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【摘要】 目的探讨声带息肉与人类乳头状瘤病毒（HPV）感染的关系。 方法在光学显微镜下观察声带息肉组织切片中上皮单纯角化、角化不良、单纯增生、不典型增生和角化伴增生的形态学变化，以及挖空细胞在声带息肉组织中出现的情况，并应用免疫组织化学SABC-KIT方法进行HPV检测。 结果 声带息肉挖空细胞的出现与性别、上皮单纯角化、角化不良、单纯增生、不典型增生和角化伴增生无关（P均>0.05）;HPV感染与上皮单纯角化、角化不良、单纯增生、不典型增生及角化伴增生无关（P均>0.05）;而挖空细胞的出现与HPV的感染有关（P<0.01）。 结论 在声带息肉的发生发展中HPV起着重要作用。
关键词 声带息肉 人类乳头状瘤病毒 免疫组织化学染色
A study on relationship between the infection of human papilloma virus and vocal cord polyp
Chen Xiaoping
Tianjin Yejin Hospital，Tianjin300182.
【Abstract】 Objective To evaluate the relationship between infection of human papilloma virus（HPV）and vocal cord polyp.Methods The morphological changes and koilocytosis were observed in the tissue slices of vocal cord polyp.Results There was no relationship between koilocytosis or infection of HPV and epithelial simple keratosis，dyskeratosis，simple proliferation，atypical proliferation and keratosis with proliferation（all P>0.05），but there was a closely relation-ship between koilocytosis and infection HPV（P<0.01）.Conclusion The HPV may play an important role in the de-veloment of VCP.
Key words vocal cord polyp human papilloma virus immunohistochemical staining
声带息肉（VCP）是局部黏膜的炎症水肿，其病因多年来众说不一，病理改变主要在黏膜固有层（相当于Reink层）。本文采用免疫组织化学染色法检测人类乳头状瘤病毒（HPV），观察VCP中挖空细胞，并研究其与HPV的相关性，以了解HPV在VCP的发生发展中所起的作用。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组108例石蜡包埋VCP组织切片，取自1992年1月～2003年10月在我院耳鼻咽喉科手术治疗患者，男61例，女47例，年龄20～67岁，平均（43.68±6.12）岁。吸烟者46例，不吸烟者62例;常表现为无痛性声音嘶哑;病程2个月～3年。
1.2 方法 （1）在光学显微镜下观察息肉标本，用HE染色，石蜡切片4μm。观察指标包括有上皮单纯角化、角化不良、单纯增生、不典型增生和角化伴增 生等，并观察挖空细胞在VCP组织中出现的情况。（2）本组108例VCP标本应用免疫组织化学SABC-KIT方法进行HPV检测，以了解HPV与VCP的相关性。免疫组织化学染色结果观察标准:阳性为上皮细胞核中出现显色，呈鲜艳的棕黄色颗粒;阴性为上皮细胞中未见鲜艳的棕黄色阳性颗粒。
1.3 统计学方法 计数资料用χ 2 检验，以P<0.05为差异有显著性，全部统计工作用SPSS10.0软件完成。
2 结果
