研究者探讨了卵裂期发育延缓胚来源的人类胚胎干细胞系的建立

《中华妇产科杂志》2007年第42卷第9期 中国研究者观察了体外受精（IVF）周期中24h内不发生卵裂的第3天（D3）发育延缓胚的体外发育潜能，为建立人胚胎干细胞库提供新的材料来源。研究者通过囊胚序贯培养法将卵裂期发育延缓胚培养至囊胚，观察囊胚形成率及囊胚质量。用逐步logistic回归分析囊胚形成率与卵裂球数、卵裂球对称性及卵裂球碎片比率的相关性。用免疫外科法去除滋养细胞，将得到的原代克隆接种于小鼠胚胎成纤维细胞上，体外传代并鉴定。结果发现120枚卵裂期发育延缓胚培养出囊胚22枚（囊胚形成率18．7％）。第6天早期囊胚、囊胚、满囊胚、扩张胚、孵化胚及孵化后囊胚的比率分别为5．9％、23．5％、35．3％、23．5％、5．9％及5．9％。内细胞团分级及滋养外胚层分级均仅有1个为A级，其余均为B或C级。发育延缓胚的囊胚形成率与卵裂球数、卵裂球对称性相关，而与卵裂球碎片比率无关。获得内细胞团7个，原代克隆3个，成功培养出2株人类胚胎干细胞系（hESC），并具有hESC的生物学特性：碱性磷酸酶（AKP）、阶段特异性胚胎抗原（SSEA）4、肿瘤排斥抗原（TRA）1-60、TRA-1-81呈阳性；悬浮培养可形成拟胚体；在严重免疫缺陷（SCID）小鼠体内可形成畸胎瘤；分别传45及35代后核型正常。由此，研究者得出结论，部分发育延缓胚可以发育为囊胚，从而可为建立人胚胎干细胞系提供新的材料来源。