河南省三门峡市湖滨区食品卫生监督
检验所 (河南 472000)
摘要 香兰素是一种食品添加剂。本法以甲醇 : (1%)冰乙酸=30 : 70作为流动相，在Hypersil ODS2 C18 反相柱上得到了很好的分离，糖精钠、苯甲酸、山梨酸等常见食品添加剂在此条件下不干扰。香兰素最低检出限为0.1mg 。样品经过简单处理，经过0.45μm滤膜过滤，直接进样。测得营养麦片、饮料等样品香兰素回收率为94.99%，变异系数0.12%，线性回归方程Y=(8.097e+06)X+0.000，R=0.9999。方法快速、准确、灵敏度高。
关键词: 高效液相色谱分析法, 香兰素(3-甲氧基4-羟基苯甲醛C8H8O3), 食品, 食品添加剂
1. 前言
香兰素作为食品添加剂广泛用于麦片、糖果、豆奶、饮料等食品中，香兰素又称(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，香草醛)(1) ，是一种白至微黄色针状结晶粉，有香荚兰豆特有的香味，易溶于乙醇、乙醚、冰醋酸和热挥发油，沸点284~285℃，其测定方法主要有薄层层析法(2)、气相色谱法(3)等，测定时常须经酸、碱处理，有机溶剂萃取，手续繁琐。高效液相色谱法测定食品中的香兰素未见报道。本文对食品中香兰素的测定方法进行了研究，样品经过简单处理后，0.45μm滤膜过滤，用高效液相色谱法进行分析，样品回收率94.99%，变异系数0.12%，线性回归方程Y=(8.097e+06)X+0.000，R=0.9999, 结果令人满意。
2 实验部分
2.1仪器及试剂
高效液相色谱仪：Waters（包括M6000泵，U6K进样器，M440检测器）系统。色谱柱Hypersil ODS 2 (4.0*250mm 5μ)(大连依利特)。WDL-95色谱工作站(中科院大连化物所)。检测器波长=254nm，流动相为:甲醇 : (1%) 冰乙酸=30 :70，流速：0.8ml/min。香兰素(分析纯，含量≥99.5％，上海分装)，冰乙酸（分析纯），甲醇（色谱纯）。
2.2操作方法
2.2.1. 标准曲线的制作
精密称取香兰素0.1000g于100ml容量瓶中，加50%乙醇至100ml，混匀，配制成1.00mg/ml的标准溶液。吸取香兰素标准溶液适量用50%乙醇稀释成0.10~0.20 mg/ml，经0.45μm滤膜过滤，进样10ul(见图一)，测定保留时间及峰面积（或峰高）。每个浓度重复测定三次，取峰面积（或峰高）平均值。以香兰素含量对峰面积（或峰高）作图，绘制标准曲线(见图二) 。2.2.2样品处理
称取样品5.0g于100ml容量瓶中，加入蒸溜水至100ml，混匀，经0.45μm滤膜过滤，进样10ul，以香兰素标准峰的保留时间定性，由标准曲线上计算出香兰素的含量。
3 结果与讨论
3.1. 流动相选择 选择甲醇 : (1%) 冰乙酸比例分别为30:70、50:50、70:30等，按上述条件进样分析，以 30:70为好。波长选择254nm。
3.1.2 样品处理简单 薄层层析法及气相色谱法测定食品中的香兰素时样品需经酸、碱处理，有机溶剂萃取，而本法仅须简单过滤即可。
3.1.3 常见食品添加剂如苯甲酸、山梨酸、糖精钠对样品测定无干扰。样品中香兰素最低检出限为0.1mg 。
3.1.4 测定样品线性回归方程Y=(8.097e+06)X+(0.000)，R=0.9999 ，平均回收率为94.99%，变异系数0.12% (见表一) 。
表1 样品测定结果及回收率
参考文献
1. 贾淑贞，李发生，实用食品添加剂手册，郑州，河南科技出版社。1996 . 8 .第一版，259
2. 肖学成，环境与健康杂志，1992 ，(9) ，增刊：18
3. 王建华，中国卫生检验杂志，2000 ，10 ，(2) ：178
作者：
王 建 华 2007-5-18