383例阴道念珠菌感染菌群鉴定及药敏分析

    【摘要】  目的  分析念珠菌性阴道炎的临床分离菌特点及抗念珠菌药物的耐药情况。方法  按NCCLS推荐的M27A方案（肉汤微量稀释法）检测氟康唑等6种抗真菌药对6种共52株深部致病念珠菌临床分离株在体外的抗真菌活性。结果  383例标本中以白色念珠菌居多( 9609% )，其次为光滑念珠菌( 261% )，较少的有热带念珠菌( 104% )与克柔念珠菌( 026% )。药物敏感试验显示：制霉菌素、两性霉素Ｂ的敏感性均在90 %以上，耐药率以伊曲康唑为最高( 358% )，其次为氟康唑( 175% )。结论  念珠菌性阴道炎的临床分离菌除了白色念珠菌外，尚有光滑念珠菌、热带念珠菌及克柔念珠菌等菌种，制霉菌素与两性霉素Ｂ对念珠菌的敏感性较好，而伊曲康唑与氟康唑的耐药率比较高，应引起临床医师的重视。

    【关键词】  念珠菌性阴道炎； 菌种鉴定； 药物敏感试验

      Microbial population identification and comparison of the activities of antifungal agents in vitro

    GU Zhiqun

    Wuxi Second People's Hospital,Nanjing Medical University, Wuxi 214004

    【Abstract】  Objective  To analyze the clinic separable characteristics and compare the activities of fluconazole  with other 5 antifungal agents  in 383 cases of Candida viginitis. Methods   Microbial population was determined by the method guided to the standard M27A recommended by the National Committee for Clinical Laboratory Standards. Results  Ranked from the highest to to the lowest as C.albicans (9609%), C.glabrata (261%), C.troptical (104%), C.krusei(026%). Candistatin and amphotericin B were  most effective against all the tested clinical Candida isolates (>90%). The rates of drug fast were itraconazole (35.8%), fluconazole (175%). Conclusion  C.albicans, C.glabrata, C.troptical, and  C.krusei  were identified in all the 383 cases of Candida viginitis. Candistatin and amphotericin B was the most effective antifungal agents against all the tested clinical Candida isolates. The drug resistance of itraconazole and fluconazole should be reconstructed by clinicians.

    【Key words】  Candida viginitis,microbial population identification, susceptibility test

    为了了解念珠菌性阴道炎致病菌的菌种分布情况及耐药情况，回顾性的分析了我院2003年6月至2005年8月妇科门诊经细菌培养诊断为阴道念珠菌感染的病例383例，并对有关资料进行汇总、分析，结果如下。

    1  材料与方法

    1.1  病例选择  2003年6月至2005年8月妇科门诊就诊的有典型阴道炎症状（如外阴瘙痒、白带增多呈豆渣样），经培养证实为阴道念珠菌感染患者的阴道分泌物383例。取样前嘱患者停用阴道局部栓剂，避免性交。回顾性查阅相关资料并作统计（同一病人多次培养的重复菌株以一例计算）。

    1.2  质控菌株  白色念珠菌ATCC90028、克柔念珠菌ATCC6258、近平滑念珠菌ATCC22019、热带念珠菌ATCC750及光滑念珠菌ATCC90030。

    1.3  药敏纸片及药敏琼脂  两性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、特比萘芬采用丹麦Rosco公司的产品。念珠菌药敏琼脂购自广州乐通泰生物科技有限公司。

    1.4  培养与鉴定  菌落分离用沙保弱琼脂培养基（Oxoid，英国）。用科玛嘉显色培养基法鉴定到种（郑州博赛科技有限公司）。

    1.5  药敏试验  挑取单个菌落用无菌盐水调制成浊度为0.5 Mcfarland浓度的菌悬液。将菌悬液均匀涂布于念珠菌药敏板上，待平板表面的水分略干后，贴上Rosco药敏纸片。放入35℃培养箱孵育18～20 h。判断参考Rosco提供的药敏试验标准。

