点击显示 收起
The clinical significance of quantitative detection of HBV nuclear acid.
LI Hong-zhi，ZHANG Qing，YANG Liu.
（Laboratory Department of Jilin Maternal Hospital，Jilin132011，Jilin，P.R.China）
丙型肝炎病毒（HCV）是单股Ⅱ链RNA病毒，是输血后肝炎和散发性非甲非乙肝炎的主要病原，丙肝易演变为慢性或发展为肝硬化或肝癌，其发病机制主要为免疫病理损害。我国丙肝发病率约为1.58%～17.5%，目前诊断HCV感染的实验室指标主要有两个;抗-HCV和HCVRNA。抗-HCV是HCV感染的标志，可维持10年，但不能区分既往感染及现症感染，由于HCV在血清中浓度极低，用一般的血清学方法无法测到，所以采用RT-PCR的方法检测HCVRNA是目前唯一直接检测病毒血症的方法，是确定病人现症感染唯一特异性指标。丙氨酸氨基转移酶（ALT）由肝细胞制造，肝细胞的受损害程度与ALT有直接关系，它是体现肝细胞损害和坏死的特异性强灵敏度高的指标。现对146例高度怀疑丙肝患者的血清进行抗-HCV，HCV-RNA和ALT检测，分析报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 92份标本来自吉林妇产医院2003年9月～2004年9月怀疑为丙型肝炎的患者，其中9例HBV和HCV同时感染，其余HBsAg均为阴性;54份标本来自吉林市公安局戒毒所强制戒毒者，毒龄1～4年均有静脉注射史。
1.2 方法
1.2.1 HCV-RNA定量检测 采用荧光探针定量聚合酶联反应（FQ-PCR），试剂由中山大学达安基因诊断中心提供，操作方法按试剂盒说明，扩增仪为PE5700荧光定量PCR仪。试验结果由电脑自动分析计算出HCV-RNA量。HCV-RNA载量的正常值为<80拷贝/ml血清。
1.2.2 抗HCV检测 采用酶联免疫吸附法（ELISA）试剂由上海荣盛公司提供。
1.2.3 ALT检测 BecKmanCX5全自动生化分析仪，试剂由上海荣盛公司提供。正常<40U/L。
1.3 统计学方法采用t检验进行处理。
2 结果
2.1 HCV-RNA及抗HCV（+） 检测结果见表1，从表1可以看出81例HCV-RNA载量高于80拷贝/ml血清的病例，其抗-HCV阳性率为90.1%（73/81），而低于80拷贝/ml血清的病例抗-HCV阳性率18.5%（12/65），经相关分析，两者呈正相关（r=980，P<0.001）。
2.2 HCV-RNA载量变化与ALT异常率比较见表2。结果显示，81例HCV-RNA载量高于80拷贝/ml血清的病例中有67例ALT异常，其异常率随着HCV--RNA载量的升高而升高， 经相关分析ALT异常率与HCV-RNA载量呈正相关（r=0.938，P<0.001）。
表1 146份标本HCV-RNA载量及抗-HCV（+）检测结果（略）
表2 146份标本HCV-RNA载量变化与ALT异常率比较（略）
3 讨论
目前临床主要使用ELISA法检测HCV来确定丙型肝炎的感染。但该方法仅仅是HCV感染的间接指标，无法鉴别现症患者，也不能捧除恢复期和复制状况，达到早期特异有效的确诊目的。
人体感染HCV其血清1～15个月内产生抗体。HCV-RNA载量与抗HCV的滴度是否有关，本组资料的结果是肯定的，随着HCV-RNA载量呈正相关。HCV-RNA载量在10 2 或低于80拷贝/ml血清时，其抗-Hcv的OD值也处于最低临界值。HCV-RNA载量与ALT异常和浓度也呈正相关性，146份标本中HCV-RNA载量高于80拷贝/ml血清的有81份。阳性率为55.5%（81/146）;抗HCV的阳性率为58.2%（85/146）ALT的异常率为54.80/0（80/146）;本资料中HCV--RNA载量低于80拷贝/ml血清的病例中有12例抗-HCV阳性，可就是这些病例经过抗病毒治疗，使病毒复制减弱或停止，从而血清中HCV-RNA含量达不到最低检测量，所以对这部分感染者应跟踪检测HCV-RNA。由于抗-HCV在体内存在的时间长（1～10年），故抗-HCV阳性率略高于HCV-RNA的阳性率。本组病例中有8例患者HCV-RNA阳性但抗-HCV阳性，可能与下列因素有关:①患者HCV“窗口期”，此时机体尚未产生相应抗体;②HCV变异株的感染，需进一步追踪观察。目前，抗-HCV试剂盒主要由于基因Ⅰ型重组抗原制备的。试剂盒对检测基因Ⅱ型和Ⅲ型的灵敏度较低;③机体的免疫功能低下，不能产生相应的免疫应答。