淋病奈瑟菌mtrC膜蛋白基因的克隆和表达

2006年03月09日 中华皮肤科杂志 2005 Vol.38 No.11 P.674-676 3 （武汉）为了构建淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC表达质粒，探讨淋病奈瑟菌耐药的检测和耐药机制。研究者从淋病奈瑟菌标准株中扩增淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC基因片段.酶切后插入pET-28a(+)，构建重组表达质粒pET-mtrC。通过质粒双酶切和DNA测序证实该重组质粒构建正确。重组质粒转化人大肠杆菌DE3中，经IPTG诱导表达蛋白。结果经酶切鉴定和测序分析，质粒构建正确，核苷酸序列与GeneBank(U14993)公布的序列相比较，同源性达到99.5%。通过IPFG诱导，SDS-PAGE可检测到约48 500大小的融合蛋白,与预测分子量相同。可见淋病奈瑟菌膜蛋白mtrC原核表达质粒构建和表达成功，为研究其mtr外排系统的耐药机制打下基础。