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1实验材料
白花蛇舌草：购自济南市建联中药店。并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定。顺铂(DDP)：齐鲁制药有限公司。人肺巨细胞癌细胞株PG细胞：由山东省医学科学院基础所提供。Wistar大鼠，雄性，体重200—240g，由山东中医药大学实验动物中心提供。全自动酶联免疫检测仪：深圳雷杜电子公司。倒置相差显微镜：美国A0。c02培养箱，超低温冰箱。RPMll640培养基：Gibc0公司产品。小牛血清：杭州四季青生物材料研究所。二甲基亚砜(DMSO)：Sigma公司产品。噻唑蓝(盯r)：Sigma公司产品。
2实验方法
2．1白花蛇舌草水提取物的制备称取白花蛇舌草2009，加适量水漫泡卜2小时，水煎煮提取两次，合并提取液，浓缩成一定浓度(50s生药，Icg)，即得白花蛇舌草水提取物。
2．2含药血清的制备取Wistar大鼠20只，随机分成正常血清组10只，含药血清组l0只。含药血清组每日分别白花蛇舌草4ml／次，2次，日灌胃，正常血清组每日给予等量生理盐水灌胃，连续给药3天，末次给药后l小时，乙醚麻醉。腹主动脉无菌采血，置无菌离心管离心10分钟(1500r／min)，无菌分离血清，经56℃、30分钟灭活，用0．22Van徽孔滤膜过滤除菌，分装入小瓶，置一20℃冰箱保存备用。
2．3细胞培养PG细胞用含10％小牛血清及青霉素和链霉素各100U／ml的RPMll640培养液于37℃、5％COz条件下培养，隔日传代。取对数生长期细胞进行实验。
2．4 PG细胞的分组处理取对数生长期PG细胞，调整细胞浓度至2×10S／ml，按每孔2×los接种于96孔培养板，培养24小时，细胞贴壁后，吸去上清液，分组，每组3个复孔，分组为正常血清组(浓度为10％)、白花蛇舌草含药血清组(浓度分别为5％、l0％、l5％)、化疗组和综合组(Iv#m1 DDP+5％白花蛇舌草含药血清、lp9／ml DDP+10％白花蛇舌草含药血清、DDP+15％白花蛇舌草含药血清)。
2．5细胞毒实验检测。分别培养24、48、72小时后加入m'r(Sm9／ml)20Vd，37℃继续培养4小时后弃上清终止培养；每孔加入DMS0200pl，37℃振荡l0分钟，在酶标仪490hm处测各孔光吸收度(OD)，计算各组细胞的生长抑制率。生长抑制率=[(对照组平均ODqs0值一实验组平均OD∞值)／对照组平均0D00值]×100％。
3结果
中药白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草的干燥全草，具有清热、利湿、解毒、消痈之功效，主治肺热喘咳、痈肿疗疮、毒蛇咬伤等症。临床上广泛应用于各种癌症的治疗。尤多用于治疗消化系统肿瘤以及子宫癌、淋巴癌、鼻咽癌等。现代药理研究表明白花蛇舌草具有抗肿瘤、抗菌、消炎等活性。本文采用法观察了白花蛇舌草含药血清对肺癌细胞PG增殖的影响，为探讨白花蛇舌草抗肿瘤细胞作用机制，以及白花蛇舌草抗肿瘤新药的开发和研制提供依据。四唑盐比色试验是一种检测细胞存活和生长的方法。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的还原为难溶性的蓝紫色结晶物(Formazan)并沉积在细胞中．而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMso)能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫检测仪在490nrn波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测，大规模的抗肿瘤药物筛选，细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。本实验以法检测观察白花蛇舌草含药血清对PG细胞株的细胞毒作用，结果表明．白花蛇舌草含药血清对PG细胞增殖有明显抑制作用，不同浓度含药血清对PG细胞增殖呈现出不同程度的抑制作用，随作用时间的延长抑制作用逐渐增强，呈现一定的时效和景效关系：含药血清与DDP合用，能明显增加DDP的细胞毒作用。以上结果提示白花蛇舌草不仅有直接抑制肿瘤细胞生长的效果，对化疗药物也有增敏作用，为白花蛇舌草抗肿瘤作用的临床应用和新药开发提供了一定依据。