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【摘要】 目的 探讨在我国现有情况下眼库运作管理特点，离体角膜内皮显微镜在眼库运作中的重要性及操作过程中的注意事项。方法 回顾武汉市红十字会眼库成立1年来工作开展情况，统计2003年10月～2004年10月武汉市红十字会眼库接受角膜捐献宣传、咨询、登记、接受和利用情况。通过应用离体角膜内皮显微镜检测6只捐献的角膜内皮细胞情况，分析离体角膜内皮显微镜操作过程中的注意事项、检测结果的影响因素。结果 1年内武汉市红十字会眼库共组织公开宣传活动2次，媒体宣传3次；接待电话或来访200余次；完成《角膜捐献登记表》登记18份；接受遗体角膜捐献3例，均为恶性肿瘤晚期患者。4只角膜片在摘除后30min放入Optisol保存液，观察角膜内皮细胞数>2888个/mm2；2只角膜片摘除后2h放入Optisol保存液，观察角膜内皮细胞数>3104个/mm2。4℃恒温保存14天后观察，摘除后2h放入保存液的2只角膜片内皮细胞数降低至1036个/mm2和998个/mm2；摘除后30min放入保存液的4只角膜片内皮细胞数均>2761个/mm2。结论 眼库工作还需要进一步广泛宣传，以提高人们的认识，获得更多的角膜。目前我国眼库角膜供体大多罹患严重全身疾病，生前经过多种治疗，而且由于交通、信息等原因使角膜片的摘除、保存时间差异很大，因此采用离体角膜内皮显微镜对角膜质量进行评价特别重要。
【关键词】 眼库；角膜；离体角膜内皮显微镜
Some advise for eye bank management and operation of the specular microscopy
ZHANG Hong,LI Gui-gang.
The Department of Ophthalmology,The Affiliated Tongji Hospital,Tongji Medical College, Wuhan 430030, China
【Abstract】 Objective To evaluate the characteristic of eye bank development;and to discuss the importance and operation of the specular microscopy.Methods The data come from the Red Cross Eye Bank of Wuhan.The number of broadcasting,consulting,register,reception and using of the cornea donation were collected for analyzing.The affecting factor in cornea endothelium examination of specular microscopy were also analyzed through using in six donor cornea.Results From Oct 1st 2003 to Oct 1st 2004,the Red Cross Eye Bank of Wuhan held two times opening promotion,three times media reports,more than two hundreds of consulting,accomplished eighteen tables,received six pieces of donor corneas.All the donors died of cancer and without affecting diseases.Four pieces of the corneas were put into the mid-time preserve media(OPTISOL),which endothelium decreased from 2888/mm2 to 2716/mm2;two pieces of corneas were put into balanced salt solution before transferred into OPTISOL,which endothelium decreased from 3104/mm2 to 998/mm2.Conclusion In our country,there need more wide promotion for eye bank to get more donor cornea.Because most of the donor will be affected by complicated diseases in a quite long time,and the collection and preserve of the corneas varied for communication and information reasons,the evaluation of the donor corneas with specular microscopy seems very important in the eye bank operation.
