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【摘要】 目的 了解海南省无偿献血者血清中抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ阳性率。 方法 用ELISA法筛查献血者血清抗- HTLV-Ⅰ/Ⅱ,初筛阳性者经ELISA法双孔复检,复检呈阳性的标本再用蛋白印迹试验(Western Blot)进行确认。 结果 11 000名海南省无偿献血者血清中抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ没有出现确定的阳性结果。 结论 应根据各地 HTLV-Ⅰ/Ⅱ流行率的高低来决定献血者进行抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ的筛选范围。
【关键词】 抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ ELISA 蛋白印迹试验
人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-Ⅰ和Ⅱ)既有嗜淋巴性,又有致瘤性,称为C型逆转录病毒,HTLV-I可导致<5%的感染者出现成人T细胞白血病(ATL)或淋巴瘤,还可导致热带痉挛性下肢瘫痪/ HTLV-Ⅰ相关脊髓病(TSP/HAM)和HTLV-II可能也与TSP/HAM有关。据报道,输血是传播HTLV-I/II的有效途径[1]。日本、美国、法国等国家已规定所有血制品都要检测抗-HTLV-I/II[2],中国目前尚未在献血者中进行抗-HTLV-I/II的检测。在此笔者调查了海南省11 000名无偿献血者血清抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ,以了解本地区HTLV-I/II的感染情况,提供本地区流行病学资料。
1 材料和方法
1.1 血清样本来源 海南省自愿无偿低危献血者11 000人,其中男性6 897人,女性4 103人,年龄18~50岁。
1.2 试剂与仪器 HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗体ELISA检测试剂盒,96人份,批号:20020603,北京万泰公司提供。TECAN GENESIS Rsp150全自动加样系统,Multiskan Ascent酶标仪。
1.3 方法及结果判定 对11 000份无偿献血标本用ELISA试剂进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗体的检测,初检阳性的标本进行双孔复检,复检阳性的标本送北京万泰公司采用Western Blot方法进行确认。
1.3.1 ELISA方法 按公式计算出Cut-off值,Cut-off值=N(阴性平均值)+0.18,样本OD值与Cut-off值的比值(S/CO)≥1.0为阳性,<1.0为阴性。
1.3.2 蛋白印迹试验(Western Blot) 没有出现特异性条带的判为HTLV-I/II阴性;出现特异性条带但不符合HTLV-I/II阳性的条件判为不确切结果;2条ENV带(gp46和p21)同时出现,gag带出现P24条带强度等于P19,为HTLV-I/II型阳性。
2 结果
2.1 11 000份标本经ELISA检测有3份标本初复检均呈阳性,阳性率为0.03%。
2.2 3份阳性标本由万泰公司用Western Blot 方法进行确认,有2份标本没有出现特异性条带,判为阴性,有1份标本有特异性条带,但不符合阳性的条件,判为不确定结果。
3 讨论
海南省自1988年建省以来,大量外省籍人士进入海南工作和定居,海南省的无偿献血人群中,约有60%~70%是从全国各省市来海南定居、工作或旅游的。这次调查的11 000份海南省自愿低危无偿献血者血清中抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ没有出现确认的阳性结果,究其原因可能是本地区HTLV-I/II感染率极低;或是这次调查的本地籍献血者样本量不够大而产生误差;或是因为HTLV-I/II感染的特点是在流行区呈大范围或小范围的集聚性[1],而献血者来自全国各地,不是一个固定的群体,因此没有发现HTLV- I/II确切感染者。
HTLV-I/II主要流行地区有日本南部、加勒比海地区和非洲中部地区,据报道我国的献血者中HTLV-Ⅰ/Ⅱ的感染率为0.03%,且在福建沿海地区有小范围的流行[1]。据估计,血清HTLV-I抗体阳性者,在其一生中发展为成人T细胞白血病(ALT)的可能性为1%~2%。对于输血传播HTLV-I所致的ALT[1],目前还没有明确的病例报告,但对于TSP/HAM,已有报道证明输血是发展成TSP/HAM的危险因子,HTLV-I感染与TSP/HAM的相关性也已被证实[2]。但因HTLV-Ⅰ/Ⅱ在世界范围内的分布差异极大,因此可根据各地 HTLV-Ⅰ/Ⅱ流行率的高低来决定是否在全国范围或某些地区的献血者当中进行抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ的筛选。
【参考文献】
[1] 杨成民.基础输血学[M].中国科学技术出版社,2001,431~435.
[2] 曹凤.输血医学中的人类嗜T淋巴细胞病毒I型和II型[J].中国输血杂志,1997,10(4):210~213.
作者单位:海南省血液中心,海南 海口 570311.