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【摘要】 目的 比较菌丛聚集和线索细胞检查用于细菌性阴道病（BV）诊断的应用价值。 方法 采用CTB妇科白带快速染色镜检，选取细菌性评分≥7分和5～6分的标本,分别查找线索细胞和菌丛聚集, 比较两者在BV诊断中是否存在显著性差异，进行两者优缺点比较。 结果 在评分≥7分和5～6分的标本中,线索细胞和菌丛聚集诊断BV的阳性率存在显著性差异(P<0.05) ；线索细胞的敏感性为80％，特异性为95％，阳性预测值为97.3％，阴性预测值为34.2％；菌丛聚集的敏感性为91．8％，特异性为60％，阳性预测值为84.9％，阴性预测值为75%。 结论 菌丛聚集和线索细胞存在同等应用价值,作为单独的诊断性实验方法, 存在局限性; 建议推荐使用染色评分法代替查找线索细胞法和菌丛聚集法，以提高检查BV的准确性。
【关键词】 线索细胞 细菌性阴道病 菌丛聚集
Value of cule cells and colony aggregation in diagnosis of bacterial vaginosis.
HAUNG Yun-ping, ZHONG Xiao-ting, NIE Xiao-hui, et al.
(Zhanjiang Municipal People’sHospital, Zhanjiang 524037, Guangdong, P. R.China)
Abstract：Objective To discuss value of colony aggregation and cule cell in diagnosis of bacterial vaginosis (BV). Methods Samples were obtained from inpatients of gynecological departments and CTB methods was used.The value of clue cells and colony aggregation in diagnosis of BV was compared. Results There no was significant differences in the value of diagnosis of BV betweent cule cells and colony aggregation were obsreved The sensitivity, specificity, positive predicative value and negative value of clue cell were 80%, 95% , 97.3% and 34.2%; And that of colony aggregation were 91.8%, 60%, 84.9% and 75%. Conclusion The value of colony aggregation and clue cell is the same but theirvalue is limited in individual diagnosis. Thus it is suggested that staining marks be used instead of clue cell and colony aggregation so as to enhance the accuracy of diagnosos of BV.
Key words： Clue cell ; Bacterial vaginosis ; Colony aggregation
细菌性阴道病(简称BV) 是妇科门诊的三大常见感染之一，其门诊阳性检出率高达19% ～30%［1,2］。由于目前国内尚无诊断BV的检验标准，各个实验室诊断水平也参差不齐，《全国临床检验操作规程》以查找线索细胞为诊断BV的重要依据［3］。在日常检查BV患者标本中，菌丛聚集与线索细胞较常见，且可两者出现于同一患者样本涂片中，而线索细胞已被认定为BV的实验诊断标志之一，菌丛聚集现象是否与线索细胞形成有关，与BV的相关性如何，则未见相关报道。以妇科BV患者为研究对象，以染色计分法为标准，将患者检查中出现线索细胞和菌丛聚集两种标志进行比较，以探讨两种标志在诊断BV中的应用价值。
1 材料与方法
1．1 患者 选取我院2007年1～3月妇科门诊疑为BV患者190例，其中染色评分≥7分135例,5～6分55例。患者年龄15～45岁，平均年龄35岁。
1．2 试剂与设备 妇科白带涂片多功能（CTB）染色液(湖南株洲康乐检测试剂有限公司产品),显微镜。
1. 3 样本采集和处理 用无菌棉拭子1支自阴道后穹隆取分泌物，置于加有0.5～1ml无菌生理盐水中进行妇科白带涂片染色镜检。
1.4 染色镜检评分 染色涂片的评分标准［4］见表1，“-”为0个细菌数目/平均油镜视野；“1+”为<1；“ 2+”为1～5；“3+”为5～30；“4+”为>30。评分总值=乳酸杆菌分值+加德纳氏菌和类加氏菌分值+动弯杆菌分值。
