负载慢性髓系白血病28的树突状细胞介导的抗淋巴细胞白血病效应

2008年06月26日 《中华肿瘤杂志》-2008年30卷1期 -26-29页 医学空间（MEDcyber.com）6月26日消息， 该项研究目的是构建慢性髓系白血病（CML）28的树突状细胞（DC）核酸疫苗，观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应。方法采用从pcDNA3．1HisA—CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长，酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）；从健康人外周血中分离外周血单个核细胞（PBMC），在白介素4（IL4）和粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）条件下诱导分化为DC；用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC，Westernblot检测His—CML28融合蛋白的表达，荧光显微镜检测EGFP的表达；用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞，淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞，以乳酸脱氢酶（LDH）释放实验测定其抗肿瘤效应。结果重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC后，能正确表达His—CML28融合蛋白及EGFP。经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC，杀伤率为68.3％，明显高于空白对照组（25．8％）和阴性对照组（20．7％），差异有统计学意义（P〈0．01）；而对健康人PBMC的杀伤活性较弱，杀伤率为20．5％。由此得出结论CML28能诱导特异性的细胞免疫，负载CML28的DC疫苗在体外对淋巴细胞白血病具有显著的抗肿瘤效应。