肿节风片的质量标准研究

目的：制订肿节风片 质量标准。方法：紫外分光光度法测定了总黄酮的含量，对肿节风药材 进行了薄层色谱鉴别。结果：加标回收率平均98.1%(RSD=2.3%,n=6),r=0.99996，重复性RSD=1.23%(n=6),精密度RSD=1.14%([ WTBX]n=6)结论：方法稳定、可靠，可作为该制剂的质量控制方法 之一。
关键词　总黄酮；含量测定；肿节风；薄层色谱鉴别
Study of quality standard of Zhongjiefeng pian
Lu Wuqing(Lu WQ),Wu Zhaoyang(Wu ZY),Wu Liping(Wu LP)
(Jia ngxi Institution of traditional Chinese medical and Pharmaceutical Sciences,Nanc hang 330077)
ABSTRACT　OBJECTIVE：To establish t he quality standard of Zhongjiefeng pian.METHOD:The content of total flavone in Zhongjiefeng pian was determined by UV.The Zhongjiefeng was identifi ed by TLC.RESULTS:The average recovery is 98.1%(RSD= 2.3%,n=6),with good linear relationship(r=0.99996 and reproduc ity(RSD=1.23%,n=6) and precision(RSD=1.14%,[ WTBX]n=6).CONCLUSION:The method is accurate,reliable,and can b e used as method for quality control of the production.
KEY WORDS　Zhongjiefeng pian,determining content,total flavone,TLC
　　肿节风片由单味药肿节风经提取浸膏后压制而成，收载于部颁标准中，功 能为消肿散结，清热解毒。临床用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，大剂量用于肿瘤。主要成 分有香豆酮、内酯、黄酮苷、挥发油、鞣酸、异白醋定、落新妇苷、葡萄糖、蔗糖等。本品 原标准仅有一个专属性并不强的有机酸试管反应和黄酮类荧光观察，为了有效地控制质量， 我们对其质量标准提高进行了实验研究。
1　仪器与药品
　　日立U-2000紫外可见双光束分光光度 计，岛津UV-120紫外可见分光光度计，CQ-250超声波清洗仪(上海船舶电子设备研究所)， 芦丁对照品(含量测定用，中国药品生物制品检定所)，肿节风对照药材为金粟兰科植物接骨 金粟兰Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai的枝叶(江西中医学院中药鉴定教研室杨雄志讲师 鉴定)，其它试剂均为分析纯。
　　肿节风片(江西贵溪制药厂，批号:971117,951121,951209, 960406,960407,960407,960410,960514,960520,960526和960712)。
2　方法与结果
2.1　薄层鉴别
　　取本品3片，研细，加 甲醇10ml,超声处理20min,滤过，滤液作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2.5g,加水 60ml,微沸20min,滤过，滤液浓缩至约10ml,加乙醇3倍量使沉淀，放置1h,滤过，滤液挥去乙 醇，浓缩至稠膏状，加0.5g硅藻土拌匀，水浴上蒸干，用甲醇5ml超声处理10min,滤过，滤 液作为对照品药材溶液，照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两 种溶液各3μl,分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石 油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(10∶4∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结 果见图1。(略)
2.2　含量测定
2.2.1　提取方法的选择　《中国药典》(1990年版第二 增补本)血康口服液所附的肿节风浸膏含量测定方法采用70%乙醇为溶剂，置索氏提取器中回 流提取，比色法测定黄酮。但从理论上分析，用70%乙醇索氏回流提取，经索氏提取器冷凝 管流至提取筒内的乙醇含醇量可达90%以上，失去了用70%乙醇的意义。基于此，我们对同一 样品采用水溶解，醇沉淀(下称水醇法)方法与《中国药典》提取方法进行比较，方法如下： 药典法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置索氏提取器中，用70%乙醇回流提取6h,提取液定 容至100ml,吸取1ml,照上述含量测定方法测定，结果见表1。测得总黄酮含量为6.3%。水醇 法：取肿节风片，剥去糖衣，研细，置100ml量瓶中，加水90ml,超声处理20min使溶解，放 置室温，加水至刻度，摇匀，吸取15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，使含醇量为70%，摇 匀，放置使沉淀，吸取上清液2ml,照含量测定方法项下试验，测得总黄酮含量为7.3%。
表1　不同提取方法总黄酮测定结果/%

    上述两种提取方法显示，水醇法提取率高于药典法，而且免去了药典法的 繁杂操作，故本品采用水醇法提取。
2.2.2　线性关系的考察　精密称 取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品110mg,置100ml量中，加60%乙醇70ml使溶解， 放置室温，加60%乙醇至刻度，摇匀，精密吸取上述溶液10ml,置50ml量量中，加水至刻度， 摇匀，精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0和6.0ml,分别置25ml量瓶中，各加水至6ml ,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀，放置6min,加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置15min,照分光光 度法(中国药典1995年版一部附录ⅤA)，在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓 度为横坐标进行回归处理。回归方程为:A=0.01138c-0.0037,r=0.99996，结果 芦丁浓度在8.8～52.8μg/ml范围内呈线性关系。
2.2.3　光谱扫描　精 密吸取上述对照品溶液4.0ml和对照品溶液2ml,照标准曲线制备方法显色。在U-2000紫 外可见分光光度计上从370～700nm扫描。样品的扫描图谱与芦丁扫描图谱顺500nm处均有最 大吸收，样品辅料制成的空白对照对测定无影响，在500nm处无吸收，结果见图2。(略)
2.2.4　稳定性试验　取供试品溶液2ml,照标准曲线制备方法项试验 ，在500nm波长处测定吸收度，以后每隔半小时测定一次，数据经处理RSD=0.3 5%，样品在4h内极稳定。
2.2.5　精密度试验　精密吸取供试品溶液2 .0ml共6份，照标准曲线制备项下“自各加水至6ml,至在500nm波长处测定吸收度”，测得 6份样品吸收度，结果样品吸收度相对标准偏差为1.14%。
2.2.6　重复性试验　取样品6份，照含量测定项下方法试验，对含量 测定结果进行数据处理RSD=1.23%。
2.2.7　样品加样回收 率　分别精密称取芦丁对照品6份，各置100ml量瓶中，再分别精密称取已知含量的样品 各置上述量瓶中，加水溶解，超声处理20min，放置室温，定容，摇匀，余照含量测定项下 试验，计算回收率，结果见表2。
表2　回收率测定结果

2.2.8　样品测定　取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，精密 称取1g,置100ml量瓶中，加水90ml超声处理20min,放置室温，加水至刻度，摇匀，滤过，精 密吸取续滤液15ml,置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密吸取上清液2ml,置25m l量瓶中，照标准曲线项下方法，自“各加水至6ml”起，以2ml样品液，加水至25ml作为空 白，至“在500nm波长处测定吸收度”，按回归方程计算含量，结果见表3。
表3　样品中总黄酮含量/n=3

3　小　结

　　采用本方法对肿节风片进行薄层色谱鉴别， 重现性好。我们对样品在不同温度、湿度条件下考察，经近10余批次样品鉴别，均能检出与 对照药材相同的斑点。含量测定具有简便、重现性好、精密度高的优点，10批次样品含量测 定结果显示，各批次含量较为稳定，为肿节风片的质量控制提供了有效的方法。