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【关键词】 白癜风颗粒；补骨脂素；异补骨脂素；色谱法，高压液相
白癜风颗粒由补骨脂、黄芪、红花、当归、川芎等15味中药组成。具有益气行滞、活血解毒、利湿消斑，驱风止痒之功效，在本院皮肤科应用多年，证实对白癜风等疾病有效。为了控制白癜风颗粒的质量，保证临床用药效果，本实验建立了HPLC测定白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的方法。经方法学考察证实该方法特异性高，回收率和精密度好，结果满意。
1 仪器与试剂
Waters600高效液相色谱仪，Waters 2487紫外、可见波长检测器；Breeze色谱工作站；十万分之一微量分析天平；补骨脂素对照品(110730-200309)和异补骨脂素对照品(0738-200108)购自中国药品生物制品检定所；甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯，白癜风颗粒由本院自制。
2 方法与结果
2.1 色谱条件［1］ 色谱柱，ReliaSil.C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相:甲醇-水(47∶53)；流速，1.0 mL/min；检测波长，245 nm；柱温：室温。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素对照品10.42 mg，异补骨脂素10.92 mg，置10 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1.5 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量,摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性对照品溶液的制备 按处方制备取不含补骨脂药材的样品颗粒剂，按供试品溶液的制备方法制成相应的阴性样品溶液。线性关系考察：精密吸取补骨脂素与异补骨脂素混合对照品溶液2、4、6、8、10 μL，分别注入液相色谱仪，测定补骨脂素与异补骨脂素色谱峰面积。以补骨脂素与异补骨脂素的进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=1.25×103+7.55×106X,r=0.999 7。
结果表明，补骨脂素在0.031 264～0.156 30 μg有良好的线性关系，异补骨脂素在0.032 76～0.163 80 μg具有良好的线性关系。
2.5 精密度实验 精密吸取同一供试品溶液(批号：050502)5 μL，重复进样6次，分别计算补骨脂素和异补骨脂素的质量分数，结果其RSD分别为0.76%和1.29%。
2.6 稳定性试验 精密吸取对照品溶液5 μL，分别于0,2,4,24,36 h测定峰面积，计算得补骨脂素和异补骨脂素峰面积的RSD分别为1.99%和1.62%,表明对照品补骨脂素和异补骨脂素在36 h稳定。
2.7 重现性实验 取样品，精密称定5份，制备供试品溶液，进样测定计算补骨脂素和异补骨脂素的质量分数，其RSD为0.59%。
〖JP2]2.8 回收率实验 采用加样回收法。取批号为050501的样品5份,每份0.25 g，置具塞锥形瓶中，各精密加入补骨脂素和异补骨脂素混合对照品0.14 mg，制备供试品溶液，进样，测定。结果补骨脂素和异补骨脂素平均加样回收率为99.04%，RSD为1.50%。
2.9 样品测定 取3批白癜风颗粒制备供试品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5 μg，进样，测定，结果见表1。根据结果，暂定本品以干燥品计，含补骨脂素和异补骨脂素总含量不得少于0.22 mg/g。表1 白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的测定结果
3 小结
流动相的确定 本实验曾选择乙醇—水溶液系统，结果不太理想，补骨脂素和异补骨脂素的出峰区间有干扰，峰形欠佳。而采用本实验的色谱条件即甲醇—水系统，补骨脂素和异补骨脂素的峰形得到明显的改善，且干扰减少。
【参考文献】
［1］宋炳生,李汉保,施惠熏.双黄生血冲剂中补骨脂素的含量测定［J］.中草药,2000,31(2):28.