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【摘要】 目的 确定芩菊清解胶囊的最佳提取工艺。方法 采用正交实验法，以黄芩苷含量为指标，以水提醇沉为提取精制方法，考察各影响因素。结果 加20倍的水量，煎煮2次，每次各1.5h，合并滤液，并浓缩至比重为1.0g/ml，加95%的乙醇，沉淀18h。结论 该工艺稳定可行。
【关键词】 芩菊清解胶囊；正交实验；水提醇沉；黄芩苷
Study on extraction processes for Qinju capsules
YAO Wei-wei,DONG Jie.Nanjing University of TCM,Nanjing 210029,China
【Abstract】 Objective To establish the optimal extraction technology for Qinju capsules.Methods The content of baicalin was observed by method for orthogonal test and the decoction and alcohol sedimentation as an extraction and purification technology.Results The best extraction condition was adding twenty times amount of water and boiling two times，one and half an hour per time，then merging the extract solution and condensing to 1.0g/ml.The alcohol concentration for precipitation was 95%，the time for precipitation was 18 hour.Conclusion This extraction technology is feasible.
【Key words】 Qinju capsules;orthogonal test;decoction and alcohol sedimentation;baicalin
芩菊清解胶囊系由我校名老中医经验方研制的中药6类新药，由黄芩、菊花、甘草等药材组方而成，具有清热解毒的功效，临床用于上呼吸道感染引起的发热、咽痛等症状疗效显著。本文报告其提取、精制工艺有关研究内容。
1 实验材料
1.1 仪器 高效液相色谱仪（Waters510泵，WaterU6K进样器，Waters486紫外检测器，JS-3030江申通用汉化色谱工作站）；ShimazhuLibrorAEL-40SM（十万分之一）电子天平（日本岛津）。
1.2 药材与试剂 所用药材均购自南京市药材公司，经鉴定符合《中国药典》2005版一部的规定；黄芩苷对照品购自中国药品生物制品检测所，甲醇为色谱纯，重蒸馏水（自制），其余试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18柱，（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇∶水∶磷酸（47∶53∶0.2），流速：1ml/min；进样时5μl；检测波长：280nm；柱温：室温；理论塔板数按计算黄芩苷峰计算应不低于2500。
2.2 浸膏得率的测定 按处方中各药材的比例，分别称取黄芩、菊花等药材共9份，按表2安排正交实验。提取液浓缩成浸膏，置真空干燥箱（80℃）中减压干燥成干浸膏，恒重后，计算浸膏得率。浸膏得率（%）=（所得浸膏净重/取样量）×100%。
2.3 固含率的测定 精密量取20ml醇沉上清液置于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，取出，置于干燥器中放置30min，取出称重，浸膏得率（%）=（固含量/药材投料量）×100%。
2.4 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷3.84g，用甲醇定容至10ml，制成0.384mg/ml的标准对照液，备用。
2.5 水提液供试品溶液的制备 将水提液摇匀，精密吸取药液1ml，加甲醇2ml，摇匀，高速离心10min（10000r/min），取上清液。
2.6 醇沉液供试品溶液的制备 精密吸取醇沉上清液0.5ml，加甲醇2ml，摇匀，高速离心10min（10000r/min），取上清液。
2.7 提取工艺优选 采用正交实验，对加水量、煎煮时间与煎煮次数3个因素考察，因素水平见表1。表1 水提因素水平表以黄芩苷的含量和干浸膏得率为考虑指标，按照L9（34）安排实验，对三因素进行优选，实验结果见表2，方差结果见表3。表2 L9（34）实验设计与结果注：其中Mi：浸膏得率，Ni：黄芩苷转移率；综合结果WI=浸膏得率×0.3+黄芩苷转移率×0.7 表3 水提正交方差分析结果正交实验及方差分析的结果表明：水提工艺的最佳条件为A3B2C2，即加药材20倍的水量，煎煮两次，煎煮总时间为3.0h（第1次加水11倍量，煎煮1.5h，第2次加水9倍量，煎煮1.5h）。
2.8 醇沉工艺优选 为了除去杂质并最大限度地保留有效成分，以黄芩苷转移率和固含率两因素为评价指标，对影响醇沉的因素（药液浓度、含醇量和静置时间）进行考察。以最佳水煎工艺制备一定量的药液，等分9份，按正交实验进行。因素水平见表4，正交实验及结果见表5，方差分析见表6。
根据上述实验结果，结合生产实际，将最优工艺定为A1B2C2。即药液浓缩至1∶1（药材∶药液），加95%乙醇使药液含70%乙醇，静置18h，滤过，得醇沉液，备用。
2.9 最佳水提——醇沉工艺的验证 按处方称取药材3批，各按照上述最优工艺操作，取样测定固含率和黄芩苷转移率，结果见表7。 表4 醇沉因素水平表表5 醇沉正交设计与结果表6 醇沉正交方差分析结果表7 最佳工艺验证结果由表7可见，验证实验结果与正交实验结果相近，说明该工艺稳定可行。
3 讨论
鉴于该方中黄芩、野菊花、甘草等［1～3］组方药材的大部分已知有效成分都易溶于水，如黄芩中的黄酮类、菊花中的倍半萜类和黄酮类、甘草中甘草皂苷和黄酮类化合物等，且为了确保这一临床经验方的有效性，选用水为溶媒进行提取。但上述水提取液含有大量鞣质、蛋白质、淀粉、黏液质和树脂等杂质，为减少服用量，保证药物疗效，选用乙醇沉淀法对水提液进行纯化（清制）。
【参考文献】
1 张曦，李宏，侯茂君，等.黄芩及其有效成分的药理学研究进展.天津药学，2000，12（4）：82.
2 李作平，卫恒巧.黄芩属植物化学成分的研究概况.国外医药·植物药分册，1994，9（4）：1473.
3 王幕邹.常用中草药高效液相色谱分析.北京：科学出版社，1999，79.
作者单位： 210029 江苏南京，南京中医药大学中医药研究院
（编辑：于 伽）