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of5-HMF in ferulate-glucose injection.A HYPERSILBDS C18column was used，with the mobile phase of sodium methanol-water-acetic acid（38:62:0.8）.The detection wavelength was284nm.The average recovery was100.2%（RSD=0.61%）.The method was proved to be simple，sensitive and accurate.

   　 Key words 5-Hydroxymethyl furfuraldehyde（5-HMF） sodium ferulate glucose injection HPLC  

　　阿魏酸钠（Sodium ferulate，）是化学合成的阿魏酸钠盐，具有抗血小板凝集、抗血栓形成、保护心肌、抗脂质过氧化等广泛的生理活性，临床广泛用于心、脑、肾脏疾病的治疗［1］。《中国药典》（2000年版二部）葡萄糖注射液中5-HMF限度检查方法为紫外分光光度法［2，在284nm处测定吸光度，以控制限量。由于阿魏酸钠葡萄糖注射液在254、287、310nm处有最大吸收，干扰了5-HMF的紫外检测［3］，因此，采用HPLC法测定5-HMF的量。

　　1 仪器与试药

    　1.1 仪器

　　大连依利特P-200Ⅱ型高效液相色谱仪，UV200紫外可变波长检测器，Echrom98色谱工作站，PE-λ 2 紫外可见分光光度计。

    　1.2 试药

　　阿魏酸钠（苏州医药集团公司）;5-羟甲基糠醛（美国Sigma公司）;阿魏酸钠葡萄糖注射液（吉林万生药业有限责任公司，20020907，0020908，20020909）;甲醇为色谱纯。

　　2 方法与结果

    　2.1 色谱条件

　　色谱柱:HYPERSILBDS C 18 （250×4.6mm，5μm）;流动相:甲醇:水:冰乙酸（38:62:0.8）;柱温:20～30℃;检测波长:284nm;理论板数按阿魏酸钠计算应不低于2000，5-羟甲基糠醛与阿魏酸钠的分离度符合要求;流速:1.00ml/min。   

　　2.2 溶液的配制

　　精密称取5-HMF50mg置50ml量瓶中，加流动相溶解，定容。精密吸取该溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相定容，作为标准储备液。

   　 2.3 标准曲线制备

　　精密量取5-HMF标准储备液适量，用流动相分别稀释成0.5，1.0，1.5，2.0，2.5μg/ml的溶液;取20μl注入色谱仪中，在上述色谱条件下测得峰面积（见图1）（略）;以峰面积Y对浓度X绘制标准曲线，得回归方程y=40.542x-0.005，r=0.9999，表明在浓度0.5～2.5μg/ml范围内线性良好。另取20μl试样重复进行，峰面积RSD=0.52%（n=5）。图1（略）

      　2.4 回收率测定

　　精密量取已测得5-HMF含量的阿魏酸钠葡萄糖注射液50ml，置100ml量瓶中，精密加入5-HMF标准储备液1ml，加流动相至刻度;按样品测定方法，计算平均回收率为100.2%，RSD=0.61%（n=5）。

   　 2.5 样品5-HMF含量的检测

　　精密量取阿魏酸钠葡萄糖注射液20μl注入色谱仪，按上述色谱条件测得5-HMF的色谱峰面积;另精密量取5-HMF标准溶液20μl注入色谱仪，同法测得峰面积，按峰面积外标法计算，结果:3批样品中5-HMF含量分别为9.1，10.3，9.6μg/ml。

   　 3 讨论

　　用本法测定阿魏酸钠葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛含量，可消除阿魏酸钠的干扰，且方法简单，快速，准确。5-HMF在284nm有最大吸收，故本法选用284nm为检测波长。生产实践证明，生产过程不当（如灭菌温度过高，时间过长）很容易造成5-HMF含量偏高，因此，我们认为必须对测定阿魏酸钠葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的限量进行控制，确保用药安全。

　　参考文献

    　1 阳跃忠，黄文新.阿魏酸钠对冠心病心绞痛治疗的临床研究.华夏医学，2003，3:301-302.

    　2 中华人民共和国药典（二部）.北京:化学工业出版社，2000.

   　 3 王晓玲，王英，李岚.RP-HPLC测定盐酸米托蒽醌葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛的含量.华西药学杂志，2001，16（4）:378-379. 

　　（收稿日期:2004-04-13）

　　（编辑清 泉）

 　　作者单位:110034沈阳医学院基础部化学教研室