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最近，在普查中发现巨淀粉酶（Macroamylase，M-AMS）1例。对其血清用不同浓度的PEG-6000处理后，发现与急性胰腺炎阳性对照和正常人阴性对照比较有明显不同，现报告如下。
1 临床资料
患者，女，63岁，因眩晕、颈椎病入院。近3年来经常便秘，3～4天1次，无其他腹部不适。无特殊嗜好，正常饮食，不嗜烟酒，不嗜辛辣，否认高血压病、糖尿病、冠心病等病史，否认肝炎、伤寒、结核等传染病史，否认重大创伤及手术史，否认食物及药物过敏史，否认有疫水接触史，否认有家族遗传病史。以前未发现淀粉酶（AMS）升高。
入院查体:一般情况尚好，身高150cm，体重56kg，T36.2℃，R16次/min，BP115/70mmHg，发育良好，全身未触及肿大淋巴结，咽部略红，扁桃体不大，腮腺管口不红肿，心、肺（-），无腹部阳性体征，肝胆脾胰双肾B超未见异常。
实验室常规检查:血AMS579.0u/L，住院2周内血AMS持续在579.0～709.0u/L之间，尿AMS46.0～57.0u/L，唾液AMS314～350.0u/L，血胰脂肪酶31.0u/L（正常23～300u/L），尿胰蛋白酶原Ⅱ阴性，淀粉酶清除率/肌酐清除率 ［1］ 为0.13%（正常参考值约为1.4%～4.0%）。PEG-6000鉴别检查 ［2，3］ 淀粉酶抑制率阳性（24%PEG-6000沉淀血AMS抑制率为88%，正常分子量淀粉酶抑制率在50%以下），血白细胞正常（白细胞总数7.34×10 9 /L，中性粒细胞48.9%，淋巴细胞28.4%，单核细胞7.10%，酸性粒细胞14.0%，嗜碱性粒细胞1.6%），免疫球蛋白均正常（IgG11.1g/L，IgA1.88g/L，IgM2.14g/L），EB病毒检测提示曾经感染（抗EB壳抗原阳性，抗EB核抗原阳性，抗EB早期抗原阴性，P22阳性）。
2 实验室检查
用不用浓度的PEG-6000处理血清，观察与淀粉酶有关的蛋白质。以pH7.0PBS做空白对照;以急性胰腺炎血AMS1923u/L做阳性对照;以正常人血AMS39u/L做阴性对照，处理后的血清做生化AMS检测和SDS-AGE电泳及碘—淀粉显色。
2.1 生化检测AMS 用不同浓度的PEG-6000处理后生化检测AMS活性（底物为麦芽糖七苷）与PBS对照的差值算出被抑制率，见表1。
表1 不同PEG-6000浓度处理后AMS活性的被抑制率 （略）
2.2 SDS-AGE电泳 用不同浓度PEG-6000处理，沉淀蛋白后上清液电泳，pH7.0，60Vh，15min，取出加0.1%可溶性淀粉溶液覆盖，37℃，30min，1.0%碘液覆盖5min显色，有AMS活性为无色区域，无活性区为淡紫色背景。M-AMS血清经3%PEG-6000处理的上清液电泳，在相当于球蛋白的区域失去无色区，25%PEG-6000处理沉淀的M-AMS血清，相当于白蛋白的区域失去无色区，而在原点阴极端产生一大块特清的无色区，同样处理沉淀的PBS对照血清，从原点至相当于球蛋白和白蛋白的整个区域，有一连续的无色区。阴性对照和阳性对照与空白对照相似，只是3%PEG-6000处理的阴性对照血清和25%PEG-6000处理的阳性对照血清在原点阴极端另有一特清无色区。M-AMS在原点处的特清无色区，置4℃24h后消失。
3 讨论
M-AMS，正常人中检出率为1%，高AMS血症中检出率可达10% ［4］ ，可能是其不引起明显的临床症状而被忽略，国内鲜有报道，本实验室检出率约为1/110000。M- AMS诊断并不困难，但其发生原因至今仍不能确定。通常认为M-AMS是淀粉酶（分子量4500）与免疫球蛋白主要是IgA和IgG结合形成的大分子，以至于不能通过肾小球使血AMS持续高值，而尿AMS正常。
据文献报道 ［5］ ，用不同浓度的PEG-6000可以沉淀不同分子量的蛋白质，随PEG-6000浓度减少，沉淀的蛋白质分子量变大，反之亦然。>25%（W/V）PEG-6000可沉淀白蛋白，3%为IgM，8%为IgG，12%为IgA，通过实验观察，血清用25%PEG-6000处理，沉淀蛋白后，上清液生化检测AMS活性被抑制，M-AMS与阳、阴性对照相比，有明显不同，提示M-AMS主要是与白蛋白结合形成的大分子，且电泳后AMS的活性区域，用PEG-6000沉淀白蛋白后，而随之消失的一致性，也验证了上述观点。PEG-6000沉淀蛋白质后上清液电泳，出现在原点的大块特清区，显示AMS的强劲活力，其形成可能是与AMS结合的蛋白质被沉淀后，AMS相互聚合成更大的分子，以至于不能通过琼脂糖凝胶的分子筛而集合在原点部位。由此看来，正常阴性血AMS是以与球蛋白结合为主，急性胰腺炎和M-AMS是以与白蛋白结合为主，但结合的量有所不同。提示AMS的代谢途径可能是小分子AMS从肾脏排出，另有部分通过与蛋白质的结合而代谢。
有文献报道了多种脏器组织的AMS活性 ［6］ ，由于本例血AMS持续在579.0～709.0u/L水平，而不像急性胰腺炎短期内可迅速升高至1000.0u/L以上，或正常人群参考值在49.0u/L以下，而且25%PEG-6000处理后，淀粉酶活性被抑制率在M-AMS和阳、阳性对照之间有明显的不同，可能为血中AMS来源不同。提示AMS活性持续升高且维持在某一个水平，预示了某个器官的活动情况。
参考文献
1 中华医学会糖尿病学会.淀粉酶清除率（Cam）/肌酐清除率（Cer）比值.www.cds.org.cn，2002.
2 张秀明，李健斋，魏明竟，等.现代临床生化检验学.北京:人民军医出版社，2001，1324-1334.
3 Gillett MG，Gunneberg A，Godie DJ.Determination of macroamylasemia by polyethglene glycol（PEG）precipiation requires correct PEG concen-tration.Clin Chem，1995，41（6）:956-957.
4 Hortin GL，Summerfield AL，Wilhite TR，et al.Detection of autoantibod-ies to amylase by ELISA:Comparison of detection of macroamylase and free autoantibody.Clin Chem，1994，40（12）:2254-2259.
5 武建国.实用临床免疫学检验.南京:江苏科学技术出版社，1989，7:218-219.
6 于嘉屏，金家文，许绍辉，等.部分正常人体组织淀粉酶及其同工酶含量的测定.临床检验杂志，1999，17（4）:105-107.
（编辑建 伟）
作者单位:210029江苏省中医院检验科（△ 通讯作者* 心内科）
江苏大学医学技术学院检验系2000级检验班