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【摘要】 目的 研究胎盘型谷胱甘肽转移酶（GST-pi）与p53蛋白在肠腺癌和增生性病变中表达的意义。方法 应用S-P免疫组化法检测36例肠腺癌、16例肠腺瘤伴非典型增生、20例肠腺瘤、10例肠息肉组织中GST-pi与p53蛋白表达的关系。结果 GST-pi与p53蛋白在肠腺癌中阳性表达率分别为88.8%和86.1%，与其他组相比差异有显著性（P<0.01），腺瘤伴非典型增生组的表达率为81.25%和68.75%。结论 在肠道增生性病变中既有GST-pi 与p53蛋白的表达，并随着细胞增生程度的增高、非典型增生到肠癌其表达率亦明显增高，说明肠道病变中细胞的异型性与GST-pi、p53蛋白表达呈正相关，可作为检测肠癌和肠道的癌前期病变的一个标志物。
【关键词】 肠肿瘤； 谷胱甘肽S转移酶； p53蛋白； 非典型增生
Expression of Glutathione-S-transferase-pi and p53 protein in colorectal proliferate diseases and carcinoma
WANG Cui-lian，LI Zong-xuan.
Department of Pathology Changzhi Medical College，Shanxi 046000，China
【Abstract】 Abjective To study the expression of glutathione- S-transferees（GST- pi）and p53 in colorectal proliferate diseases and cancer and relationship. Methods ImmunohistochemicalS- P method was used to detect the expression of GST-pi and p53 in 36 cases of colorectal carcinoma， 16 cases of adenoma with dysplasia， 20 cases of adenoma and 10 cases of polyp. Results The positive rates of GST- pi and p53in colorectal carcinoma， were 88.8% and 86.1%，which were significantly higher than those of another groups .The positive rates of GST- pi and p53 in adenoma with dysplasia were 81.25% and 68.75%. Conclusion The expression of glutathione- S-transferees（GST- pi）and p53 occurs at the early stage of colorectal proliferative diseases. The expression increases from cellular proliferation to dysplasia and carcinoma. The expression of glutathione- S-transferees（GST- pi）and p53 may be good markers for adenocarcinoma and precancerous lesion.
【Key words】 intestine neoplasms; GST- pi; protein p53; dysplasia
胎盘型谷胱甘肽转移酶（glutathione-S-transferase，GST- pi ）是GST-s的一种亚型，在肿瘤组织中有过度表达，并可充当不同肿瘤的标志物，是正常和恶性肠肿瘤中最常见的亚型，在原发性肠癌中GST- pi 较增生性病变有明显的表达［1］。p53蛋白是重要的肿瘤抑制基因，其突变广泛存在于人类肿瘤中。笔者应用免疫组化法检测肠道肿瘤和增生性病变中GST- pi 与p53的表达，探讨其二者相互关系。
1 材料与方法
1.1 材料 选取我院2000～2004年外科手术及肠镜活检标本72例， 病理分类：肠腺癌36例，肠腺瘤伴非典型增生16例，肠腺瘤20例，肠息肉10例。标本经中性福尔马林固定（10%），石蜡包埋，常规HE染色，4μm厚连续切片。
1．2 方法 应用免疫组化S-P法，鼠抗人单克隆抗GST- pi 和 p53抗体（购于福州迈新生物技术公司），GST-pi染色呈棕黄色，定位于胞浆，p53染色呈棕黑色，定位在细胞核，阳性细胞<5%为阴性，据阳性细胞的数量和染色强度，分为：（+）：阳性细胞数为5%～50%；（++）：阳性细胞数为50%～70%；（+++）：阳性细胞数>75%。
1.3 统计学处理 数据资料采用χ2检验。
2 结果
