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基因治疗是现代分子生物学技术发展的产物，自美国第一例基因治疗以来，发展迅速，得到了社会和科学家的重视，不但在一些遗传性疾病如血友病、白化病等方面引起了重视，也在一些非遗传性疾病如癌症、获得性免疫缺陷综合征的治疗等方面得到了应用［1］。组织修复有其自身的特点，创面经过炎症期、肉芽期等几个时期逐渐愈合。研究发现［2］，部分伤口中某些生长因子半衰期较短，以及一些酶活力增高，致使生长因子浓度相对降低，伤口迁延不愈，形成慢性难愈合创面，而另一些创面由于生长因子浓度的持续增高，细胞增生过度，则形成瘢痕或瘢痕疙瘩，因此修复质量是创伤治疗的核心。自基因治疗技术发展以来，为创伤的临床治疗提供了新的思路。
1 基因治疗技术
一般而言，从策略上考虑，进行基因治疗有两种方法，一是体内法，即将载有目的基因的载体直接注入受损创面，从而将目的基因整合到基因组上，提高生长因子等促创面愈合因子的分泌。然而该方法具有一些明显的不足，首先是被转染的细胞特异性不高，一些非特异性细胞也将被整合上目的基因，导致生长因子表达的紊乱，虽然可能促使伤口愈合，但同时也将影响组织的其他生理功能；其次，如病毒转染，虽然目前尚没有因基因治疗诱发病毒感染，导致癌化的报道，但存在潜在的危险性。另一种是体外法，可克服体内法的不足，将待转染的细胞从机体中分离出来，在体外培养，扩大细胞数，然后再运用多种转基因方法将目的基因导入细胞，经筛选，将载有目的基因的细胞回输入机体，从而在机体中分泌该种生长因子，促进创面愈合。但这两种策略均离不开一些具体的基因转导技术。
1.1 非病毒转导技术
1.1.1 脂质体转导技术：脂质体包裹的DNA转导技术有赖于DNA、脂质体的离子特性以及细胞膜表面的负电荷。具体过程为，脂质经氯仿抽提，蒸干，重新溶于水，经超声处理等一系列过程［3］。脂质体与DNA非共价结合成复合体，以脂质体—DNA复合体的形式吸附在靶细胞表面，将DNA导入胞浆。然而该方法DNA整合体转导的稳定性较低，与磷酸钙转导率近似。
脂质体转导可以用于各种组织细胞，其主要优点是对基因片段大小的限制较少，而且转导细胞相对无害，重复性好。然而其缺点是基因转入细胞，整合到细胞染色体上形成稳定性的基因组较低，并且靶细胞的组织特异性差，不利于特定组织细胞的基因转导。
1.1.2 基因枪技术：该技术的要点是将目的基因制成带电颗粒，在高压电泳的作用下，直接穿透细胞膜进入细胞，在细胞自身的生理机制下，整合到宿主染色体上，形成稳定的基因表达。有趣的是，该技术并非首先用于动物细胞的基因转导，而是最早应用于植物优良品种的培育。近年研究发现，它也可以应用于哺乳动物。有文献报道［4］，基因枪技术可以应用于多种组织细胞，不受动物种属和器官特异性的限制，如皮肤、肝脏、胰腺、肾脏和肌肉等均有成功的报道，而且能够较长时间的测定到转导组织中目的基因的表达。然而总的来说，转导基因的表达是短暂的，长效表达的基因率较低［5］，但其优点也比较明显，如应用广泛，可携带的DNA片断较大，目的基因多，可用于不同基因间共表达，从而有利于探讨不同基因间的相互关系。
1.2 病毒转染技术
1.2.1 重组逆转录病毒：逆转录病毒是一个8kb单链RNA病毒，目前常用的是鼠逆转录病毒［6］，包含三个重要的病毒基因：编码逆转录酶系统的pol基因，编码外壳蛋白的 env基因以及与病毒蛋白组装有关的gag基因。这三种基因均可以被目的基因所取代，形成重组逆转录病毒载体。然由于该载体没能组成具有感染力的病毒，并不能就此感染靶细胞，需经包装细胞系提供组成病毒必需的蛋白质，组装成具有感染活性的载体病毒，才能用于基因转染，其浓度大约需要10-6～10-7PFu/ml。包装的病毒与靶细胞共同孵育，与细胞表面的受体相结合，将DNA注入胞内，而蛋白质外壳留在胞外，进入细胞的DNA在逆转录酶等酶的作用下，整合到宿主基因组中［7］。该方法的优点是有相对较高的DNA整合率，但可转染的DNA片断较小，而且经包装后可用于转染的病毒浓度较低，限制了它的应用。
1.2.2 重组腺病毒技术：腺病毒是一个35kb的双链DNA病毒［8］，大多数重组腺病毒载体是腺病毒Ⅴ型及Ⅱ型突变体。该病毒基因由几个早期(E1～E4)和晚期基因(L1～L5)转录区域组成，其转录区依赖复制前后的调控基因的表达。大多数腺病毒载体具有一个可去除的E1区，该区可被目的基因所插入，如要插入较大目的基因，E3区也可去除，一般来说，重组腺病毒通过包装细胞株293由目的基因与腺病毒E1区同源重组构成。与重组逆转录病毒相比，得到的有效重组病毒的滴度较高，而且能够转染分化的细胞，然而其缺陷是具有较大的毒性，易引起机体的免疫反应，从而影响转染效果［9］。
2 基因治疗在皮肤软组织修复中的应用
由于创伤可发生在多种组织细胞，每种组织器官有其自身的特点，因此临床基因治疗是一个复杂的生物学过程，战略上一般需要考虑靶器官的特点、目的基因及技术方法的选择等事项。根据皮肤软组织创伤修复的特点，基因治疗时有不同的侧重点。
2.1 促进细胞活性 组织损伤后，需要尽快填补缺损创面，促进细胞分裂增殖，近年研究发现，一些生长因子如FGF、TGF等细胞因子能促进细胞从细胞间期进入分裂期，因此其基因是基因治疗的首选对象。Eming SA等近年报道［10］，在软组织损伤中，体外用逆转录病毒技术将PDGF转染角化细胞，再将该细胞移植于去胸腺小鼠创面，病理检查发现，愈合创面皮肤较对照明显增厚，皮下细胞增生，血管含量丰富，纤维连接蛋白沉积增加。如转染IGF［11］除上述表现外，转染的角化细胞分裂增生，迅速覆盖创面，加速伤口愈合。Andree［4］等证实，转染表皮生长因子EGF，受损动物部分皮肤角化细胞分裂增生，向创面中心迁移速度提高，表皮化加剧，伤口愈合时间缩短。Benn［12］等在运用基因枪技术，将TGFβ转染实验动物，