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深圳检验检疫局研制的“基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒”，标志着拥有我国自主知识产权的非洲猪瘟（ASF）检测产品面世，进一步完善了我国抵御非洲猪瘟传入的检测技术储备。
“目前非洲猪瘟检测试剂依靠国外进口，这项目的完成有望打破这种局面。”在国家质检总局动物检疫专业项目集中验收会上，专家组宣布深圳检验检疫局承担完成的质检总局科技项目“基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制”通过验收，该项目成为质检总局执行科技项目集中验收管理机制后首批通过动物检疫专业领域验收的项目之一。
防御形势严峻
非洲猪瘟（ASF）是猪的一种烈性、急性、高度接触传染性疾病，被OIE列为必须报告的动物疫病，被我国列为一类动物疫病。由于我国尚未发生非洲猪瘟病例，在《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》中，非洲猪瘟被列为重点防范的13种外来动物疫病之一，排名第二，危害性仅次于疯牛病。
家猪、野猪和软蜱是传播非洲猪瘟病毒的主要宿主，国际航班和港口船舶上被污染的食物残渣、饲料和带毒昆虫都是病毒的传染源。目前，非洲猪瘟已在非洲、美洲、欧洲和亚洲等49个国家有报道，疫情在全球更有扩大的趋势。与我国土地接壤超过4300公里的俄罗斯，自2010年以来已发生近20次非洲猪瘟疫情，导致超过15万头猪的死亡或被扑杀，造成了严重的经济损失。由于边境地区野猪活动的频繁，动物产品自由贸易的繁盛，造成了我国防御非洲猪瘟病毒传入的严峻形势。
急需技术储备
当前，没有理想疫苗可用于非洲猪瘟病毒的免疫，一旦发生，清除病毒的唯一途径是执行全群扑杀，因此应严格检验，以预防为主。根据OIE《陆生动物诊断试验与疫苗手册》，PCR方法检测病毒核酸和ELISA方法检测血清抗体均是具备生物安全性、没有散毒危险的检测方法，适合我国这样无非洲猪瘟的国家使用。然而，目前国内用于监测非洲猪瘟病毒血清抗体的试剂盒基本依靠国外进口，价格昂贵，订货周期长，关键核心技术掌握在境外，不利于我国建立健全非洲猪瘟检测的技术储备。
我国急需研制用于非洲猪瘟病毒血清抗体检测的试剂产品，其中c-ELISA检测试剂盒尤其适用于对动物血清中的病毒抗体进行高通量、快速、准确的检测，以便在发现抗体检测结果阳性情况下迅速控制动物群体，及时截断病毒传入的路径。
研究成果实用
VP73蛋白是非洲猪瘟病毒的主要抗原性结构蛋白，基因结构稳定保守，即使是不同毒株其DNA序列或氨基酸序列的相似性都很高，可超过96%以上。VP73蛋白在自然感染中可诱导产生抗体，也是最早产生的抗体种类之一，且抗原性稳定，存在时效长，水平稳定。VP73蛋白经细胞传代后产生的抗原性也极为稳定，是ELISA和免疫印迹技术检测非洲猪瘟血清抗体的主要抗原和素材。目前，国外评价较好的ELISA试剂盒，大多数都是利用VP73重组蛋白作为包被抗原研制的，表明VP73蛋白具备良好的特异性、抗原性和稳定性，在非洲猪瘟免疫学检测的素材应用中占有重要地位。
“基于VP73表达抗原和单抗的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒研制”项目的主要研究靶标也是定位在VP73蛋白基因，目标是研制不涉及活毒操作、快速、准确和安全的检测方法，适用于我国这样无非洲猪瘟的国家使用。在项目验收会上，专家组对此项目取得的多项重大研究成果进行了验收审核，并给予了一致好评。该项目建立了普通PCR和Taqman探针实时荧光PCR两种快速检测非洲猪瘟病毒的分子生物学方法；完成了病毒VP73蛋白基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的重组表达，重组蛋白经纯化，免疫小鼠，通过杂交瘤细胞融合技术，筛选获得了特异性良好的单抗细胞株，腹水抗体效价达1：512000以上；利用VP73表达抗原和单抗建立了非洲猪瘟血清抗体c-ELISA检测方法并研制成试剂盒。
研制的非洲猪瘟c-ELISA试剂盒经云南、湖南、广东、重庆、上海和珠海检验检疫局的应用验证，对试剂盒的灵敏度、特异性和使用效果等方面均反响良好。
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从OIE非洲猪瘟参考实验室引进标准阳性血清等相关材料，进行比对检测，自主研制的c-ELISA试剂盒与国际知名品牌检测试剂盒——西班牙INGENASA公司c-ELISA商业试剂盒的检测符合率达93.4%以上。