108例中，角化14例，角化不良17例，单纯增生14例，不典型增生32例，角化伴增生31例。其中部分切片出现交叉表现。挖空细胞多位于中表层，呈灶状分布，也有散在出现，细胞边界不清;无明显细胞增大及胞浆中丝状物出现;核固缩成镰刀形，核仁多消失，核形态大小不一，核周胞浆出现空泡，属Ⅰ型挖空细胞改变，其阳性表达情况见表1～3。 表1 性别与VCP中挖空细胞、HPV的关系 （例） 注:P均>0.05表2 上皮细胞形态与挖空细胞、HPV检查结果的关系 （略）注:P均>0.05表3 挖空细胞与HPV的关系（略）注:P<0.01由上表可见，挖空细胞出现与性别及上皮细胞形态无关（P均>0.05）;HPV感染与性别及上皮细胞形态亦无关（P均>0.05）;而挖空细胞的出现与HPV相关（P<0.01）。在44例未检出挖空细胞的标本中，15例有HPV感染;而64例有挖空细胞的VCP标本中，25例HPV为阴性。
3 讨论
通过对已确定HPV为其病因的疾病（如尖锐湿疣等）的大量病理学观测，人们认识到侵蚀性乳头状瘤样生长和过度角化的表皮层中挖空细胞的出现为HPV损害的典型病理特征 ［1］ 。研究认为代表HPV感染组织学特征的挖空细胞是成熟HPV在宿主细胞内大量繁殖引起细胞营养耗竭、组织变性的结果，从分子水平解释认为其机制是HPVE 4 蛋白与细胞 角蛋白相互作用导致细胞骨架破坏而形成的 ［2］ 。
HPV感染的检测通常采用引物介导的聚合酶链反应（GP-PCR），该试验方法的结果阳性检出率高、敏感、特异、简便、快速;对VCP组织，在没有确定有无HPV感染的情况下，采用广谱的HPV免疫组化SABC-KIT染色更合适，它具有很高的敏感性、低背景和操作简便的优点，可减少假阳性和漏诊的发生 ［3，4］108例VCP的病理切片及资料分析结果表明:VCP中固有层水肿、充血及炎性细胞浸润的现象并不多见，但有些切片可找到挖空细胞，VCP中挖空细胞的出现率达59.26%（64/108）。目前有关HPV致病机制的研究已进入分子水平，大量的研究表明 ［5，6］ :HPV的致病机制与其E 6 、E 7 转化基因有关。不同型别HPV其E 6 、E 7 基因转化活性不同，高危型HPV中的HPV 16 、HPV 18 其E 6 、E 7 基因有高度的细胞转化活性，可以使被感染或整合的多种细胞系向恶性方向转化。这种转化是通过两种途径实现的:（1）E 6 、E 7 基因本身的高复制和转录，通过对整合部位原癌基因的激活而引发恶变;（2）高倍地表达E 6 、E 7 蛋白。E 6 、E 7 蛋白对细胞的分裂增殖有激发作用，它可以作用于细胞增殖周期的特定阶段（如S期），加速细胞无限制的生长;此外，E 6 、E 7 蛋白还可以与p53蛋白和视网膜母细胞抑制基因产物蛋白结合，正常情况下后两者有抑制细胞分裂增殖的作用，这两种结合使得细胞的分裂增殖出现正常平衡状态的破坏，导致细胞无限制增生分裂，乃至恶变。低危型HPVE 6 、E 7 虽尚不致使细胞向恶性转化，但足以激发细胞的分裂增殖，使其上皮表现出高度的增生活性 ［7］ 。在喉部疾病中，HPV感染常常是不同型别引起的，导致的最终后果可能为VCP等良性病变，也可能为恶性病变，在这类疾病中HPV感染与挖空细胞出现明显相关 ［8，9］ 。
本组108例VCP标本行免疫组化SABC-KIT法染色检测HPV，发现挖空细胞的出现与HPV感染相关（P<0.01）。15例无挖空细胞的标本中也检测到了HPV，这是由于病毒侵入上皮的基底层，DNA在基底层细胞中复制，随着基底细胞的分化成熟向表层移动，HPV感染组织到组织中出现挖空细胞需要一段时间和过程，挖空细胞是HPV感染的结果 ［8，9］ 。25例切片有挖空细胞的VCP标本HPV检测为阴性，排除技术因素，说明无HPV感染，而挖空细胞的出现提示是否有其他病毒感染的可能，这需进一步的研究才能明确。本组病例中，HPV感染率50%，但由于此方法灵敏度不如其他方法高 ［3，4］ ，因此不排除VCP中HPV阳性率会更高;同时对VCP标本的取材部位不同、时间不同以及HPV感染率的地区性差异等原因，得出的结果也有差异。
总之，通过对VCP中挖空细胞的观察及其与HPV的相关研究，认为在VCP的发生发展中HPV起着重要作用，在今后VCP的防治中应考虑进行有关HPV的检测，将对HPV感染的诊治更具指导作用。
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作者单位:300182天津市冶金医院
（编辑吴 莹）