槲寄生化学成分的研究色谱论文 | 39康复网

摘要本文采用降解及与已知构型的化合物进行对比的方法，确定了新黄酮甙槲寄生新甙IV中酸性部分手性碳的绝对构型
关键词槲寄生，槲寄生新甙IV，甲羟戊酸内脂，高效波相色谱

　　前文曾报道从中药槲寄生(Viscum coloratum(Kom)Nakai)中分离得到-个新的黄酮甙，经波谱分析和化学研究，确定其结构为鼠李秦素-3-O-β-D-[6’-(3-羟基-3-甲基戊二酸半脂)]葡萄糖甙，命名为槲寄生新甙Ⅳ(viscumneosidetⅣ)。其酸性部分含-个手性碳原子，现报道该手性碳的绝对构型。

　　文献报道消旋的甲羟戊酸内酯(menalonolactone)与(S)-苯乙胺作用，形成非对映异构体，用高效液相色谱可分离得到R和S构型的甲轻戊酸内脂。在高效浓相色谱中，保留时间短的峰(10．7min)

　　为R构型的甲羟戊酸内酯，而相应保留时间长的(11.7min)则为S构型。我们以醋酸乙脂和烯丙基溴为原料，经格氏加成得l，l-双烯丙基乙醇(1)。1经奥氧化反应生成3-羟基-3-甲基-1，5-戊二酸(2)，脱水后转变为相应的酸酐(3)。3用硼氢化钠还原得到消旋的甲羟戊酸内酯(4)。4与(S)-苯乙胺作用后再经乙酰化、由高效液相色谱分离得到保留时间为10.07和11.20 min的两个峰，分别为(R)-甲羟戊酸内脂和(5)-甲羟戊酸内脂(见图1)。

槲寄生新甙IV，用硼烷选择性还原得醇，然后碱性水解即得甲羟戊酸内脂，在还原过程中，该C-3的绝对构型不发生变化。所得甲羟戊酸内酯按上述操作与(S)-苯乙胺作用，产物由高效液相色谱分离得到保留时间为10.08的峰(见图2)，与对照品保留时间为10.07的峰相符合，由此确定槲寄生新甙IV酸性部分的手性碳为R构型。

实  验  部  分
　　熔点用Reickert显微熔点仪测定，温度计未校正。红外光谱用Perkin-E1mer 683型红外光谱仪，核磁共据谱用Perkin-Elmer R₂₂型核磁共振仪，质谱用Varian MAT ₂₁₂型质谱仪。高效液相色谱用waters ALC244型高效液相包谱仪，M441紫外检测器，M790数据处理机。
-、  (RS)-甲羟戊酸内脂的合成
(-)1，1-双烯丙基乙醇(1)的制备
　　Mg屑8．3g置于无水Et₂0-四氢呋喃(1:1)的混合溶剂30m1中，在搅拌下滴加由EtOAc 8.6m1(0．09m01)，溴丙烯3l.69(0.26m01)和14l ml无水Et₂O-四氢唉哺(1：2)配成的溶液。反应很快开始，控制滴加速度以保持反应该缓慢回流．全部滴入约需2h，此时反应中有部分固体析出，冷却后加入冰水90m1，用2.5mo1/L H₂SO₄酸化，然后用Et₂0  250m1分5次萃取，Et20提取液以5％KHCO₃和H₂O洗后，无水MgSO₄干燥，蒸去溶剂，得油状物，收集bp₁₃56.5℃(文献bp₁₂50-51℃)，得1   6.48g
(二)3-羟基-3-甲基-1，5-戊二酸(2)的制备
　　1  6.0g 镕于CH₂C1₂150ml和glacia1  HOAc  10ml中，冷却至-70℃。用O₃处理至溶液是天兰色(约3h)，热至室温后，加入冰HOAc 100ml，  减压蒸去CH₂Cl₂和少量冰HOAc，加入glacial HOAc 80ml，立即加入30％H₂O₂45ml，加热回流8h，浴温108～110℃，减压除去溶剂后得无色固体，MeOH重结晶得针状结晶  24．9g， mpl08℃(文献110℃)，IR(KB r)cm^-1：3250，2980，17l0，1690、1425，1375，1280，  1210，11 55，994，900。 HHMR(DMSo-d₆)δ：  1.29(3H，s，CH₃)，2．52(4H，s，2×CH₂)。  FAB-MS(m/z)：163(M⁺+H)，  145，127，  l03，85。

