视网膜母细胞瘤中Fas／FasL表型的检测及意义

视网膜母细胞瘤中Fas／FasL表型的检测及意义

免疫学杂志 2000年第5期第16卷 短篇报道

作者：孔令非　刘正国　赵耀武　银平章

单位：孔令非（河南省人民医院免疫病理室，河南 郑州 450003）；刘正国（河南省人民医院免疫病理室，河南 郑州 450003）；赵耀武（河南省人民医院免疫病理室，河南 郑州 450003）；银平章（河南省人民医院免疫病理室，河南 郑州 450003）

关键词：视网膜母细胞瘤；凋亡；Fas；FasL；免疫逃逸

　　［中图分类号］ 744.1 ［文献标识码］ B

　　［文章编号］1000-8861（2000）05-0398-01

Detection and significance of the phenotype of Fas／FasL in retinoblastoma

　　Fas是一种细胞表面分子^［1］，可与其特异性配体Fas-Ligand（FasL）结合，诱导细胞凋亡的发生。许多肿瘤细胞可表达FasL，明显减弱Fas阳性细胞毒性淋巴细胞的攻击能力，是肿瘤细胞逃避机体免疫攻击的新机制，在肿瘤的发生和发展中起重要作用。本文拟研究Fas、FasL在视网膜母细胞瘤中的表型及其意义。

　　1 材料与方法

　　1．1 材料 视网膜母细胞瘤45例及正常视网膜组织12例。

　　1．2 方法 石蜡切片4 μm，经脱蜡，水化，内源性酶灭活，封闭，微波修复5 min 2次，分别加入一抗FasL（1∶300）Fas（1∶500），4 °C过夜；加入生物素化的二抗，室温孵育15 min，再加入酶复合物，室温孵育15 min，DAB显色。经高清晰彩色病理图象分析系统（HPIAS-1 000）处理，根据染色范围分为：0～4（“0”表示阳性细胞数为0；“1”表达细胞数1％～25％；“2”表达细胞数在26％～50％；“3”表达细胞数在51％～75％；“4”表达细胞数在76％～100％）^［2］。Fas及FasL分别用肺癌组织和睾丸组织作阳性对照，结果均阳性。

　　1．3 统计学处理 数据用均数±标准差表示，用非配对t检验，取P＜0.01为显著性的标准。

　　2 结果

　　2.1 FasL在视网膜母细胞瘤中表型的检测 FasL主要在胞浆及胞膜上表达，分布弥散（3．021±0.847）；正常视网膜细胞全层表达（3．583±0.668，P＝0.023），均为高表达。

　　2.2 Fas在视网膜母细胞瘤中表型的检测 Fas在正常视网膜组织中几乎无表达（0.083±0.289），在视网膜母细胞瘤中有极弱的表达（0.255±0.441，P＝0.1148），均为低表达。

　　3 讨论

　　Fas与FasL相互作用是诱导细胞凋亡的重要途径之一；FasL不仅在激活的淋巴细胞及单核细胞中有表达^［3］，在某些特殊部位如睾丸、眼、脾脏及神经组织等处有高的表达，并且在许多恶性肿瘤中也有高的表达，认为肿瘤细胞FasL的表达可诱导浸润淋巴细胞的凋亡，而使肿瘤细胞本身逃避免疫系统的监视和控制。有实验表明^［4］：当把HSV-1注射到眼前房，开始时有中性白细胞及淋巴细胞的浸润，但在注射后24 h，浸润细胞发生明显的凋亡；在正常情况下，炎症只局限在前房，很少波及后房，更不会影响视网膜；当把HSV-1病毒注入Fas-的小鼠和FasL-的小鼠前房，均引起强烈的炎症反应而不伴随凋亡的发生，表明浸润细胞凋亡的发生依赖于功能性Fas及FasL的表达；并发现FasL在正常角膜上皮、角膜内皮、睫状体及视网膜全层均有强的表达，是免疫特赦的物质基础。本研究结果显示：视网膜母细胞瘤的细胞浆和细胞膜上表达较强的FasL和极弱的Fas与正常视网膜组织相比均无显著性差异（P＞0.01），表明FasL在正常视网膜组织和肿瘤组织中均高表达，而Fas均为低表达，是贯穿视网膜母细胞瘤发生发展过程的一个事件，正常情况下是免疫特赦的物质基础，肿瘤情况下是逃避免疫功击的途径之一，有利于视网膜母细胞瘤的失控性增生，在肿瘤的发展中起重要作用。

　　［作者简介］ 孔令非（1963－），男，河南郑州市人，副主任医师，医学硕士，主要从事肿瘤免疫诊断的研究。

［参考文献］

　　［1］ KAWAHARA A， KOBAYASHI T， NAGATA S． Inhibition of Fas-induced apoptosis by bcl-2［J］． Oncogene， 1998，17（20）：2 549－2 554．

　　［2］ MITSIADES N， POULAKI V， KOTOULA V， et al． Fas／fas ligand up-regulation and bcl-2 down-regulation may be significant in the pathogenesis of Hashimoto’s thyroiditis ［J］． J Clin Endocrinol Metab， 1998，83（6）：2 199－2 203．

　　［3］ SASAKI Y， AHMED H， TAKEUCHI T， et al． Immunohistochemical study of Fas， Fas-ligand and interleukin-1 beta converting enzyme expression in human prostatic cancer［J］． Br J Urol， 1998，81（6）：852－855．

　　［4］ THOMAS SG， THOMAS B， SHARON M， et al． Fas ligand-induced apoptosis as a mechanism of immune privilege［J］． Science， 1995，270（17）：1 189－1 192．

　　［收稿日期］ 2000-01-07； ［修回日期］ 2000-04-17