RNA干扰对系统性硬化病皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

2006年05月04日 中华皮肤科杂志 2006 Vol.39 No.1 P.19-21 10 （长沙）为了研究RNA干扰对系统性硬化病(SS)皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平的影响。研究者设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA(siRNA)及一个非特异性siRNA。体外转录获得siRNA，将siRNA用6-羧基荧光素(FAM)标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞；转染48 h后，以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化。结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGF mRNA水平均有不同程度下调，抑制效果由强至弱为，siRNA742＞siRNA828＞siRNA578＞siRNA948。蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调，其中siRNA742的抑制效应最强。可见RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达。