严重急性呼吸综合征冠状病毒刺突蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化

2008年09月03日 《中华传染病杂志》2007年第25卷第9期 医学空间（MEDcyber.com）9月3日消息，该项研究目的是构建重组表达质粒pYES6-S，诱导SARS冠状病毒刺突蛋白（spikeprotein）在酿酒酵母中的表达并纯化。方法采用反转录获得SARS冠状病毒DNA片段，PCR法获得刺突蛋白基因互相重叠的四部分片段，酶切连接成全长，在大肠埃希菌E．coliJM109中构建重组表达克隆pYES6-S，在酿酒酵母巾诱导表达并纯化。结果重组克隆pYES6～S经酶切、测序鉴定确定，插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致，获得1个完整的刺突蛋白基因，表达产物纯化后，电泳鉴定，相对分子质量大小近110000。由此得出结论成功克隆SARS冠状病毒刺突蛋白基因全长，并在酿酒酵母中诱导表达成功，有助于抗SARS分子疫苗的研究。