蜂胶乙醇提取物化学成分的GC/MS研究

蜂胶乙醇提取物化学成分的GC/MS研究
                            
崔庆新*1，刘国富2
(1.聊城师范学院化学化工学院 2.聊城师范学院生物系 山东聊城 252059)   
  摘  要: 利用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对蜂胶乙醇提取物化学成分进行了分析，采用TIC峰面积归一化定量，鉴定出47种成分，共占其色谱流出组分总量的82.8%，其中萜类、黄酮类化合物约占31%。
  关键词: 蜂胶；乙醇提取物；快速分析；气相色谱—质谱法
 
蜂胶(propolis)，是蜜蜂给人类的恩赐，是蜜蜂群体的一种副产物，是一种有较强粘性的固体状，棕黑色，有芳香气味的物质。蜜蜂从树木的新生枝芽处采集保护植物嫩叶的天然树脂，并以本身喉腺分泌物混合而成蜂胶。它们把这种物质贮存于蜂箱里的缝隙处，或涂抹到蜂箱的出入口处，是为保证其繁衍生存的需要主要用来抵御病害、清洁巢房和预防寒气侵袭，可以防止细菌及病毒入侵，并抑制巢内病毒滋生。尽管蜜蜂群居的蜂箱或树洞空间狭小、阴暗，蜂巢内温度、湿度等条件最适合微生物的生长，且数万只蜜蜂挤在一起，营养丰富的蜂王浆、花粉、蜂蜜却不变质，一些个体较大的敌害虫被蜜蜂螫死后，尸体无法拖出且不腐败污染蜂巢，这一且都源于蜂蛟。据报导在蜂巢内检不出任何病毒。
据报导由精细化工分析得出，蜂胶中含有黄酮类，酸，醇，酚，酯类及烯，萜，甾类化合物和多种氨基酸，脂肪酸，酶类，维生素，多种微量元素，它是一种有重要价值的蜂产品，对人体有许多保健医疗功能。首先，它是国内外专家公认的最伟大的"天然抗生素"，有强力的抗炎性，抗菌性，抗氧化性，抗老化，抗病毒和清热解毒作用。此外，它还能增强SOD活性，阻止脂质过氧化；强化免疫，提高自愈力；净化血液，软化血管，改善微循环。经常服用蜂胶，能有效增强机体的免疫功能，预防疾病的发生和加快病体的康复，改善循环和消除各种炎症及保护肝脏，防止肝硬化。还可以消除体内毒素，使肌体亮丽富有弹性，杀灭和抑制癌细胞。国内外医学专家研究证明，蜂胶中所含有的黄酮类、多糖、酶类、萜烯类、有机酸等天然物质对癌症患者有独特的作用。Derevici和Hladov等人的研究结果显示，蜂胶乙醇提取物的抗癌活性较“争光酶素”的抗癌活性更强[1]。
本文利用气相色谱—质谱联用技术对蜂胶乙醇提取物进行定性定量研究，得到较理想的结果，为进一步分析蜂胶某些成分的药用价值提供了依据。此类工作未见报导。
1 实验部分
1.1 仪器与材料
HP6890GC／5973MSD气－质联用分析仪（安捷伦科技有限公司），附G1701BA-B.01.00  ChemStation软件，G1033A,D.01.00 NIST98 标准质谱检索库。
蜂胶，由聊城市冠县元造户乡后路堂蜂场提供；食用（乙醇含量96.8%）。
1.2 样品处理
将蜂胶用研钵粉碎后，取50g粉碎样置于250ml圆底烧瓶中，加入150ml食用酒精,安装搅拌器搅拌提取30min,过滤。再将滤渣如上述方法重复提取两次。将三次滤液合并，用旋转蒸发器浓缩为浸膏，取该浸膏少许用食用酒精溶解成澄清的乙醇饱和溶液，置于冰箱备用。
1.3 样品分析
1.3.1色谱条件
色谱柱：HP-5MS，5%苯甲基聚硅氧烷弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm），进样口温度：260℃，柱室温度：初始温度80℃（3min），以8℃/min升温速率升至260℃（保持30min），载气：高纯氦气，柱前压71kPa，流速1ml/min，分流比15:1。
1.3.2 质谱条件
接口温度：280℃，电离方式：EI，电子能量：70eＶ，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，调谐方式：标准调谐，质量扫描方式：SCAN,溶剂延迟：3min,扫描范围：50～550amu，电子倍增器电压：1635V。
2 结果与讨论
在上述仪器条件下，用10ul微量进样器取1.2中蜂胶提取物的乙醇饱和溶液1ul注入仪器进样口，得总离子流图见图1。将图1中分离出的各组分提取质谱图，经用NIST98标准谱库检索并与文献标准谱图[2]核对，确认了          种成分，并用气相色谱面积归一化定量法计算出各种成分的相对质量分数，其定性定量结果见图1、表1。其中愈创木醇、木兰烯、桉叶油醇等萜类化合物约占1.4%，2,6-二羟基-4-甲氧基查耳酮、白杨素、刺槐素、5，7-二羟黄酮等黄桐类化合物约占29.3%，为蜂蛟乙醇提取物的进一步开发研究提供了可靠的参考数据。 

 
图1 蜂蛟乙醇提取物总离子流图
fig.1 TIC of essential oil from bees’pastern  

表1  蜂胶乙醇提取物主要化学成分
Table 1  Major components of  essential oil from bees’pastern


参考文献
１．《中国养蜂》
２．分析化学手册 （质谱部分）丛溥珠 苏克曼主编 2000年5月第二版
3．Cf：石憬林译，1993，（2）；4143
 4. 尚天民，徐景耀，中国养蜂，，1983，（4）：20-23
4.刘富海，许正鼎，神奇的蜂胶疗法，中国农业出版社，1998，14。


A Study on the Chemical Components of the extract from Propolis’
powder by Gas Chromatography/Mass Spectrometry
CUI Qing-xin*1, LIU Guo-fu2
(1.Chemistry & Chemical Engineering School, Liaocheng Teacher’s University, 2. Biological Department of Liaocheng Teacher’s University, Shandong, Liaocheng 252059)

Abstract: The extract from propolis ’powder was analyzed by capillary GC/MSD method 45 peaks were isolated, the relative content of constitutes were determined. Thymol, isothymol, borneol, campene, eucalyptol, caryophyllene, beta-terpineol, were major constitutes.
Key words: Thymus, essential oil, GC/MSD