兔眼视网膜下注射N-甲基右旋天冬氨酸诱导视网膜变性的组织病理学研究

《中华眼科杂志》2007年第43卷第10期 中国研究者研究了视网膜下注射兴奋性氨基酸N-甲基右旋天冬氨酸（NMDA）对神经细胞变性的作用。研究者取12只1个月龄有色家兔，视网膜下注射10μl（30mmol／L）NMDA（溶剂为DMEM-F12），形成视网膜隆起，在注射12、24、48h及1周后分别处死家兔，取其视网膜组织进行免疫组织化学检测和电镜观察。应用抗Calretinin、Calbindin、PKCα抗体，分别标记视网膜无长突细胞、水平细胞及视杆双极细胞；采用原位缺口末端标记技术（TUNEL）技术标记凋亡细胞。结果发现损伤早期（12～24h），实验组视网膜可见散在细胞核固缩浓染的光感受器细胞，并有无长突细胞和神经节细胞的早期严重变性；中期（48h）视网膜各层神经元均出现病理性改变；损伤晚期（1周）视网膜各层细胞数目明显减少。损伤早期，TUNEL技术标记的阳性细胞位于视网膜各层。免疫组织化学和形态学计量资料显示视网膜下注射NMDA后，水平细胞、无长突细胞及神经节细胞数目明显减少，视杆双极细胞数目基本无变化。超微结构观察显示有凋亡、坏死、水肿变性及混合型细胞死亡等多种变性形式。由此，研究者得出结论，视网膜下聚集NMDA时，光感受器细胞、水平细胞、视杆双极细胞、无长突细胞及神经节细胞均表现为视网膜兴奋性毒性反应，与以往体内及体外研究结果显示的仅有内核层神经元死亡情况不同。