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【摘要】 目的 对4种检测淋病奈瑟菌的方法进行比较和评价。方法 本文对60例来自妇科门诊的非性病患者和140例来自皮肤科、妇科门诊的疑淋病患者分别做涂片、培养、 聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)4种检测方法，以培养为对照评价各方法的临床应有价值。结果与结论 在60例非性病患者中,培养和涂片均为阴性,但PCR有2例假阳性，假阳性率均为3.3%。在140例凝淋病患者中,有36例培养阳性,其中PCR性31例,故PCR的假阴性率为13.89%,而36例中ELISA呈阳性与培养方法结果相符合。
【关键词】 淋病奈瑟氏菌;聚合酶链反应式；酶联免疫吸附试验
淋病奈瑟菌是性传播疾病的主要病原,淋病的诊断主要依靠实验室检查,传统的涂片染色方法敏感性和特异性不高,分离培养法所需时间较长。近年来,淋病检测免疫学方法和聚合酶反应(PCR)在实验室中广泛应用,本文以培养法为对照,对4种淋病检测方法作一比较和评价。
1 材料与方法
1.1 标本来源 140例来自皮肤科、妇科门诊的疑淋病患者，其中男78例,女62例。60例来自妇科门诊的非性病患者,作为阴性对照组。
1.2 试剂 NG培养基和ELISA试剂盒(上海生物制品研究所)。NG PCR诊断试剂盒(上海中亚生物基因研究所)。
1.3 方法
1.3.1 涂片法 分泌物直接涂片,做革兰染色,镜检如见多形核白细胞内查到革兰阴性双球菌,为“疑似淋病双球菌”。
1.3.2 培养法 分泌物直接接种于NG培养基上,在5%CO2孵箱培养24～48h,按常规方法鉴定。
1.3.3 PCR法和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定法 按说明严格操作。
2 结果
2.1 对照组检测结果 60例妇科门诊非性病患者的涂片和培养结果均为阴性,但PCR和ELISA测定各有2例阳性,二者假阳性率均为3.3%。
2.2 140例疑淋病患者的测定结果 见表1。表1 140例淋病患者检测结果 在36例培养阳性的病例中,涂片阳性者29例,阳性率80.55%,7例阴性者均是女性,PCR阳性者31例,阳性率86.11%,2例PCR结果阴性者的涂片和培养结果均呈阳性,其PCR结果系假阴性,应无疑问。36例中ELISA呈阳性与培养方法结果相符合。
3 讨论
淋病的病原学检查长期以来一直采用直接涂片镜检找病原菌或NG培养的方法。由于女性生殖道内杂菌较多,其中有些革兰阴性球菌与NG十分相似,因此涂片镜检的方法不适用于女性的淋病诊断，NG十分脆弱,离体后很快死亡并自溶,且NG的培养营养要求较高,生长缓慢,需48h后方出现可见菌落,阳性率不高,不易作出早期诊断。
涂片中易出现假阳性结果,尤其是女性患者,涂片检查因有时可见灰色奈瑟菌和正常菌群中的不动杆菌和摩拉菌,它们的形态与淋病奈瑟氏菌很相似,易误诊,造成假阳性,由此可见单一的涂片阳性难以确诊NG感染,因此现行诊断标准以培养为主有其合理的一面,但也存现漏诊的可能性。
本文ELISA检测是采用国际标准血清型菌株制备的多价抗血清检测抗原的快速一步酶联法,以常规的NG培养作为标准进行比较,两法的结果较为符合,PCR与传统的培养方法比较,在检测离体标本时不怕病原体死亡和自溶,不怕杂菌的干扰,具有快速敏感的优点,可检测出含量极低的病原菌,但操作不当,而容易出现假阳性,故PCR的结果应结合临床病史,治疗情况综合判断结果。
本实验选用的ELISA试剂盒可用于泌尿生殖器分泌物标本的直接检测或NG培养物的鉴定，具有快速、敏感、特异、稳定、不需要特殊设备等特点,且操作简便,结果与NG培养的符合性较好,适用于临床日常检测工作。
作者单位： 330800 江西高安，高安市妇幼保健院
(编辑：汪 洋)