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摘要：采用超临界CO2流体技术对虎杖中自藜芦醇进行萃取，获得了初步萃取条件：萃取釜压力25 MPa，温度5O℃；解析釜压力5．7 MPa，温度46℃ ，用无水乙醇及CY(自制)作为改性剂，同时用HPLC对萃取物进行白藜芦醇含量测定，可知CY作为改性剂效果最佳．
关键词：虎杖；白藜芦醇；超临界CO2萃取HPLC
白藜芦醇(resveratro1)，其化学名称为反式3，5，4’-三羟基1，2-二苯乙烯(trans-3，5，4’-trihy droxystilbene)，具有化学防癌活性L1]、抗高血压和冠状动脉血管扩展活性，降低大鼠血清中总胆固醇，及降血脂等作用[2]．红葡萄酒中发现的白藜芦醇被认为是红酒对人体产生有益作用的主要成分[3J，可有效地抑制血管细胞中组织因子TF和细胞质的异常表达 ，防止心血管疾病发生．
目前至少已在21个科，31个属的多种植物中发现了白藜芦醇，其中虎杖Polygonum cuspidatum白藜芦醇的含量最高．因此对虎杖白藜芦醇的提取、纯化工艺展开了各种研究，但未见利用超临界CO2萃取技术[5]的报道．现初步探索了萃取虎杖白藜芦醇的条件，并利用HPLC法对萃取物各部分进行检测，获得了较为满意的结果．
1 材料与方法
1．1 材料
虎杖采于吉首大学张家界校区，经吉首大学植物学教研室鉴定，取其根茎，阴干，粉碎制成样品．
白藜芦醇标准品(Sigma公司)；乙醇，CY(自制)为分析纯；甲醇，乙腈为色谱纯；CO2纯度97% ．LC-9A高效液相色谱仪(日本岛津)；SPD-6AV紫外检测器(日本岛津)；旋转蒸发仪(日本大和)；红外水分测定仪(日本大和)；中科院广州化学所250mL SF-CO2超临界CO。萃取仪(广州化学所自制)；10万分之一天平(日本岛津)．
1．2 虎杖白藜芦醇的提取条件及方法
取适量虎杖阴干粉末，装入萃取釜中，调节萃取釜、解析釜压力，调整温度为设定值，开始循环，同时加入或不加入夹带剂.
1．3 虎杖白藜芦醇萃取物HPLC分析条件(略)
2 结果与分析
不同超临界CO2萃取条件下，虎杖萃取物中自藜芦醇含量结果见表2．从表2可知，萃取釜压力P1=25．0 MPa，温度T1=50℃ ；解析釜压力P25．7 MPa，温度T2=46℃ 时，可以获得较好的提取效果．但不同的材料，使用不同的改性剂，不同的萃取时间，其萃取效果差异很大．系统中不加入改性剂(试验号1～4)，虎杖白藜芦醇在2 h内利用SF-CO2萃取无法萃取到白藜芦醇．即仅用传统的超临界CO2作溶剂是无法萃取到白藜芦醇的．而加入少量CY 和无水乙醇后，改变了溶剂极性，白藜芦醇的萃取量大大提高，CY，无水乙醇用作改性剂萃取，萃取物中白藜芦醇最高含量分别达到21．13% (9号)，18．33% (19号)．2 h萃取总量CY组(9～12号)为34．98% ，大于无水乙醇改性剂组(17～2O号)30．57%．
萃取过程中白藜芦醇含量较高的样品用CY 作改性剂萃取时，时间集中在前1 h，占85%，无水乙醇作为改性剂萃取时，时间略滞后，为1．5 h，且萃取率与萃取时间有很大的关系．
不同的虎杖样品原料的白藜芦醇含量与萃取关系密切．白藜芦醇含量低的原料样品I，与含量高的样品I白藜芦醇的含量仅相差3倍，但同样条件下萃取效率样品Ⅱ却远远高于样品I．
总之，利用超临界CO2萃取虎杖白藜芦醇是可行的，但需进一步优化萃取条件．同时本试验结果表明，一次萃取得率不高，可进一步增加萃取次数．另外，对不同的原料应选用不同的条件，以得到高的提取率．
参考文献：
[1] Meishiang J，Lining C，Udeani G O，et a1．Cancer chemopreventive activity of resveratrol，a natural product derived from grapes[J]．Science，1997，275(1)：218—220．
[2] Burkhardt S，Reiter R J，Tan D X，et a1．DNA oxidatively damaged by chromium (I )and H2O2 is protectedy theantioxidants melatonin，N (1)-acetyl-N(2)-fomyl一5-methoxykynuramine，resveratrol and uric acid D]．IntJ Biochem CeU Biol，2001，33(8)：775—783．
[3] Belguendoue L，Fremont L，Linard A．Resveratrol inhibits metal ion-dependent pe roxidation of porcine lowdensity poproteins[J]．Biochem Pharmacol，1997，53(9)：1347—1355．
[4] Stivala L A tSavio M，Carafoli F，et al。Specific structural determinants are respo nsible for the antioxidant activity and the cell cycle effects of resveratrolD．J Biol Chem，2001，276(25)：22586—22594．
[5] 刘永，周家华，孙福强，等．超临界CO：提取生理活性物质的研究进展[J]．化工生产与技术，2002，9(4)：18—23．
来源：东方医药网