(三)3-羟基-3-甲基戊二酸酐(3)的制备
　　21g与(Ac)₂O  20m1在室温放置24h，减压除去HOAc及过量酸酐，残留物用CH_2C12重结针状结晶得晶30.8g， mpl01～103℃(文献102～103℃)。　IR(KBr)cm^－１；3500：1305，1752，1385，1182，1065，980。MS(m/z)：144，100，85，72，58(基峰)，43。
(四)(RS)-甲羟戊酰内脂(4)的制备
　　3   1．4g(0.01m01)于(CH₃) ₂CHOH  50m1中加入NaBH ₄1g( 0．025mo1)，室温搅拌54h，压除去(CH₃) ₂CHOH后，残留物以10% HCl处理，然后用Et₂0萃取。Et₂0提取被以10%减 Na₂CO₃ 和H₂0洗，无水Na₂SO₄干燥，得油状物4  41mg，  IR(KBr)cm^-1：3450，1730，1200，1150，1110。 HNMR  (CDCl₃)δ：  1.38  (3H，s，CH₃)，  1.95(2H，m，4-H)，2.60(2H，m，2-H)，4.43(2H，m，5-H)
二．  非对称异构体(3R)-3-O-酰基-1-[(S)-笨乙基]甲羟戊酰胺和(3S)-5-O-酰基-1-[(S)-苯乙基]甲羟戊酰胺的制备和分离
　　(RS)-甲羟戊酸内酯427mg，加入四氢呋喃3ml和(S)-(-)-苯乙胺0.3ml，室温放置过夜。减压除去四氢呋喃后，残留物中加入l0 ml EtOAc，  以0．1m01／L HCl 3m1洗和H₂0沉，减压除去EtOAc得油状物，加C₃H₅N₄滴和Ac₂O₂滴室温放置过夜，减压除去溶剂得非对映异构体(5a和5b)混合物。用HPLC分离(柱：300×7.8mm，μ-Porasil，流速1．5m1/min，压力550 psi；洗脱液：C₆H₁₄-CH₂C1₂-(CH₃)₂CHOH-MeOH)100：100：0.5：0.5)；检测UV 254nm)得两个峰，保留时间分别为10.07和11.20(min)。
三．槲寄生新甙Ⅳ的还原和分离
　　槲寄生新甙Ⅳ 54.5mg于50 m1圆底并中，加入四氢呋喃24ml溶解，置于冰盐浴中冷却．在充N₂条件下慢慢加入5.3ml/L硼烷二甲硫醚溶液 10 m1．待反应混合物无明显H₂放出再搅拌1h，静置待温度升至室温放置过夜，反应物于冰盐浴中再冷却至0℃，加入H₂0  0.6m1后减压除去溶剂得黄色残留物，加入0.2mol/L NaOH 9ml，放置后，用  0.3mo1/L  HCl酸化至pH 3，Et₂O萃取，除去溶剂后得0.8mg 油状物．与已知甲羟戊酸内脂共薄层层析，Rf值和显色行为一致。
　　所得油状物按二法相同操作，经HPLC分离得到一个峰，保留时间为10.08min。前Et₂O提取后的酸性水液用EtOAc多次萃取，除去EtOAc得黄色析出物．MeOH重结晶得黄色针状结晶，mpl77、179℃，与已知鼠李秦素-3-O-β-D葡萄糖甙共薄层层析，Rf值和显色行为一致。
　　致谢  光谱数据由本院分析室测定，本院合成室徐卓君先生惠赠(S)-(-)-苯乙胺，上海五洲制药厂提供硼烷试剂，上海医药职大毕业实习生吕雪情参加部分工作。谢寄生药材由上海医科大学施大文、戴金瑞两位先生鉴定．

作者：孔德云李惠庭罗思齐雷兴铡 2007-5-18