葛根药材HPLC指纹图谱研究中药指纹图谱 | 39康复网

   【摘要】目的:对不同来源的葛根药材指纹图谱比较研究。方法:应用RP-HPLC法、KrornasilC 18分析柱、乙睛一水二元梯度洗脱，流速为1.0 mL/min,检测波长250nm.结果与结论:不同来坏的葛根药材所含黄酮类成分均得到很好的分离，该法可用于鉴别葛根的品种，并为葛根注射液及含葛根药材的中药复方注射液指纹图谱研究奠定基础。
    【关键词】葛根;指纹图谱;高效液相色谱;梯度洗脱
    豆科植物葛根包括野葛Pueraria (Iwild.) Ohwi与甘藤葛P.th omsoniiB enth labata，均收载于《中国药典》各版，广泛应用于临床。目前尚未见文献报道有关葛根药材及其制剂的指纹图谱研究。按照国家药品监督管理局关于“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)”的通知，作者参照相关文献，对不同产地的葛根药材进行了指纹图谱研究。

    仪器与试剂
    岛津 LC- 10AT液相色谱仪，包括LC-10A7，色谱泵、SPD-10A紫外检测器、混合器。江申JS-3030色谱工作站。葛根素对照品(批号752-200108中国药品生物制品检定所提供)，乙腊为色谱纯，水为高纯水，其他试剂均为分析纯。药材:野葛与粉葛，经安徽中医学院生药教研室周建理教授鉴定为Puerarial obata或P.th omsoni。
    实验方法与结果
    色谱分析条件：流动相为乙睛一水二元梯度洗脱，流速1.0mL.min-1，检测波长250nm，色谱柱Kromasi15-C18(4.6mm x 150 mm，5μm)江苏汉邦科技有限公司，柱温30℃。所有组分在40 min内出完.
    供试品的制备：取各批葛根药材粉末(过3号筛)(野葛0.1g ,粉葛0.8 g)精密称定，置锥形瓶中，精密加人30%乙醇50 mL，称定重量，加热回流30 min，放冷，再称定重量。用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
    参照物溶液的制备：精密称取葛根素对照品适量，用甲醇稀释成每1 mL含100 Kg的溶液，作为参照物溶液。
    指纹图谱的建立
    方法：分别精密量取对照品溶液和各供试品溶液20kL，注人液相色谱仪，记录60 min色谱图即得。以葛根素的色谱峰(s)的保留时间和峰面积为1，计算其它各峰的相对保留时间和相对峰面积比值。
    方法学考察：
    稳定性：以霍山产葛根药材为供试品，分别在0,2,8,12,24 h检测指纹图谱，见表3，结果表明，各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值无明显变化。
    精密度：以霍山产葛根药材为供试品，连续进样5次，检测指纹图谱，结果表明，各色谱峰的相对保留时间和单峰面积大于或等于10%的峰(s,5,7号峰)面积比值基本一致。
    重现性：取霍山产葛根药材5份为供试品，检测指纹图谱，见表5，结果表明，各色谱峰的相对保留时间和单峰面积大于或等于10%的峰(s,5,7号峰)面积比值基本一致。

作者： 2006-3-27