【Key words】 eye bank;cornea;specular microscopy
自2003年10月1日《武汉市遗体捐献条例》［1］正式颁布后，武汉市同时成立了4个遗体捐献登记接受站，1个角膜捐献登记接收站暨眼库。武汉市红十字会眼库设在华中科技大学同济医学院附属同济医院，自眼库成立以来，医院累计投入资金近100万用于眼库场地装修、仪器购买和人员培训工作。目前眼库已经开展遗体角膜捐献的咨询、登记、收集、保存等工作。本文就1年来的眼库运作管理及角膜内皮显微镜使用情况做一回顾性分析，探讨在我国现有情况下眼库运作管理特点，探讨离体角膜内皮显微镜操作过程中的注意事项、检测结果的影响因素，为眼库的下一步发展规划提供参考。
1 资料来源
武汉市红十字会眼库2003年10月1日～2004年10月1日1年时间内的工作、档案文件。
2 统计结果
2.1 宣传 共进行2次正式的角膜捐献宣传活动，通过媒体报道宣传3次。
2.2 咨询登记 共接待电话及来访咨询200余人次，发放《武汉市遗体捐献条例》、《武汉市遗体捐献条件简介》等宣传品1000余份，共完成《武汉市角膜捐献申请登记表》18人次。
2.3 遗体角膜接受、保存、利用 共接受3人6只角膜片的遗体捐献，严格按照《武汉市遗体捐献条例》［1］的要求，参照《眼库操作规范及医学标准（草案）》规范。在获取捐献角膜片前，认真核对患者生前病史、各项化验单，均没有发现禁忌角膜捐献的传染性疾病病史、体征。3例均在死亡1h内无菌操作摘取角膜，4只角膜摘取后立即放入Optisol中期保存液，2只经过平衡盐溶液保存2h后转入Optisol中期保存液，立即在离体角膜内皮显微镜（HAI-EB2000）进行角膜内皮细胞的计数、形态分析，保存过程中多次检测。
2.4 遗体角膜质量评估 3例捐献者年龄分别为47、65、81岁，死亡原因均为癌症全身转移，死亡前曾接受12～24个月的化学药物治疗，因呼吸衰竭使用呼吸机1～5天。肉眼观察，6只角膜片透明，无明显水肿和上皮缺损。角膜摘除后30min保存的4只角膜片内皮细胞数>2888个/mm2，摘除后2h转入保存液的2只角膜内皮细胞数>3104个/mm2；角膜内皮细胞形态大致呈多角形，六角形细胞分别占26.79%～47.37%,后者同时伴有细胞边界变模糊。保存14天后观察，2只经过平衡盐溶液保存的角膜内皮细胞数降低至1036个/mm2和998个/mm2，伴角膜水肿变厚；另4只角膜片内皮细胞数均>2761个/mm2，细胞边界稍模糊。
分析原因为角膜片摘取后放入保存液前曾有2h时间浸泡于生理盐水中，而生理盐水的渗透压低于角膜内皮细胞胞浆，可以引起细胞损伤。
3 讨论
眼库是负责登记、筛选、接受、保存离体角膜组织的公益性机构，为临床、教学和科研提供合格的供体或组织来源。印度、欧美等发达国家眼库经过数十年的发展，已经形成了统一的管理规范系统。在国际眼库联合会之下，各国都有完善的眼库组织。例如美国的EBAA（Eye Bank Association of America)，负责眼库工作规范的制定和管理，定期组织各成员眼库之间进行学术交流、人员培训，发达的通讯手段使各眼库之间可以进行信息、资源共享。他们都有完善的宣传途径，例如在印度［2］，眼库的宣传工作渗透到城市的每一个角落，除宣传词之外，还有联系电话，同时还有与各个场合相匹配的演讲材料，如录像带、幻灯片等。系统地介绍眼库的作用、日常工作、与眼库的联系方式、尸体的存放、获取角膜材料的部位、对死者外观的影响及死者提供角膜的社会价值等，使身后献眼作为一种高尚的行动已经深入人心。此外，国外眼库运作经费充足，主要来源于政府、慈善捐助。因此国外眼库每年可以获得大量的角膜，例如美国每年能够收集3万多，斯里兰卡每年5万多，其中一部分来源于意外死亡的健康人，从而可以用于角膜移植。
自1964年我国第一个眼库实验室在中山医学院中山眼科医院成立以来，陆续建立了10余所眼库，每年收集3000～3500只眼球。但是，目前我国眼库建设远落后于发达国家，大多数眼库设备简单、陈旧，管理人员配置不足，多数人员缺乏系统、严格的培训和考核；未能建立并采用一套公认的具有我国特色的技术规范体系；缺少有关供体取材标准和疾病排查等方面的法规［3］。
