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【摘要】 目的 了解深圳市广州管圆线虫中间宿主褐云玛瑙螺的分布、生态环境与感染情况。 方法 收集深圳12个不同生态环境褐的云玛瑙螺，以匀浆沉淀镜检法检查感染率与感染度。 结果 褐云玛瑙螺在深圳广泛分布，12个调查点中10个发现褐云玛瑙螺的存在，其中4个点标本有广州管圆线虫幼虫感染，平均感染率为31%，螺重≥55g的个体感染度显著性的高于<55g个体（P<0.01），褐云玛瑙螺主要分布在灌木植被、土壤腐殖质含量高的花园和草地，常在夜间活动，以雨后更为频繁。 结论 褐云玛瑙螺在深圳市广泛分布且高度感染广州管圆线虫幼虫，为深圳存在散发广州管圆线虫病人的主要原因。
【关键词】 广州管圆线虫 褐云玛瑙螺 流行病学调查
广州管圆线虫（Angiostrongylus cantonesis）为人畜共患自然疫源性寄生虫病，在鼠和淡水螺间自然构成生活史, 淡水鱼为转续宿主，人因生食的淡水螺和鱼、蛙、虾、蟹等转续宿主而感染。感染后虫体移行寄生于中区神经系统，引起嗜酸粒细胞(Eosinophilia)增多性脑膜脑炎，近年来，随着人民生活水平的提高和饮食习惯的改变，广州管圆线虫病已发展成为一种不容忽视的食源性寄生虫病［1～3］。
2006年6月24日北京爆发了因生食或半生食福寿螺（Bellamya aeruginosa）的而导致的群体广州管圆线虫病感染事件。在此期间，广东省江门市、深圳市及广州市也相继发现了数例广州管圆线虫的临床诊断病例。为此，2006年8月我们抽查了市场上出售的258份淡水螺，其中福寿螺（Bellamya aeruginosa）86份、褐云玛瑙螺(Achatina fulica)45份，检查发现有广州管圆线虫感染期幼虫，依此为线索开展对广州管圆线虫疫源地、中间宿主种类及其感染情况的调查分析。
1 材料与方法
1.1 褐云玛瑙螺的收集 以不同生态环境（田、沟、渠、塘等）为线索，确定调查点的野外现场市内生活小区花园，公共花园灌木场所、餐饮场等所，捕捉褐云玛瑙螺。
1.2 动物模型 SD大鼠购自南方医科大学实验动物中心，每只大鼠感染广州管圆线虫幼虫50条，感染35d后解剖检查成虫。
1.3 螺类检查 螺去壳，肉切碎，加入5倍体积的人工消化液（浓盐酸7ml，胃蛋白酶1.5g，加水至1 000ml），37℃消化5h后纱布过滤除去粗渣，滤液于4 000r/min离心5min，弃上清，用生理盐水重悬沉淀，再次4 000r/min离心5min，弃上清，沉淀存4℃保存待检。
1.4 幼虫镜检 沉渣置平皿中，解剖镜下分离并计数广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫并吸出，涂于载玻片上进一步鉴定其形态。计算各类样本广州管圆线虫三期幼虫检出率和感染强度。
1．5 广州管圆线虫室内生活史循环 将分离的广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫。取50条幼虫灌胃感染SD大鼠，6w后，收集粪便，检查收集的第Ⅰ期幼虫，感染实验室滋养的阴性褐云玛瑙螺，感染2w后解剖观察。
1．6 统计与分析 采用SPSS（11.0）软件统计分析螺 、鼠的感染度、感染率。
2 结果
2.1 广州管圆线虫中间宿主分布 本次调查在深圳西北部的龙岗区的坪地和坑梓没有发现褐云玛瑙螺，在宝安区的沙景、公明、龙华和福永，南山区的后海花园、深圳大学校园，福田区的益田村，罗湖区的罗湖园林公园、罗湖沙湾、深圳植物研究所花园、盐田区的和平公园和龙岗区葵涌坝光菜地发现有褐云玛瑙螺的分布，其中南山区的后海花园、深圳大学校园，福田区的益田村，罗湖区的罗湖园林公园的螺有广州管圆线虫感染。
2．2 褐云玛瑙螺核查 对12个点褐云玛瑙螺感染广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫的情况进行检查和比较，结果见图1、表1。
图1 从现场调查点采集、解剖分离广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫(100×)（略）
A:为褐云玛瑙螺; B:为广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫
Fig 1 Achatina fulica collected from Shenzhen and examined for Angiostrongylus larvae(100×)
A was Achatina fulica,B was Angiostrongylus larvae under miroscope
表1 深圳市不同地点褐云玛瑙螺广州管圆线虫感染情况（略）
Table 1 Infection rate of A. fulica with Angiostrongylus larvae in different district of ShenZhen
