中国研究者研究重组杆状病毒载体介导大鼠螺旋神经节细胞基因转染

《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》2007年第42卷第12期 中国研究者探讨了重组杆状病毒（baculovirus，Bac）作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点。研究者应用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统制备携带绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）的杆状病毒载体（Bac—GFP），以不同感染复数（multiplicities of infection，MOI）的病毒和不同浓度的丁酸钠转染大鼠螺旋神经节细胞，通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞转染率和绿色荧光蛋白表达强度，并观察杆状病毒和丁酸钠对螺旋神经节细胞的毒性。结果发现杆状病毒可以高效转染螺旋神经节细胞，转染效率达77．69％。Bac—GFP转染率和表达强度随着MOI和丁酸钠浓度的提高而提高。GFP在转染后6h开始表达，第2天达到最高。重组杆状病毒MOI小于800以及丁酸钠终浓度小于或等于10mmol／L时，对螺旋神经节细胞没有明显细胞毒性。由此，研究者得出结论，重组杆状病毒可以在体外高效安全转染内耳螺旋神经节细胞。