本报陕西讯 日前，在国家自然科学基金和全军医药卫生科研基金资助下，第四军医大学西京医院血液科黄亚渝等人完成的一项研究，成功建立了稳定表达黑色素瘤抗原-n（MAGE-n）的细胞系。
自二十世纪九十年代初，第一个人类
肿瘤相关抗原-黑色素瘤抗原-1（MAGE-1）发现以来，肿瘤免疫治疗被世界各国学者广泛地关注和研究。肿瘤免疫治疗的基础是存在肿瘤细胞特异性表达的肿瘤抗原，而MAGE抗原的这一特性使其成为肿瘤特异性免疫治疗的重要靶分子之一。MAGE是一个基因家族，MAGE-n基因为MAGE基因家族新成员。研究表明，MAGE-n可被肿瘤细胞作为抗原递呈到细胞表面，使其用于
肝癌的免疫治疗。
为构建增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与人MAGE-n真核共表达载体，并在实验小鼠黑色素瘤B16细胞中进行表达，研究人员采用酶切法从pLXSN-MAGE-n中得到MAGE-n基因片段，克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP中，构建真核共表达质粒pIRES2-EGFP-MAGE-n。用脂质体法转染小鼠黑色素瘤B16细胞，用G418筛选阳性克隆，并用荧光显微镜检测阳性克隆中EGFP的表达，利用RT-PCR、Western blot和免疫组化分别检测阳性克隆中MAGE-n mRNA和蛋白的表达水平。
结果显示，从pLXSN-MAGE-n重组质粒中酶切获得一条约950bp的片段，成功构建了真核共表达载体pIRES2-EGFP-MAGE-n，转染B16细胞后筛选得到阳性克隆，可见到EGFP的表达，产生明亮的绿色荧光，RT-PCR检测到MAGE-n mRNA的表达，Western blot和免疫组化检测到MAGE-n蛋白的表达。
研究结果表明，研究人员成功构建了共表达质粒pIRES2-EGFP-MAGE-n，获得了稳定共表达EGFP和MAGE-n的小鼠黑色素瘤B16细胞系，为进一步研究MAGE-n在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础。
（张中桥）
作者：