    2  结果

    2.1  菌种分布  383株念珠菌经鉴定白色念珠菌占9609 %，热带念珠菌占104 %，光滑念珠菌占261 %，克柔念珠菌占026 %。结果见表1。表1  383例念珠菌的菌种分布菌种例数构成比表2  383例念珠菌的药敏试验结果药名敏感

    3  讨论

    3.1  念珠菌性阴道炎的病因分析  念珠菌广泛分布于自然界,正常人体的皮肤、口腔、阴道、粘膜、消化道或其它脏器中存在而不致病，是人类的正常菌群之一。当机体的免疫力低下或某些因素有利于其繁殖、出芽时,便可成为致病菌而使人体发生感染。念珠菌引起的感染已成为一个重要的医学问题,且近年来发病有明显上升的趋势。念珠菌性阴道炎作为妇科的常见感染性疾病，主要发生于育龄妇女中。据估计75 %的育龄妇女一生至少患有1次念珠菌性阴道炎，40 %～50 %患者有再次发作的经历，而5 %的妇女有反复发作的外阴阴道念珠菌病，严重影响着育龄妇女的身心健康［1］。其发病与外阴不洁、内环境失调、抗生素滥用及性伴侣患病有关［2］，这些情况导致念株菌感染的重要原因。尤其是随着广谱抗生素的广泛使用和滥用，减少了阴道有正常防御力的菌群，导致菌群失调而患病。白色念珠菌是一种条件致病菌，也是致病性最高的一种念珠菌。文献报道［3］80%～90%的念珠菌性阴道炎是由白色念珠菌引起。在我们分析的人群中，白色念珠菌的检出率明显高于其他文献报道，检出的其他念珠菌种类较少。在临床也发现有极少数病人有典型的念珠菌阴道炎的临床症状，白带常规检查也显示念珠菌阳性，但培养显示阴性结果。可能因大量的阴道上皮细胞包裹，降低了检出率，导致假阴性结果。有学者认为,非白色念珠菌感染的出现及增加与念珠菌的非处方用药以及对复发性外阴阴道(RVVC)病长期不适当的维持治疗和重复治疗有关［1］。

    3.2  药敏分析  近年来,随着念珠菌引起的感染不断增多，抗念珠菌药物的大量使用，使得念珠菌的耐药现象出现且日趋严重，已引起国际社会的广泛关注，严密监测其耐药性已很有必要。本资料表明, 体外培养的敏感率，念珠菌对两性霉素B、制霉菌素的敏感率都较高，均大于90%，但唑类出现了较为严重的耐药现象，酮康唑、伊曲康唑、咪康唑、氟康唑、特比萘芬的耐药率（R+I）均高于50%，尤其是咪康唑的耐药现象尤为突出。提示临床医师应充分注意念珠菌的耐药性变化。盲目地凭经验用药极易造成新的耐药现象的出现，达不到有效的治疗目的。应正确认识到药敏试验的重要性，对可疑患者应及时采样、送检，进行念珠菌培养，证实为念珠菌感染后做药敏试验，依据药敏结果指导临床合理选用抗生素。我院根据药敏结果对大部分病人予制霉菌素（上海施贵宝公司的米可定泡腾片）局部用药，14 d为一疗程，月经后巩固两个疗程，大部分病人症状消失，白带常规检查阴性。但仍有少数病人停药后反复发作，呈顽固性念珠菌感染，考虑可能与阴道微生态失衡有关，需进一步研究。

    参  考  文  献

    1朱晓芳.外阴阴道念珠菌病的病原学研究进展［J］.国外医学.微生物学分册,2002,25(2):33

    2吴音，陈元.念珠菌性阴道炎病原性酵母菌鉴定的研究［J］.实用妇产科杂志,2002,18(4):231

    3苏应宽,徐增祥,江　森,等.新编实用妇科学［M］.济南:山东科学技术出版社，1995.287

    南京医科大学附属无锡市第二人民医院  无锡市  214004