2.3 螺的大小与感染度 对收集的褐云玛瑙螺进行了螺重与感染度的相关性检测，感染度比较发现螺体重≥50g组显著高于<50g组（P<0.01），两组螺平均每只螺的感染度分别为154条和57条，但两组的感染率分别为33.33%和29.50%,差别无显著性意义，因此广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫感染度与螺体的重量或成正比。
2.4 实验室广州管圆线虫生活史循环 在室内将分离的广州管圆线虫感染期第Ⅲ幼虫感染大鼠，35d后检查大鼠粪便中的第Ⅰ期幼虫,解剖大鼠在肺部检查广州管圆线虫成虫,大鼠的感染率为100%（10只/10只），成虫回收率为62%（31条/50条）。另用大鼠粪便中的第Ⅰ幼虫感染实验室阴性的褐云玛瑙螺，感染2周后在螺体内检查广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫，螺的感染率为48%（29只/60只），感染螺的死亡率为18%，其死亡率显著性的高于阴性对照组。由于死亡率较高影响了螺的感染率。
3 讨论
褐云玛瑙螺为广州管圆线虫主要螺类宿主［4,5］。深圳的气候适合褐云玛瑙螺种群繁殖，是褐云玛瑙螺适生区，在深圳仅有不超过30d的越冬期，当地的植被的种类及其分布也满足了褐云玛瑙螺的孳生，虽然本次调查在深圳西北部的坪地和坑梓没有发现褐云玛瑙螺，可能是由于调查时前一段时间没有下雨，土壤干燥，不利于褐云玛瑙螺的活动所致。
周晓农等研究发现不同的淡水螺与广州管圆线虫的相容性有显著性差异，福寿螺的显著性的高于其他淡水螺，同一在不同的温度条件下广州管圆线虫幼虫的发育也存在明显差异［6］在我们目前仅调查了陆生的褐云玛瑙螺，其他淡水螺类的感染情况还有待进一步研究。
褐云玛瑙螺孳生在小区的花园，夜间在草地活动摄食，有时在花园的坐椅上发现褐云玛瑙螺，因而增加了感染人类的途径，一些新的感染途径还需进行调查和实验室研究。
【参考文献】
［1］ Carlos Graeff-teixeira. Expansion of Achatina fulica in Brazil and potential increased risk for angiostrongyliasis［J］. Transactions of the Royal Society of Tropical medicine and hyginene, 2007,101:743～744.
［2］ Cheng YZ, Xu LS, Chen BJ, et al. Survey on the current status of important human parasitic infections in Fujian province［J］. Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji Sheng Chong Bing Za Zhi, 2005,30(5):283～287.
［3］ Asato R, Taira K, Nakamura M, et al. Changing epidemiology of Angiostrongyliasis cantonensis in Okinawa prefecture, Japan［J］. Jpn J Infect Dis, 2004, 57(4):184～186.
［4］ Lin JX, Jie HY, Li LS.An inspiration from the outbreaks of angiostrongyliasis cantonensis［J］. Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji Sheng Chong Bing Za Zhi, 2005,30(23):341～343.
［5］ Xue DY, Ruan YZ, Lin BC,et al. Epidemiological investigation on an outbreak of angiostrongyliasis cantonensis in Wenzhou［J］. Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji Sheng Chong Bing Za Zhi, 2000;18(3):176～178.
［6］ 吕三，张仪，周晓农,等.三种淡水螺与广州管圆线虫相容性的实验研究［J］.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2006，24（4）：326～328.
作者单位：深圳市疾病预防控制中心，广东 深圳 518020; 深圳市食品药品监督管理局,广东 深圳 518020