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肺纤维化是呼吸系统难治病。近年来发病率逐渐增高，目前尚无满意治疗方法。本实验采用免疫组织化学染色法，测定肺组织TGF-β蛋白表达，从细胞因子的角度进一步探讨化纤胶囊对肺纤维化作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 雄性Wister大鼠，体重200±20g，由黑龙江省中医药大学实验动物中心提供，按清洁级标准饲养。
1.2 药物 化纤胶囊：10g/粒，黑龙江省中医药大学附属医院生产，主要成分由太子参、黄芪、沙参、麦冬、丹参、当归、蛤蚧等16味中药物。波尼松：每片5mg(哈尔滨生物化学制药有限公司生产，批号010608)。博莱霉素：每支8mg(哈尔滨平阳霉素制药有限公司生产，批号为970403)。
1.3 试剂 兔抗TGF-β多克隆抗体 深圳晶美公司提供，生物素化山羊抗兔IgG试剂盒均由武汉博士德生物技术有限公司,过氧化物、柠檬酸三钠多聚赖氨酸均由哈尔滨化学试剂总公司。
1.4 仪器 自动石蜡切片机、自动石蜡包埋机、万能显微镜，日本OLYMPUS公司；数码相机、图像分析仪,日本索尼公司；超低温冰箱、紫外分光光度计，日本索尼公司 ；液氮罐YBI-19-50,四川亚西机器厂。
1.5 实验方法 将60只Wister大鼠分正常组、模型组、中药组、激素组各15只。常规饲养动物3天后，制成肺间质纤维化模型。中药组口服化纤胶囊；激素组口服泼尼松，疗程为28天，分别于7天、14天、28天处死。动物取材切除左肺下叶2块组织，石蜡包埋，4μm连续切片做免疫组化染色，在高倍视野20倍下随机取5个视野，测定在大鼠肺脏组织TGF-β蛋白表达量。
1.6 统计学处理 所有数据均x±s表示，统计学处理采用SPSS 10.0软件进行完成。
2 结果
正常肺组织TGF-β表达为阴性，用博莱霉素处理后大主支气管，细支气管黏膜上皮细胞TGF-β表达明显增强。肺纤维化大鼠肺组织TGF-β随时间进展不断下降，7天、14天表达仍强于正常组，二者差异有显著性(P＜0.01)，28天与正常组差异无显著性。经化纤胶囊和强的松治疗后，其表达强度较模型组减弱，差异有显著性(P<0.05)。见表1。
表1 免疫组化测TGF-β在各组肺组织的蛋白表达 （略）
3 讨论
在肺纤维化形成中，细胞因子起着关键的作用。在细胞因子网络中，TGF-β是一种生物效应细胞重要的因子［1，2］。由肺巨噬细胞分泌，在肺纤维化中扮演核心角色［3，4］,它可刺激细胞外基质产生，又可引起体内细胞因子释放［5，6］。化纤胶囊组在TGF-β表达高峰期（7、14天）明显抑制其表达，与模型组比较差异有显著性(P＜0.01)，化纤胶囊组TGF-β恢复到正常水平时间（14天）比模型组（28天）为早，表示化纤胶囊降低TGF-β作用并非是TGF-β自身下降规律导致，化纤胶囊尽早尽快纠正TGF-β异常表达，起到抑制TGF-β表达作用。
【参考文献】
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作者单位： 150040 黑龙江哈尔滨，黑龙江省中医药大学附属第一医院ICU科
(编辑：日 强)