沙眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

2005年04月22日 中华皮肤科杂志 2004 Vol.37 No.12 P.709-711 （湖南）为克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因，构建原核表达重组载体，并通过E.coliBL21实现MOMP的融合表达，研究者用PCR法扩增MOMP基因，克隆插入到pUCm-T载体中，序列测定正确后，将其亚克隆到原核表达载体pET-22b(+)中，采用Ni-NTA亲和层析法纯化表达产物，对表达产物进行SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定。结果PCR扩增出约1 200bp DNA片段，序列测定证实与基因库登陆的D型沙眼衣原体一致；表达产物的相对分子质量为47000，与预期分子质量相符，蛋白印迹证实表达产物为特异性蛋白。可见沙眼衣原体MOMP基因可以在大肠杆菌中得到表达，其表达产物能与相应的抗体结合，为沙眼衣原体核酸疫苗的研究奠定了基础。