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横纹肌染色多选用Mallory磷钨酸苏木素染色法，多用于横纹肌肉瘤的诊断。横纹肌肉瘤的组织学形态变化多样，与许多未分化的间叶性肿瘤难以鉴别，如做磷钨酸苏木染色，在瘤细胞质内发现有蓝色的横纹，则可证明肿瘤来源于横纹肌。
1 材料与方法
1.1 材料及试剂配置
1.1.1 原始染液 磷钨酸苏木素液:苏木素0.1g、蒸馏水100ml、磷钨酸2.0g。A液取一烧杯盛蒸馏水30ml，加入苏木素，稍加温使苏木素完全溶解;B液再取另一烧杯盛余下的蒸馏水70ml，加入磷钨酸使其溶解;待苏木素液冷却后与磷钨酸液混合，置于光亮处数周至数月待成熟后使用。
1.1.2 改良染液 在原料的基础上，再准备红色氧化汞0.1g，同样的方法，将A液倒入B液，加热煮沸后离开热源;再加入红色氧化汞（缓缓加入，以免液体溢出）摇匀，用冰水冷却，冷却后过滤待用。
1.1.3 其他试剂准备 原始染色还需:（1）酸化高锰酸钾液:甲液为0.5%高锰酸钾水溶液，乙液为0.5%硫酸水溶液，在临用前甲乙等份混合后滴在玻片组织上;（2）2%草酸水溶液;（3）0.5%碘酒精液;（4）5%硫代硫酸钠液。
改良染色除上述还需再准备0.25%高锰酸钾水溶液及4%铁明矾水溶液。
1.2 染色方法 如表1所示。
表1 染色方法（略）
2 流水稍冲洗，并进行除汞处理
（a）0.5%碘酒精作用10min;（b）稍水洗;（c）5%硫代硫酸钠脱碘5min;（d）流水冲洗10min。 4%铁明矾水溶液媒染5～10min后稍水洗3 酸化高锰酸钾液作用5min 0.25%高锰酸钾水溶液氧化5～10min 4 稍水洗5 2%草酸液漂白1～3min 2%草酸水溶液漂白至无色即可，约30s～1min 6 流水冲洗5min，蒸馏水洗1次 流水冲洗1min，再用蒸馏水洗1次7 入磷钨酸苏木素液染24～48h 入改良磷钨酸苏木素染液15～30min 8 取出后直接用95%酒精迅速洗去多余染液9 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固2 结果（1）横纹肌纤维、纤维素、胞核等呈蓝色，胶原纤维、网状纤维、软骨基质呈棕红色，弹力纤维呈紫色。（2）横纹肌呈紫蓝色，纤维结缔组织呈玫瑰红色。
3 讨论
自然成熟的磷钨酸苏木素液一般可保存2～3年，其成熟过程较长，需在光亮处数周至数月，待其成熟后保存于棕色小口砂塞瓶，并在室温下暗处放存，较烦琐，较浪费时间。而改良后利用氧化剂———红色氧化汞促使染料快速成熟，使原来需要数周或数月才能成熟的染料变成现配现用;用媒染剂明矾促进染料与组织结合而快速着色，且将染色时间由原来24～48h缩短为15～30min，时间缩短、效率加快。经过反复长时间的比较使用，改良染液性能稳定，染色效果也较原始染液好，色彩鲜艳，对比明显，特别是横纹肌的横纹显示清楚、明确，更有利于病理诊断的正确性。
4 注意事项
因为加少量氧化剂的改良磷钨酸苏木素染液在一段时间使用后，即:（1）慢慢失效，横纹的蓝色深度不足，可能是磷钨酸苏木素液过度氧化的结果;（2）有少量的氧化膜产生，在使用前过滤，染色效果未曾改变。使用时间应按染片的数量来定，一般为4～6个月。
作者单位:310013浙江医院病理科