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【摘要】 目的 了解海南省临床实验室检测乙肝标志物的质量控制水平，以提高检测质量控制能力。方法 在2003～2006年间，发放参比样品到各临床实验室进行乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)进行ELISA检测，通过计算灵敏度、特异性、阴性预告值、阳性预告值、符合率等指标对实验室进行评价。结果 乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原和乙肝e抗体的灵敏度、特异性、阴性预告值、阳性预告值和符合率除乙肝e抗体灵敏度为80.7%外，其他皆达90%以上，但乙肝核心抗体：83.4%（1 484/1 779）、特异性86.2%（249/289）、阴性预告值45.8%（249/544）、阳性预告值97.4%（1 484/1 524）、符合率83.8%（1 733/2 068）。结论 全省检测乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体的各项评价指标均达优良以上水平，检测质量可以满足临床需求；检测乙肝核心抗体的各项评价指标均不理想，应加强对该项目检测质量方面的监控。
【关键词】 海南省；临床实验室；乙肝标志物； 评价
Clinical laboratory assessment of levels of five HBV markers in Hainan Province.
HE Dun-xiong, FU Sheng-miao.
(Hainan Provincial People’s Hospital, Haikou 570311, Hainan, P. R. China)
Abstract：Objective To evaluate the test level of HBV markers in clinical laboratories in Hainan Province for intensification of quality control. Methods The levels of HBsAg, HBsAb, HBeAg, HBeAb and HBcAb of known HBV samples from various clinical laboratories in Hainan Province were tested. The sensitivity, specificity, negative predictive value，positive predictive value and coincidence of the results of various laboratories were capmared. Results The sensitivity, specificity, negative predictive value，positive predictive value and coincidence of HBsAg were 93.7%(1009/1077), 99.2%(974/982), 93.5％（974/1042）98.2%(1009/1027) and 96.3%(1983/2059) respectively; that of HBsAb were 95.5%(745/780), 96.6%(1244/1288), 97.3％（1244/1279）94.4%(745/789) and 96.2%(1989/2068) respectively; that of HBeAg were 91.3%(264/289), 98.9%(1759/1779), 98.6％（1759/1784）, 92.9%(264/284) and 97.8%(2023/2068) respectively; that of HBeAb were 80.7%(432/535), 97.3%(1491/1533), 93.5％（1491/1594）91.1%(432/474) and 92.9%(1923/2068) respectively and that of HBcAb were 83.4%(1484/1779), 86.2%(249/289), 45.8％（249/544），97.4%(1484/1524) and 83.8%(1733/2068) respectively. Conclusion The quality of test of HBsAg, HBsAb, HBeAg and HBeAb in clinical laboratories of this province is excellent and can meet the need of clinical purpose. But the test level of HBcAb needs to be enhanced.