表1 BV染色法评分标准（略）
注：计分法评分总值0～3分为正常态；4～6分为过渡态；≥ 7分为BV。
1.5 线索细胞和菌丛聚集的判断 线索细胞即涂片中阴道鳞状上皮细胞粘附大量加德纳菌及其他小杆菌而形成的巨大细胞团，上皮细胞表面粗糙，有斑点和大量细小颗粒边缘呈锯齿状，细胞趋向溶解或已溶解，模糊不清者，见图1～2。菌丛聚集为一定数量（≥30）的加德纳菌及其他小杆菌聚集而成，见图3～4。
1．6 统计学方法 采用配对设计χ2检验；线索细胞和菌丛聚集的测试结果分别与以染色评分法为标准比较。
图1 线索细胞（略）
图2 线索细胞（略）
图3 大菌丛聚集（略）
图4 小菌丛聚集（略）
2 结果
2．1 菌丛聚集与线索细胞的检验结果比较 在染色法≥7分135份标本中，菌丛聚集与线索细胞均阳性的有104份；菌丛聚集阳性为124份，阳性率为91.8%；线索细胞阳性为108份，阳性率为80%。上述两种检测方法的检测结果经配对设计χ2检验，存在显著性差异（校正χ2=9.38，P<0.05）,即两种方法对BV的检出率不同，菌丛聚集的检出率较高。
2.2 于染色法5～6分55份标本中，二者共同检出阳性为2份；菌丛聚集阳性为22份，阳性率为40%；线索细胞阳性为3份，阳性率为5.5%。上述两种检测方法的检测结果经配对设计χ2检验，存在显著性差异（校正χ2=15.43，P<0.05）,即两种方法对BV过渡态的检出率不同，菌丛聚集的检出率较高。
2.3 菌丛聚集、 线索细胞检验结果分别与染色评分法结果比较 以评分为标准，则菌丛聚集诊断BV的敏感性为91.85% ，特异性为60%，阳性预测值为84.9% ，阴性预测值为75%，见表2；线索细胞诊断BV的敏感性为80% ，特异性为94.5%，阳性预测值为97.3% ，阴性预测值为34.2%，见表3。
表2 以评分法评价菌丛聚集的检验结果（略）
3 讨论
目前, BV 有多种实验诊断方法: 如盐水湿片法找线索细胞，染色计分法、唾液酸酶测定等，其中染色法直接、快速、经济，但其对操作人员经验及对病原菌识别能力有一定的要求。对线索细胞和菌丛聚集与BV的关系进行相关研究有助于提高对BV及其检测方法优缺点的认识水平。
表3 以评分法评价线索细胞验的检验结果（略）
线索细胞是阴道鳞状上皮细胞黏附大量加德纳菌及其他短小杆菌后形成，生理盐水涂片于高倍镜下可见该细胞边缘呈锯齿状，细胞已有溶解，核模糊不清，其上覆盖有大量加德纳菌及厌氧菌，使其表面毛糙，出现斑点和大量的细小颗粒［3］。由于加德纳类杆菌属和厌氧菌大量增加从而抑制了常居乳酸杆菌的繁殖，使乳酸杆菌明显减少或消失，并分解氨基酸生成氨，使pH值升高，引起上皮细胞脱落，并大量粘附于上皮细胞周围形成线索细胞。线索细胞检查的敏感性较低，特异性高，线索细胞是BV的诊断标志之一，本结果其敏感性80.0%、特异性94.5%与文献报导［5］相符。认为线索细胞作为诊断标准较为模糊,其敏感性低,不适合作为BV的筛选方法，但特异性高可作为BV确诊方法。
本资料的图片显示菌丛聚集其机制与线索细胞相似，单个菌丛聚集和单个线索细胞都是由加德纳类杆菌属和厌氧菌及其它革兰阴性杆菌粘附而成，其形态相似，区别在于菌丛聚集缺乏上皮细胞；菌丛聚集有可能由于电荷吸附作用而导致细菌聚集成堆，或者是由于线索细胞破碎后，不能及时散开，仍聚集在一起而成。本文结果显示两方法的敏感性都低于染色评分法，评分法阳性的部分BV患者均无线索细胞和菌丛聚集。菌丛聚集和线索细胞一样需要达到一定的数量方可诊断为BV，若以单个存在为依据，可导至假阳性。因此建议，单个菌丛聚集类似于单个线索细胞，将菌丛聚集等同线索细胞来计算比例，可提高线索细胞检测BV的敏感性。
因此，认为菌丛聚集和线索细胞仅是阴道中菌群异常增长过程中的一个特征性标志，两者作为单独的诊断性实验方法, 存在局限性。与染色评分法相比较，评分法将阴道菌群分为正常态、过渡态和BV态，很直观反映患者所处状态，更为客观、综合、经济，且可更准确观察念珠菌、滴虫及淋球菌等常规项目，可操作性强。建议推荐使用染色评分法代替查找线索细胞法和菌丛聚集法，以提高检查BV的准确性。
【参考文献】
［1］ 黄云平,何艳,洪流,等.粤西地区气候与妇科三大常见感染相关性探讨［J］.中国感染控制杂志,2003,2(4):275,321.
［2］ Mead PB.Epidenmiology of bacterial vaginosis［J］.Am J Obstet Gynecol,1993,169:446～449.
［3］ 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程［M］.第3版. 南京：东南大学出版社，2006,324.
［4］ 蔡文城.实用临床微生物诊断学［M］.南京：东南大学出版社，1998,589～592.
［5］ 杨年胜.线索细胞法诊断细菌性阴道病［J］.实用医学进修杂志,2006，34（3）:183.
作者单位：湛江市中心人民医院，广东 湛江 524037； 英德市人民医院，广东 清远 513000.