慢性肝病患者肝组织中HGV-Ag的定位研究

迄今为止，对庚型肝炎病毒(HGV)感染在慢性肝病肝组织中HGV-Ag的定位研究报道较少。本项研究应用抗-HGV NS5单克隆抗体(McAb)以过氧化物酶与抗过氧化物酶(PAP)法检测了166例慢性肝病患者肝组织中HGV-Ag，旨在探讨HGV感染在慢性肝病患者肝组织中定位表达的状况及其意义。选择1995～1997年间住院患者肝活检标本148例，尸检肝组织18例，根据血清标志物检测结果诊断为非甲～非戊型肝炎21例，慢性丙型肝炎49例，慢性乙型肝炎56例，肝硬化27例，肝癌13例。其中男性124例，女性42例，年龄20～73岁。

　　血清学病毒标志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBcAb-IgM和HCV-Ab试剂盒由上海科华公司提供，血清HGVAb和HGV-RNA PCR、HCV-RNA PCR试剂盒由上海长征公司和北医大肝病研究所提供。全部病例均经肝活检或死后即刻多方位点肝穿尸检病理诊断证实。肝组织用10%甲醛固定后石蜡包埋处理，用PAP法检测。抗-HGV NS5 McAb由军事医学科学院王海涛教授惠赠，免疫组化试剂购自北京中山生物技术公司。阴性对照用2例正常肝组织选非肝病肝组织，其血清学各肝炎病毒标志物及肝组织免疫组化测定HBVM、HCVM、HGVM均阴性。阳性对照为预试中HGV-Ag阳性慢性丙肝患者肝组织切片。结果发现，166例慢性肝病患者HGV-Ag NS5区阳性总检出率为19.28%(32/166)，其中非甲～戊型肝炎为25.57%(6/12)、慢性丙型肝炎为22.45%(11/49)、慢性乙型肝炎为14.28%(8/56)、肝硬变为18.52%(5/27)和肝癌为15.38%(2/13)。HGV-Ag阳性肝细胞多呈散在、局灶和弥漫性三种形式分布，HGV-Ag染色阳性呈黄色或棕黄色颗粒状表达，阳性反应部位大多定位于肝细胞质或肝细胞膜，另外少部分病例呈质膜两型均存在。阳性细胞大多呈散在性分布于肝小叶内，部分呈灶性分布，邻近肝细胞呈阴性反应；阳性反应细胞周围可见淋巴细胞浸润。

　　HGV感染呈全球性分布，HGV是否为嗜肝病毒及其致病性的问题尚有争议。由于临床上单纯HGV感染病例较少，所看到较多的是HGV合并HBV和HCV重叠感染。其原因可能由于HGV与HBV、HCV具有共同传播途径有关。本组49例慢性丙型肝炎中，有41例(83.67%)接受过输血或输血制品治疗，揭示输血或输血制品是HGV感染主要传播途径。通过对本组慢性肝病患者进行肝组织内HGV-Ag免疫组化检测表明，我国慢性肝病患者中存在着HGV感染，而且有较高的检出率，尤以慢性丙肝为显著；HGV-Ag NS5区抗原的表达，可能在各类慢性肝病的发生中起一定的病原学作用。HGV单纯感染同HBV和HCV重叠感染之间是否存在着协同作用和相互抑制作用，我们正积累更多病例，进行多次肝活检和长期随访调查以便更深入的研究。