2.1 GST- pi在肠腺癌中阳性表达率为88.9%（32/36），其中（+）7例，（++）4例，（+++）21例。腺瘤伴非典型增生81.25%（13/16）， 腺瘤35%（7/20），息肉20%（2/10），各组之间差异有显著性（P<0.01），见表1。
表1 GST-pi在肠腺癌和增生性病变中的表达（略）
2.2 p53蛋白表达 p53阳性表达在细胞核。肠腺癌的阳性表达率为86.1%（31/36），其中弱阳性（+）8例，阳性（++）6例，强阳性（+++）17例。非典型性腺瘤阳性率为68.75%（11/16）、腺瘤为30%（6/20）、息肉为20%（2/10）。由此看出其阳性率由高到低，各组差异有显著性（P<0.01），见表2。
表2 p53蛋白在肠腺癌和增生性病变中的表达（略）
3 讨论
GST- pi属于一组多家族蛋白酶，是GSTs的亚型之一，在正常和恶性肠肿瘤中是最常见的亚型，原发性肠癌较其肠增生性病变的组织有较高的表达［2］，以GST- picDNA作探针，进一步证明了结肠癌组织中高表达［3］。近年来文献报道，肺腺癌及肺鳞癌组织中GST- pi表达远较小细胞肺癌高。我们知道，结肠癌、肺腺癌及肺鳞癌对化疗药物不敏感，在肿瘤细胞产生多药抗药性时，胞内谷胱甘肽含量往往升高。因此，GST- pi高表达可能是抗药性标志之一［3］。认为是检测癌变“启动” 细胞较早较敏感的标志，而GST- pi在多种肿瘤组织中表达也明显增高，如胃癌、膀胱癌等［4］。
本研究结果显示，腺瘤伴有非典型增生及腺癌组织中GST- pi表达明显高于息肉和腺瘤，同时腺癌组中GST- pi的过表达与非典型性腺瘤间差异也有显著性（P<0.01）。因此，说明随之肠腺上皮细胞异型性的增高其组织内GST- pi含量也增高，GST- pi是肠腺癌和癌前病变较好的标记物［4］。
p53是由393个氨基酸组成的细胞核磷酸蛋白，正常p53称野生型p53（wtp53），突发者称突变型p53（mp53）。野生型p53为一转录因子，DNA有异常时，p53使其转录活动明显增加，并使细胞停止于G1期，以待DNA修复；如DNA破坏严重，则不能修复，wtp53直接命令细胞凋亡，所以其具有抑制细胞的增殖和促进细胞凋亡的作用，又称凋亡基因［5］。其半衰期短含量低，用免疫组化方法很难检测出来。mp53尚有抑制细胞凋亡和促进细胞增殖的作用，半衰期长，具有很好的稳定性，而且能与一些癌蛋白形成稳定的复合物，使其含量在癌细胞核内明显增加，用免疫组织化学方法很容易检测出来。本研究显示肠道病变从良性增生到肿瘤性增生以至于到非典型增生和癌变，组织中的p53表达逐渐增高，这是由于p53基因突变所造成的。腺癌的阳性率为86.1%，同时过表达较多，非典型增生表达为68.75%。与其他各组间均有明显差异性，说明p53蛋白的表达是反映肿瘤细胞异型性的一个较客观的指标，与Joypaul等［6］报道相一致。
本研究表明，在肠腺癌以及增生性病变中GST- pi 与p53蛋白表达呈正相关，提示二者之间有相互诱导、协调作用。可作为检测肠癌和肠道的癌前期病变的一个标志物。
【参考文献】
1 梁小秋，芬琦.胎盘型谷光甘肽S转移酶：一种新的肿瘤标志物.国外医学·生理病理学分册，1997；17：41.
3 Chen GK， Lacayo NJ， Duran GE，et al. Preferential expression of a mutant allele of the amplified MDR1 (ABCB1) gene in drug-resistant variants of a human sarcoma. Br J Cancer，2002， 86：1578-1585.
3 张覃沐. 抗肿瘤药物的药理与临床应用.郑州：河南医科大学出版社，1999，53-55.
4 Toffoli G， Viel A， Tumiottl L， at al. expression of glutathione- S-transferees- pi in human tumors. Eur J Cancer， 1992， 28A： 1441.
5 Gldsmith ME，Gudas JM，Schneider E，et al.Wild type p53 stimulates expression from the human multidrug resistance promoter in p53-negative cell line. Chem，1995， 270：1894-1898.
6 Joypaul BV，Newman EL.Expression of p53 protein in nomal， dysplastic and malignant gastric mucous an immunohistochemical study. J Pathol，1993，170(3)：297.
(编辑：余 强)
*基金项目：山西省教委基金资助项目(NO.199751)
作者单位： 046000 山西长治，长治医学院病理教研室
110001 辽宁沈阳，中国医科大学病理教研室