人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneider-2细胞的表达和活性分析

2008年09月11日 《中华传染病杂志》2007年第25卷第9期 医学空间（MEDcyber.com）9月11日消息，中国研究者对HIV-1辅助受体趋化因子受体5（CCR5）配体人类CC3配体样蛋白1（CCL3L1）进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达，纯化后活性分析。他们采用克隆人类CCL3L1cDNA，构建CCL3L1表达载体pMT／BiP／His，获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白，同时克隆pCDNA3．1-flag—CCR5表达载体，培养稳定表达flag—CCR5的细胞株，检测表达人趋化因子CCL3L1活性。研究结果发现，成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白真核表达载体pMT／BiP／His，表达并纯化出融合蛋白His—CCL3L1。免疫沉淀法和Western印迹法分析发现，纯化的His—CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体，His—CCL3L1蛋白在浓度1～50nmol／L存在剂量依赖性，50～100nmol／L无剂量依赖性。由此，研究者得出结论，果蝇Schneider-2细胞表达的His—CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性，为进一步探讨CCL3L1影响HIV-1感染的机制奠定了基础。