反义Bmi-1对Jurkat细胞的抑制作用

2005年11月17日 中华血液学杂志2005 Vol.26 No.9 P.554-556 4 （大连）为了观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用，研究者选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171 bp核苷酸片段，反向连接于pLNCX2质粒上，得到反义Bmi-1表达质粒；通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中，以G418进行筛选得到阳性克隆；以MTT法和体外集落形成实验检测反义Bmi-1表达质粒对Jurkat细胞增殖的抑制作用,用流式细胞术分析细胞周期，采用免疫荧光组化法检测反义Bmi-1对Jurkat细胞P16蛋白的上调作用。结果转染反义Bmi-1表达质粒组与对照组(空白对照及空质粒组)相比较，生长速度明显变慢，克隆形成能力明显下降，空白对照组Jurkat细胞集落数为(90.70±9.07)/103细胞，空质粒组Jurkat细胞集落数为(83.30±6.11)/103细胞，转染反义质粒组Jurkat细胞集落数为(56.00±5.56)/103-细胞(P＜0.01)；P16蛋白表达也明显增强。可见反义Bmi-1对Jurkat细胞的体外生长具有明显的抑制作用，并上调了P16蛋白的表达。