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早在70年代已有证明，某些遗传性肿瘤中染色体的某些位点可发生专一的丢失。如视网膜母细胞瘤的40％属先天性。这些遗传性病例中（大多为双侧性）的患儿，在生睛后约5％可见染色体13q14的一个等位基因位点的缺失，尚可能有形态学上不能分辨的其他缺失。但肿瘤发生时，肿瘤细胞中另一个等位基因也发生了缺失，成为纯合体。这提示，第一次的缺陷属先天性，第二次属体细胞突变。因为只是两个等位基因同时缺失时才发生视网膜母细胞瘤，因此这种抗视网膜母细胞瘤形成的基因（Rb）具有显性的意义。A.Kmudson从这一事实，提出了“两次突变”学说。
根据酯酶D的测定和与染色体13有关的限制性内切片段长并多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP），证明至少50％的视网膜母细胞瘤细胞中存在纯合体的13q14、20缺失。经治疗后痊愈的儿童，以后易患肉瘤，而这种瘤细胞中也发现了13号染色体标志位点的缺失。
另一个相似的例子是肾母细胞瘤（Wilm瘤），在肿瘤细胞中出现纯合子的11q13的缺失，11p标记位点的缺少还与肝母细胞瘤，小儿横纹肌肉瘤、肾上腺皮须癌有关。
上述资料提示，正常细胞中存在着具有抑制某些肿瘤发生的某些基因或基因片段。
二、正常和恶性细胞杂交中正常细胞染色体对恶性行为的抑制
应用体细胞杂交技术，正常细胞与恶性细胞杂交后所形成的杂体细胞，其恶性程度降低，但随着正常染色体被逐－排斥，恶性度又恢复。因而，可以分析出具有恶性行为的基因在哪一条正常染色体上。例如，正常小鼠成纤维细胞和恶性转化细胞杂交后，抑制恶性生长的基因位于小鼠染色体上4；正常人成纤维细胞与中国仓鼠或金仓鼠恶性转化细胞杂交时，抑制恶性行为的基因分别位于染色体2或1。但正常人成纤维细胞和人HeLa细胞杂交时，这种“阻抑基因”位于染色体11及14。因此，不同种属，不同种类恶性细胞的抗肿瘤基因的种类亦不相同。目前，已有应用DNA转染技术来分离“抗肿瘤基因”的初步报告，但其意义还有待进一步研究。
三、抗肿瘤基因的性质和生物学意义
由于对抗肿瘤基因编码的产物尚不了解，所以目前仍难以说明抗肿瘤基因的性质和确切的生物学功能。R.Sager推测[44]，抗肿瘤基因的产物包括不少抑制细胞生长的物质，其中有抑素chalone、生长抑制因子（GIF），细胞MHC-I抗原（有助于机体免疫系统的有效识别）以及基因组维持其遗传稳定性的基因等。所谓抗肿瘤基因可能包括：
1.编码抑制细胞生长的一些物质。
2.基因表达的调节控制序列，包括trans调节或cis调节的负控制区。
3.调控基因组稳定性的某些基因。
以上仅仅是根据现有材料的一些推测，将有待于实验的证实。
最近有三方面的实验室结果，比较直接提供存在抗瘤基因的证据。
首先是Rb基因的分离。美国哈佛大学、麻省理工学院的小组和加州大学的小组分别分离出Rb基因的cDNA及其DNA序列分析。这无疑成为抗瘤基因研究的一个重要里程碑。Friend.S.H.等人用一个定位于13q14、11，以前用于Rb基因限制性内切酶长度多态性研究的DNA片段H3-8为探针，从人胎盘cDNA文库中筛选出一个4.7kb的cDNA片段，并同时分离出相应的基因片段的克隆，用上述cDNA为探针，可在正常人的组织DNA中看到杂交信号，而在部分的视网膜母细胞瘤的DNA中则可看到信号的缺失。如果用Nouthern吸印杂交的技术来检测正常人某些组织及视网膜母细胞瘤的mRNA，可发现在前才有4.7kb的信号，而在后者则此mRNA缺失。目前该cDNA的全部DNA序列已经测出。
同时，李文华（W.H.Lee）等人利用酯酶D的基因，通过染色体移步（chromosomalwalking），应用cDNA和单一顺序DNA片段向两侧延伸，终于分离到Rb基因的cDNA及基因片段。此cDNA长4.6kb，涉及到的基因大于100kb，由27个外显子组成。从cDNA序列分析，预计可翻译出816个氨基酸组成的多肽。在视网膜母细胞瘤中，不仅可见基因的部分丢失，而且可看到mRNA转录物的缺失或异常。另一方面，对Wilm瘤的研究也有所突破。Stambridge等人应用微细胞杂交技术，首次证明了将11号染色体短臂片段导入Wilm瘤细胞，可使细胞丧失在软琼脂中生长的能力和在裸鼠体内的成瘤能力。但对瘤细胞的形态、c-myc、N-myc及c-sis的表达均无影响，用其它染色体片段如13号染色体对Wilm瘤的成瘤能力并无作用。实验结果表明，11号染色体上的抗瘤基因产物与肿瘤形成后期存在某种联系。