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【摘要】 目的 探讨男性不育患者精浆弹性蛋白酶（PMN-Elastase）水平及生化参数的关系，以了解生殖系感染程度、疗效观察及评判男性生育力。方法 用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测精浆PMN-Elastase，精浆果糖、中性α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶、精子顶体酶及锌的浓度采用生化方法检测。将PMN-Elastase检测结果分为正常组（未受感染）、隐性感染组、显性感染组。分析与之相应的精浆生化参数变化，进行对比分析。结果 279例不育男性，生殖系感染患者97例( PMN-Elastase>200ng/ml）占34.77%。精浆PMN-Elastase水平随生殖系感染严重程度而升高，而果糖、中性α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶、锌的水平则随之降低，呈负相关。结论 PMN-Elastase水平随生殖系感染严重程度而升高，精子生成的内环境受到影响，精浆生化参数发生改变，PMN-Elastase水平升高是反映生殖系感染的一项可靠指标。
【关键词】 精浆；弹性蛋白酶；生化参数；生殖系感染；男性不育
精浆弹性蛋白酶是检测男性生殖系感染的主要方法，特异性感染和非特异性感染均可影响精子的发生、精子的活力和精子运输，抑制附属性腺分泌，导致感染性男性不育；泌尿生殖系感染所引起的炎症性破坏和纤维性变是造成不育的主要原因［2］。本文通过检测PMN-Elastase水平及精浆生化参数分析，为男性因生殖系感染引起的不育疾病提供诊断和治疗依据。
1 资料与方法
1.1 资料
1.1.1 临床资料
279例标本均采用自2005年12月～2007年2月在我院男性科门诊就诊、主诉婚后或同居1年以上不避孕而未育男性患者（已排除因女方不育而来接受检查的生育能力评估完全正常的男性），年龄25～46岁，平均33岁。受检前禁欲3～7d，在特定实验室手淫法留取精液标本，置37℃水浴箱30min液化后（精液不液化或液化不全按40：1加入液化剂，再孵育5～30min至精液液化）；取一定量的精液按3 000g离心10min，吸取上层精浆作PMN-Elastase及生化检测。
1.1.2 检测仪器与试剂
仪器：BIO-RAD 550型酶标仪，722型光栅分光光度计。试剂：精浆PMN-Elastase检测试剂由美国 COSTAR公司提供，精浆生化试剂由江苏欣迪生物工程有限公司提供。正常参考值由试剂生产商实验室建立。
1.2 检测方法
1.2.1 精浆PMN-Elastase、生化检测
精浆PMN-Elastase用ELISA法检测，按试剂说明书操作。精浆生化检测项目有：果糖、中性α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶、精子顶体酶和锌。检测操作方法均按试剂说明书。如加入有液化剂的标本，检测结果按稀释倍数校正。正常参考值：PMN-Elastase<200ng/ml、果糖4.83～21.94mmol/L、中性α-葡糖苷酶35.1～87.1U/ml、酸性磷酸酶48.8～208.6U/ml、精子顶体酶>48uIU/ml、锌0.8～2.5mmol/L。
1.3 统计学分析
各组测得的值以x±s表示，采用SPSS统计学软件分析，均数比较采用t检验， P<0.05为差异有显著性。
2 结果
精浆检测分析结果，279例不育症男性精浆PMN-Elastase水平正常者182例(65.23%)，PMN-Elastase活性升高的感染组有97例，其中占不育症患者34.7%,隐性感染66例占23.66%，显性感染31例占11.11%，同时观察与之相应的精浆生化检测结果，显示生殖系感染时PMN-Elastase水平随感染的严重程度而上升，但精浆果糖、中性α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶及锌则随感染严重程度而降低，呈负相关。显性感染时PMN-Elastase水平与果糖、中性α-葡糖苷酶、酸性磷酸酶、精子顶体酶参数与正常组比较差异非常显著(P<0.01)，详见表1。表1 PMN-Elastase水平与生化参数相关性(略)注:*显性感染组与正常组比较,P<0.05。
3 讨论
3．1 男性生殖系感染与精浆PMN-Elastase水平的相关性
