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- 发布时间:2017/6/9 14:45:02
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第三军医大学,高原军事医学系,高原医学研究室,病理生理学教研室,重庆 China
研究目的
比较缺氧情况下肺动脉内皮细胞(Pulmonary arterial endothelial cells, PAECs) 和平滑肌细胞(smooth muscle cells, PASMCs) 在增殖活性、活性物质分泌方面的差异。
方法
细胞培养:胎牛PAECs和PASMCs取自同一肺小动脉段,在 含20%胎牛血清的RPMI-1640培养基中于37℃ 5% CO2 孵箱中培养。
细胞增殖活性:采用氚标胸腺嘧啶核(3H-thymidine, 3H-TdR)掺人和流式细胞技术测定。
放免测定:细胞cGMP(用用于评估细胞内NO 的产生)、ET-1、 ATII、 ANP等。
斑点杂交:测定ET-1 mRNA 表达
结果与讨论
一、PAECs与PASMCs增殖活性的比较
二、缺氧时细胞内cGMP的变化
三、缺氧时ET-1分泌和表达改变
四、缺氧时ATII变化的比较
五、缺氧时细胞ANP分泌的变化
六、缺氧时细胞EDLF分泌的变化
一、PAECs与PASMCs增殖活性的比较
3H-TdR掺人的时间-掺入关系
PAECs与PASMCs的3H-TdR掺人比较
PAECs与PASMCs的细胞周期改变
二、缺氧时细胞内cGMP的变化
三、缺氧时ET-1分泌和表达改变
缺氧时内皮细胞ET-1分泌和表达的改变
缺氧时平滑肌细胞ET-1分泌和表达的改变
平滑肌细胞增殖与ET-1自分泌的关系
四、缺氧时ATII变化的比较
缺氧时内皮细胞ACE分泌增加
缺氧时内皮细胞ATII分泌的改变
常氧时LNA促进内皮细胞ATII分泌
NO供体则抑制内皮细胞分泌ATII
缺氧时平滑肌细胞ATII分泌减少
LNA促进而SIN-1抑制平滑肌细胞分泌ATII
平滑肌细胞ATII自分泌参与常氧下细胞增殖调节
五、缺氧时细胞ANP分泌的变化
六、缺氧时细胞EDLF分泌的变化
缩血管物质:内皮细胞分泌增加,平滑肌细胞分泌减少
舒血管物质:内皮细胞分泌减少,平滑肌细胞分泌增加
结论:缺氧使血管活性物质分泌失衡,可能是肺血管收缩的重要机制
失衡与制约
小结与结论