为了解决上述几个方面的问题，使我国眼库的基本建设逐步实现规范化、标准化及国际化，我国广大眼科和社会工作者做出了诸多努力。2003年在重庆市召开的全国眼库操作规范暨医学标准研讨会上，制订了《眼库操作规范及医学标准（草案）》［4，5］。武汉市第11届人民代表大会常务委员会第4次会议通过了《武汉市遗体捐献条例》，目前其他城市如北京、深圳、重庆、西安等也都有类似的法规出台，这对推进我国眼库工作的规范化意义重大。
我们在接待捐献者及其家属的过程中注意到两个问题：一是受我国根深蒂固的传统思想影响较重，担心遗体的完整性受到破坏，因此我们接收到的3例均只同意摘取角膜，另有1例经反复犹豫后放弃捐献。二是对捐献的角膜的用途和意义的理解片面，简单的认为角膜捐献就是移植给别人，不了解科学研究和教学的重要意义，如有1例志愿者在了解到其角膜只能被用于科研后放弃了捐献。而我国目前通过眼库获得的角膜大都为恶性肿瘤患者，生前接受过化学药物、放射等多种形式的抗肿瘤治疗，因此角膜质量差，大多数无法用作移植供体。因此我们应该借鉴重庆市眼库的成功经验［6］，加强宣传，提高人们对眼库、角膜捐献的认识水平，获得更多角膜。只有这样才能获得高质量的角膜用于移植手术。
离体角膜内皮显微镜是美国和国内绝大多数眼库所使用的离体角膜检查设备，国内外的关于眼库角膜的科研文章也多数来源于这种显微镜的数据结果，因此这一仪器是眼库的基本设备［7～10］。我们采用HAI-EB2000离体角膜内皮显微镜，可以获得清晰的角膜内皮细胞照片。角膜内皮的检测是角膜质量评价的关键指标。在角膜取材、保存过程中，供体死亡时间、机械损伤、保存时间和保存液等都可以影响角膜内皮细胞［5，7］。特别是目前我国眼库角膜供体大多数都伴有严重全身疾病，摘取时间又因交通便利不同而有差异，角膜内皮细胞质量的检测和评价显得更为重要。
4 结论
眼库工作还需要进一步广泛宣传，以提高人们的认识，获得更多的角膜；目前我国眼库角膜供体大多罹患严重全身疾病，生前经过多种治疗，而且由于交通、信息等原因使角膜片的摘除、保存时间差异很大，因此采用离体角膜内皮显微镜对角膜质量进行评价特别重要。
【参考文献】
1 武汉市第十一届人民代表大会常务委员会第四次会议文件.武汉市遗体捐献条例,2003年8月5日.
2 史静华,葛晋京.印度眼库见闻.山西护理杂志,1998,12(4):184.
3 陈家祺,周世有.重视角膜病诊治的规范化并加强眼库的基本建设.中华眼科杂志,2003,39(10):577.
4 全国眼库操作规范暨医学标准研讨会.眼库操作规范及医学标准(草案),2003年1月10日.
5 “眼库医学标准”草案推出.山东中医药大学学报,2003,27(2):102.
6 周善璧,彭俊超,许平,等.眼库宣传工作.国际眼科杂志,2004,2(4):260-263.
7 Grabska-Liberek I,Szaflik J,Brix-Warzecha M.The importance of various factors relating to the morphological quality of corneas used for PKP by the Warsaw Eye Bank from 1996 to 2002.Ann Transplant,2003,8(2):26-31.
8 谢立信,张新晨.眼库中角膜内皮细胞活性的检测方法.临床眼科杂志,1999,7(1):63-66.
9 史伟云,牛晓光,臧新杰,等.HAI EB-3000XYZ型眼库内皮显微镜对供体角膜内皮的评估.眼科研究,2005,21(5):515-518.
10 邹留河,魏林娜,王宏伦,等.Optisol角膜保存法.中国实用眼科杂志,1996,14(11):650-652.
作者单位： 430030 湖北武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科
(编辑：刘 俊)