男性生殖系感染时，分叶粒细胞参与吞噬病原体等抗炎反应，并分泌大量PMN-Elastase至胞外，与其它氧化物（如活性氧、过氧化氢、氢氧根离子等）共同发挥局部抗炎效应。PMN-Elastase与随后分泌的α1-蛋白酶抑制剂结合，形成PMN-Elastase-蛋白酶抑制剂复合物，该复合物水平与PMN-Elastase释放量高度相关［1］。据《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》第三版报道： PMN-Elastase水平与精液中的白细胞呈现良好的相关性，当精液中白细胞>1×106/ml时， PMN-Elastase水平>1 000ng/ml，<1×106/ml时，亦有少量标本PMN-Elastase水平大于1 000ng/ml。PMN-Elastase可作为静止型生殖系感染的诊断及愈后监察指标，其可靠性得到WHO的认可。男性生殖系感染不但可引起睾丸炎、附睾炎、精囊炎、前列腺炎等疾病，还是男性不育的原因。从我们的检测结果与临床诊断来看， PMN-Elastase水平升高大多与沙眼衣原体、解脲支原体、疱疹病毒、白色念珠菌及包皮杆菌感染有关，但最常见的是沙眼衣原体和解脲支原体，占60%～70%，与文献报道相似［2］。前列腺炎一直是常见且令人困惑的疾病，急性感染期， PMN-Elastase水平可升高至2 000ng/ml以上，前列腺炎严重程度与精浆PMN-Elastase水平相关性密切。慢性前列腺炎PMN-Elastase水平升高大多在350～800ng/ml，个别大于1 000ng/ml，多为隐性感染。沙眼衣原体和解脲支原体与急性附睾炎及慢性前列腺炎有十分密切的关系，由于附属性腺的感染是男性不育的原因之一，因此认为沙眼衣原体、解脲支原体与男性不育有关，有报道在慢性前列腺炎患者的晨尿中有50%可分离出衣原体，在精液中有39%支原体培养阳性［2］。从我们的检测结果分析，生殖系感染时，精浆PMN-Elastase水平与正常者比较显著升高(P<0.01)，通过精浆PMN-Elastase水平测定，可监察临床对生殖系感染的治疗效果。
3.2 男性生殖系感染对精浆生化参数影响
男性生殖系感染时，有附属性腺分泌功能障碍者占60%，其中前列腺特征产物如锌、钙、镁、酸性磷酸酶等都可降低［2］。精液果糖由精囊腺分泌，是精子能量的主要来源，检测果糖可作为衡量精囊分泌功能的指标，如精囊腺感染严重，精浆果糖含量减少［2］。从我们的检测结果中可看出，精浆果糖与感染严重程度及精浆PMN-Elastase水平呈负相关。在检测中我们发现不液化或液化不全的标本其精浆果糖含量大多降低， PMN-Elastase水平大多升高，这可能与生殖感染有关。同时应注意精液液化后，应迅速分离精浆并冷冻保存或立即检测，否则果糖继续消耗致使检测结果偏低。精浆锌主要来自前列腺，是维持精子活力的重要因素，慢性前列腺炎患者，尤其是无生育力的慢性前列腺炎患者，锌明显降低，因此精液锌可作为前列腺功能的指标［3］。在我们检测的少精子症及无精子症的患者精液，锌含量明显增高，与文献报道一致［3］。本文检测的锌含量虽然随精浆PMN-Elastase水平升高而降低，但影响不大(P>0.05)。中性α-葡糖苷酶主要由附睾分泌，它和精子的成熟有关，中性α-葡糖苷酶是附睾的特异酶和标记酶，可作为附睾分泌功能的指标［3］。生殖系感染时，可影响附睾分泌的功能，使由附睾分泌的中性α-葡糖苷酶活性降低，而影响精子的成熟，因此，检测中性α-葡糖苷酶活性，结合精浆PMN-Elastase水平的检测，对男性不育有诊断意义。此外，阻塞性无精症患者精浆的中性α-葡糖苷酶活性降低、果糖含量正常，以此鉴别阻塞性无精症。从我们检测结果来看，生殖系显性感染时，其结果与正常相比明显降低(P<0.01)，精浆PMN-Elastase水平升高明显。
生殖系感染可导致男性不育，男性生殖系感染具有多部位性以及多病原微生物性，一种感染可由多种病原体引起，而一种病原体也可引起多种感染，临床往往难以鉴别诊断。在一些感染男性临床症状、体征并无特异，有相当一部分为亚临床过程，感染可持续迁延［2］。由于PMN-Elastase水平变化对生殖系感染程度有相关性，对指导用药、疗效观察具有重要参考意义。
【参考文献】
［1］Kohn FM,Frdm ann I.Oeda T,et al. Influence of urogenital infections on sperm runtions［J］. And roloy,1998,30(1):73.
［2］范医东，刘照旭，杨忠广.男性不育的诊断与治疗［M］.济南：山东科学技术出版社，2000,152～161.
［3］黄宇烽，许瑞吉.男科诊断学［M］.上海：第二军医大学出版社，1999,205～219.
［4］白广俊，朱积川.生殖道感染与男性不育［J］.中华男科学杂志，2001,7(2)：105～108.
作者单位：深圳市中医院检验科，广东 深圳 518033.