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【摘要】 目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF）对大鼠肺炎造成心肌损害的保护作用。方法 用金黄色葡萄球菌制作肺炎大鼠模型。观察bFGF对它们的心肌病理改变及心肌组织中丙二醛（malondialdeˉhyde，MDA）、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）及钙含量的影响。结果 肺炎组及治疗组心肌出现明显病理损伤，经bFGF治疗这种损伤明显减轻，相互比较差异均有显著性（P均<0.01）。肺炎组及治疗组与对照组的比较心肌组织中的MDA、钙含量明显增多（P均<0.01），而ATP含量明显减少（P<0.01）;经bFGF治疗心肌组织中的MDA、钙含量明显减少（P均<0.01），而ATP含量明显增多（P<0.01）。结论 bFGF对肺炎大鼠的心肌损伤有保护作用。
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 肺炎 心肌 大鼠
Effects of basic fibroblast growth factor on myocardial injury in pneumonia rats
Xu Fengming，Zhang Zhenhua，Huang Yuge，et al.
Department of Pediatrics，The Affiliated Hospital，Guangdong Medical College，Zhanjiang524001.
【Abstract】 Objective To study the effects of basic fibroblast growth factor（bFGF）on myocardial injury in pneumonia rats.Methods To make the pneumonia rat model with staphylococcus.Observing the effects of bFGF on myocardial injury and malondialdehyde（MDA），adenosine triphosphate（ATP），calcium in myocardium in pneumonia rats.Results bFGF apparently relive myocardial injury and decreased myocardial MDA，calcium levels，and inˉcreased myocardial ATP level，respectively.Conclusion bFGF may play an important protective role againt myocarˉdial injury in pneumonia rats.
Key words basic fibroblast growth factor pneumonia myocardium rat
支气管肺炎引起心肌损害的机制虽尚未完全清楚，但认为与感染等引起的过氧化脂质增多、心肌组织细胞钙超载等有关。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是一种多功能细胞生长因子，Liu等 ［1］ 认为bFGF可保护心肌细胞免受氧自由基的损害。本研究通过建立金黄色葡萄球菌的大鼠肺炎模型，静脉应用重组bFGF，探讨bFGF对肺炎大鼠心肌的保护作用，为bFGF在临床上用于治疗感染性重症肺炎提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 材料 Wistar大鼠30只（广东医学院动物中心提供），体重250～300g，雌雄不分。金黄色葡萄球菌菌株由广州临床检验中心提供。bFGF由北京白鹭园生物技术公司提供，余试剂均为市售分析纯品。
1.2 肺炎大鼠模型制备 将金黄色葡萄球菌标准菌株稀释成6×10 13 /L。用戊巴比妥钠（30mg/kg）腹腔内注射麻醉大鼠，经气管插管，注入0.1ml菌株入大鼠肺内，喂养120h，即建立肺炎动物模型。对照组注射等量生理盐水。肺组织病理检查显示广泛病变和血气分析明显异常为本实验所要求的肺炎动物模型标准。
1.3 实验分组与处理 动物随机分为:（1）bFGF治疗组:按上述方法复制肺炎大鼠模型后，从尾静脉注射bFGF，每天1次，每次5μg，连续3天。（2）肺炎组:方法与bFGF治疗组相同，仅把bFGF改为等量生理盐水。（3）对照组:由气管注入与菌苗等量无菌生理盐水喂养120h后，每天尾静脉注射等量生理盐水。治疗3天后处死大鼠，取心肌组织做相应检查。
1.4 指标的检测
1.4.1 心肌病理切片 处死大鼠后迅速切取心尖心肌，置于10%甲醛液中固定，石蜡包埋，切片作HE染色，光镜下观察病理损伤。
1.4.2 心肌组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）及钙的测定 各取50mg心室肌制备匀浆，分别用硫代巴比妥酸法、原子吸收分光光度法及高效液相色谱仪测定MDA、钙及ATP含量。
1.5 统计学处理 结果用ˉx±s表示，数据处理采用PSS v11.5软件进行，采用Krusjal-Wallis秩和检验、方差分析和q检验。
2 结果
2.1 心肌组织光镜观察 参照Rona等 ［2］ 心肌组织病理分类法将心肌损伤分为4级:0级为无病变;Ⅰ级为心内膜下局灶性变性、坏死;Ⅱ级为心肌片状变性、坏死，病灶间无连接。Ⅲ级为心肌广泛融合性变性、坏死。结果显示肺炎组左、右心室心肌出现较为明显的心肌损伤，组织病理切片发现，心肌内膜下出现局灶性病变，心肌以Ⅱ度病理改变为主（与对照组比较，P<001）。经用bFGF治疗后心肌以Ⅰ级病理改变为主，心肌变性坏死区明显缩小（见表1）。
表1 各组大鼠心肌病理变化分组 n 心肌病理变化略
2.2 各组大鼠心肌组织中MDA、ATP及钙的含量 见表2。
表2 各组大鼠心肌组织中MDA、ATP及钙的含量 （略）
3 讨论
支气管肺炎引起患儿死亡的主要原因与心肌损害、心功能不全有关。支气管肺炎引起心肌损害的机理虽尚未完全清楚，但认为与感染等引起的过氧化脂质增多、心肌组织细胞钙超载等有关。有实验研究 ［3］ 发现肺炎幼鼠离体心脏灌流液中乳酸脱氢酶、肌酸激酶增高。本研究结果显示，肺炎大鼠心肌组织中MDA、钙浓度明显增高，而ATP明显减少，光镜下心室肌明显的片状变性、坏死。临床研究发现支气管肺炎心衰患儿血浆一氧化氮（NO）、过氧化脂质增高，且与肌酸激酶同工酶（CK-MB）呈正相关性 ［4］ 。这些均提示支气管肺炎可引起心肌的损害。这种心肌损伤与心肌线粒体钙转运障碍、心肌细胞内钙超载及心肌三磷酸腺苷（ATP）含量下降密切相关 ［3，5］ 。 bFGF是一种多功能细胞生长因子，广泛存在于心肌细胞、细胞基质中，可作用于多种组织，促进血管的增生和组织细胞的增殖、再生等。Liu等 ［1］ 认为bFGF可保护心肌细胞免受氧自由基的损害。国外学者 ［6，7］ 研究发现，在心肌梗死的动物模型中，应用重组bFGF可减少心肌细胞的坏死，缩小心肌梗死范围、改善心脏功能。本研究结果显示，肺炎大鼠心肌组织细胞损伤以Ⅱ级为主，经用bFGF治疗后病理损伤明显减轻，且治疗后肺炎大鼠心肌组织中的MDA、钙含量明显减少，而ATP含量明显增多，提示bFGF对肺炎大鼠的心肌损伤有治疗作用。bFGF使心肌组织中丙二醛（MDA）及心肌细胞线粒体钙含量下降，增加心肌ATP含量，明显改善受损的心脏功能 ［8］ 。故认为bFGF作为感染性肺炎引起的心肌损伤的一种治疗手段值得进一步研究。
参考文献
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作者单位:524001广东医学院附属医院儿科
（收稿日期:2004-08-03）
（编辑罗 彬）