Key words：Hainan Province；Clinical laboratory； HBV marker； Evaluation
乙肝标志物五项检测是目前海南省临床实验室开展诊断乙型肝炎（乙肝）的常规方法，是临床诊断和治疗乙肝的依据，乙肝标志物五项检测的准确性直接影响乙肝疾病的诊断和疗效评价，因此，确保检测乙肝标志物五项的准确性，加强质量控制，是全省各临床实验室必须达到的要求。现从灵敏度、特异性、阴性预告值、阳性预告值、符合率等指标评价全省临床实验室检测情况，以了解全省实际检测水平，为加强质量控制提供依据。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 样本
乙肝表面抗原阳性样本1 077个、阴性样本982个；乙肝表面抗体阳性样本780个、阴性样本1 288个、乙肝e抗原阳性样本289个、阴性样本1 779个、乙肝e抗体阳性样本535个、阴性样本1 533个、乙肝核心抗体阳性样本1 779个、阴性样本289个，以上样本和预期结果均由卫生部临床检验中心提供。
1．1．2 检测试剂
由各实验室自行购买使用通过国家审批的有效期内检测试剂。
1．2 方法
1．2．1 检测方法
酶联免疫吸附试验（ELISA）。
1．2．2 组织方法
2003～2006年间每年3次把样本发放到各实验室检测，然后收集检测结果统计。参加的实验室为全省二级以上医院检验科共43家。
1．2．3 统计公式
灵敏度=［TP/（TP+FN）］×100%；
特异性=［TN/（TN+FP）］×100%；
阳性预告值=［TP/（TP+FP）］×100%；
阴性预告值=［TN/（TN+FN）］×100%；
符合率=［（TP+TN）/（TP+FP+TN+FN）］×100%；
注：TP真阳性，FP假阳性，TN真阴性，FN假阴性。
2 结果
2.1 海南省各临床检验实验室对阳性和阴性参与样本的检测结果,见表1。表1 乙肝标志物五项阳性标本与阴性标本检测结果（略）
2.2 对各项目的ELISA检测结果统计见表2。表2 评价指标统计表项目灵敏度（略）
3 讨论
3.1 目前，海南省临床实验室检测乙肝标志物五项（乙肝两对半）的主要方法为酶联免疫吸附试验（ELISA），对方法的灵敏度、特异性和符合率的评价可以反映出实验室选用测定方法的正确性和临床应用价值，阳性预告值和阴性预告值可以用于方法准确度的评价，反映了真阳性和真阴性检出的可靠性，因此，对这些指标的评价可以反映出全省临床实验室检测乙肝标志物的实际水平。
3.2 从表1和表2的统计结果可知，全省实验室检测乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体5项评价指标（除乙肝e抗体灵敏度不高外）均达较高水平，说明全省实验室检测这四个项目的灵敏度、特异性和准确性均达到质量要求,能保证临床诊断和疗效评价的要求；但乙肝e抗体检测的灵敏度及乙肝核心抗体的灵敏度、特异性、符合率和阴性预告值等指标均不是很好，这样在日常工作中，较低浓度乙肝e抗体阳性标本可能检测不出来，乙肝核心抗体检测可能会出现假阳性、假阴性和准确性不好等问题，应引起全省实验室的注意，加强质量方面的控制。
3.3 影响ELISA方法检测质量的主要因素
3.3.1 方法学对检测结果的影响
乙肝e抗体和乙肝核心抗体变异大，有文献报道乙肝核心抗体平均最佳变异系数为24.6%［1］。e抗体与核心抗体普遍存在着非特异性交叉反应，假阳性率可高达35.1%［2］。这些因素均被认为乙肝e抗体和乙肝核心抗体检测质量不好，质量较难控制的原因。
3.3.2 操作误差
终止反应后不同时间扫描对结果的影响；孵育温度不均衡对检验结果的影响，有文献报道水浴法效果最好［3］；稀释方式对检测结果的影响；“操作时差”对检测核心抗体结果的影响：随着样品与加入酶结合物间隔时间的延长，假阳性率逐渐增加。
3.3.3 判断标准差异对检测结果的影响
不同厂家试剂盒对标本处理要求的不同，酶标仪判读结果和目视判读结果的差异等。
3.3.4 内、外源物质的干扰，试剂的运输、保存及使用者素质、一步法检测HBsAg的“钩状效应”［3］等都影响到检测质量。因此要增加ELISA检测结果的可靠性，必须提高试剂盒的质量［4］并对检测过程进行严格的标准化。
【参考文献】
［1］张彦，邓文.广东省内常见乙肝检测ELISA试剂的抽样调查［J］.数理医药学杂志，1966，9（4）：352.
［2］赵祥胜，刘瑜.检测乙肝标志物抗HBe、抗HBc非特异性交叉反应原因分析［J］.华中医学杂志，2000，24（2）：110.
［3］许斌，朱虎定.ELISA检测HbsAg影响因素的探讨［J］.临床检验杂志，2000，18（4）：232.
［4］王露楠，邓巍，李金明.全国血站乙肝表面抗原测定室间质量评价结果分析［J］.华中医学杂志，2002，26（4）：231.
作者单位：海南省人民医院检验科，海南 海口 570311.