野生型Kras2基因对于结肠腺癌细胞系的生长抑制效应

2007年04月11日 World J Gastroenterol. 2007 Feb 14;13(6):934-8. 11 为观测野生型Kras2基因对于结肠腺癌细胞系Caco-2的生长抑制效应，研究人员构建重组质粒pCI-neo-Kras2与野生型Kras2基因开放阅读框架，采用Lipofectamine 2000将Caco-2细胞转染pCI-neo或pCI-neo-Kras2，根据Northern blot分析野生型Kras2的表达情况，并根据Western blot分析检测野生型Kras2蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析野生型Kras2对于细胞增生的影响，同时采用流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和自发性凋亡率。结果可见，成功建立pCI-neo-Kras质粒。pCI-neo-Kras2转染细胞的增殖率显著低于转染空pCI-neo载体的对照细胞(P < 0.05)。细胞周期分析显示将pCI-neo-Kras2转染的细胞停滞在G(0)/G1期，会减低DNA合成，并降低S期细胞成分。与对照细胞相比，转染pCI-neo-Kras2细胞的增殖指数降低(49.78% vs 64.21%)，而稳定表达Kras2的Caco-2 细胞凋亡率增高(0.30% vs 0.02%)。可见，野生型Kras2基因可以有效抑制结肠腺癌细胞株Caco-2的生长。