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HPLC日常维护办法之四:基线的各种问题

来源:分析化学网
摘要:L、基线漂移原因和解决方法1、柱温波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)解决方法:控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。...

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L、基线漂移
原因和解决方法
1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)
解决方法:控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图
2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
解决方法:使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。
3、流通池被污染或有气体
解决方法:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)
4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)
解决方法:取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化
解决方法:更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时
解决方法:用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成
解决方法:检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂
8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
解决方法:使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
9、使用循环溶剂,但检测器未调整。
解决方法:重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。
解决方法:将波长调整至最大吸收波长处
M、基线噪音(规则的)
原因 解决方法
1、在流动相、检测器或泵中有空气
解决方法:流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。
2、漏液
解决方法:检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。
3、流动相混合不完全
解决方法:用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂
4、温度影响(柱温过高,检测器未加热)
解决方法:减少差异或加上热交换器
5、在同一条线上有其他电子设备
解决方法:断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。
6、泵振动
解决方法:在系统中加入脉冲阻尼器
N、基线噪音(不规则的)
原因 解决方法
1、漏液
解决方法:检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。
2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成
解决方法:检查流动相的组成。
3、流动相各溶剂不相溶
解决方法:选择互溶的流动相
4、检测器/记录仪电子元件的问题
解决方法:断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。
5、系统内有气泡
解决方法:用强极性溶液清洗系统
6、检测器内有气泡
解决方法:清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器
7、流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)
解决方法:用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
8、检测器灯能量不足
解决方法:更换灯
9、色谱柱填料流失或阻塞
解决方法:更换色谱柱
10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常
解决方法:维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置
O、宽峰
 原因和解决方法
1、流动相组成变化
解决方法:重新制备新的流动相
2、流动相流速太低
解决方法:调节流速
3、漏液(特别是在柱子和检测器之间)
解决方法:检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。
4、检测器设定不正确
解决方法:调整设定
5、柱外效应影响
         a、柱子过载
         b、检测器对反应时间或池体积响应过大
         c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大
         d、记录仪响应时间太长
解决方法:a、 小体积进样(例如:10ul而不是100ul)以1:10或1:100的比例稀释样品
          b、减少响应时间或使用更小的流通池
          c、 使用内径为0.007-0.01的短管路
          d、减少响应时间
6、缓冲液浓度太低
解决方法:增加浓度
7、保护柱污染或失效
解决方法:更换保护柱
8、色谱柱污染或失效,塔板数较低
解决方法:更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。
9、柱入口塌陷
解决方法:打开柱入口,填补塌陷或更换柱子
10、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰
解决方法:选择其它类型的色谱柱以改善分离效果
11、柱温过低
解决方法:提高柱温。除非特殊情况,温度不宜超过75℃
12、检测器时间常数太大
解决方法:使用较小的时间常数
P、分离度降低
原因 解决方法
1、流动相污染或变质(引起保留时间变化)
解决方法:重新配置流动相
2、保护柱或分析柱阻塞图
解决方法:去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞,可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱柱。
Q、所有的峰面积都太小
原因 解决方法
1、检测器衰减设定过高
解决方法:减少衰减的设定
2、检测器时间常数设定太大
解决方法:设定较小的时间常数
3、进样量太少
解决方法:增大进样量
4、记录仪连接不当
解决方法:使用正确的连接
R、所有的峰面积都太大
原因 解决方法
1、检测器衰减设定过低
解决方法:采取较大的衰减
2、进样过多
解决方法:减少进样量
3、记录仪连接不正确
解决方法:正确连接记录仪
 HPLC日常维护办法之四:进样阀的问题
以下问题在使用进样阀过程中有可能发生。
 A、手动进样阀,转动不灵
原因 解决方法
1、转子密封损坏
解决方法:更换或调整转子密封
2、转子太紧
解决方法:调整转子的松紧度
B、手动进样阀,载样困难
原因 解决方法
1、进样阀安装不当
解决方法:重新安装
2、定量环阻塞
解决方法:清洗或更换定量环
3、进样器污染
解决方法:清洗或更换进样器
4、管路阻塞
解决方法:清洗或更换管路
C、自动进样阀,不能转动
原因 解决方法
1、无压力(或电源)
解决方法:提供恰当的压力(电源)
2、转子太紧
解决方法:调整转子的松紧度
3、进样阀安装不当
解决方法:重新安装
D、自动进样阀,其它问题
原因 解决方法
1、阻塞
解决方法:清洗或更换阻塞部件
2、机械故障
解决方法:见随机维修手册
3、控制器故障
解决方法:维修或更换控制器
作者: 2007-5-18
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