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关键词 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷同工酶；脑血管病；尿液
摘要 目的 探讨尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷同工酶（以下简称NAG-B）与急性脑血管病的关系。方法 采用对硝基酚比色法，分别测定了47例急性脑血管疾病患者（其中脑出血15例，脑梗死32例）的尿液NAG同工酶谱、尿NAG与尿肌酐（Cr）的比值、血清NAG活力。结果 脑梗死患者的尿液NAG-B、尿NAG/Cr和血NAG活力分别为对照组的1.30，2.93，1.23倍，脑出血患者的三项指标分别为对照组的1.33，3.13，1.30倍。患者组结果均明显高于对照组（P<0.01）。同时重症组患者尿NAG活性较轻症组明显升高（P<0.05），恢复期患者尿NAG活性较急性期有明显下降（P<0.01）。结论 脑血管病患者尿NAG及其同工酶活性升高的程度与病情的严重性呈一致关系，测定尿NAG-B对衡量脑血管疾病患者病情的轻重和估计疗效具有一定的意义。
CHANGE OF URINE NAG ISOENZYME IN PATIENTS WITH ACUTE CEREBROVASCULAR DISEASES
Zhang Yin, Wu Yinping.
Department of Clinical Laboratory, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052,China
Key words N-acetyl-β-D-glucosaminidase isoenzyme; cerebrovascular diseases; uronoscopy
Abstract Objective To evaluate relationship between urine NAG isoenzyme and acute cerebrovascular disease (CVD). Methods The activity of urine NAG isoenzyme, NAG/Cr and blood NAG isoenzyme in 47 patients with acute CVD (15 patients with brain hemorrhage and 32 patients with brain infarction) were examined by p-nitrobenzene chronometry. Results The activity of urine NAG-B, NAG/Cr and blood NAG isoenzyme in patients with brain hemorrhage and brain infarction were 1.3,2.93,1.23 and 1.33, 3.13, 1.3 fold higher than that of normal control group respectively. There was significant difference between the patients and the normal control group (P<0.01).The activity of urine NAG-B in severe case group was higher than that of mild case group（P<0.05）. Significant decrease of urine NAG isoenzyme activity was found in patients of convalescent period compared than that in patients of acute period (P<0.01). Conclusion A relationship is found between activity of urine and severity in patients with CVD. Assessment of urine NAG isoenzyme activity is useful for evaluating severity of the disease and predicting the response to its therapy.
对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（以下简称NAG）与疾病关系的研究表明，肝病、肾病、白血病、脑血管病变、糖尿病等疾病血清和尿液酶活力均可发生变化，并且NAG同工酶（NAG-B）活力的改变尤其显著。我们对急性脑血管病患者尿NAG同工酶谱、尿NAG/Cr与血清NAG活力进行了检测，报告如下。
1 资料与方法
1.1 实验对象 患病组：均为2005年3—11月本院神经内科住院患者，共47例，男31例，女16例，年龄48~79岁，平均（63.5±15.5）岁，其中经CT检查确诊脑出血15例，脑梗死32例。对照组：健康人230 例，男182例，女48例，年龄57.0~70.6岁，平均（63.8±6.8）岁，二组肾功能检查均正常，未发现影响尿NAG活性的疾病和其他因素。
1.1.1 仪器 检测标本采用半自动生化分析仪，型号：日立KY2000。
1.1.2 试剂 对硝基酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（由上海医药工业研究院生化室提供），肌酐（由中生北控生物科技股份有限公司生产）。
1.2 方法
1.2.1 NAG用对硝基酚比色法 将底物对硝基酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷与样本混合后，置37℃水浴中孵育，测定经NAG水解释放出对硝基酚的浓度，然后计算出酶的活性（U/L）。为排除某些生理因素的影响，测定同一尿标本尿肌酐浓度，将尿酶活性以NAG/Cr表示。
1.2.2 NAG同工酶测定 采用热变性分析法，尿液经60℃加温2.5min，破坏同工酶A活力后，测定同工酶B的活力，用NAG同工酶B在总酶活力的百分比表示。
1.2.3 肌酐测定 采用碱性苦味酸法，按全国临床检验操作规程进行。
1.3 统计学方法 采用方差分析q检验和t检验。检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 脑出血与脑梗死患者4项指标测定结果 见表1。
表1 47例急性脑血管病患者及对照组4项指标测定结果（略）
表1中患病组各项结果与对照组比较，均明显高于对照组（P＜0.01），差异均有统计学意义。
2.2 尿NAG及其同工酶活性与病情关系 为观察患者尿NAG及其同工酶活性与其病情的关系，将部分脑血管病患者根据病情分为二组，重症：有意识障碍，瘫肢肌力在2级以下（包括2级）；轻症：无意识障碍，瘫肢肌力在2级以上。结果见表2。
表2显示重症组尿NAG及其同工酶活性较轻症组明显升高（P＜0.05）。
表2 不同病情程度NAG活性比较（略）
2.3 急性期与恢复期尿NAG活性动态变化 我们观察了12例患者，发现恢复期尿NAG/Cr为（15.30±4.80），NAG-B（%）为（35.22±4.31）%，急性期NAG/Cr为（27.86±5.87），NAG-B（%）为（53.78±12.16）%，急性期与恢复期比较（P＜0.01），差异有统计学意义。
3 讨论
尿NAG同工酶的检测方法主要有四种，包括电泳法及离子交换层法、热变性分析法、免疫分析法和活化能分析法［1］。正常人尿液中NAG主要包括A、B二型，以A型为主。对热的耐受性存在差别，NAG-A在50℃或60℃中孵育变性会失活，而NAG-B在该段温度能保留最大活性，本室采用热变性分析法测得健康人尿NAG-B参考值为（36.61±10.00）%。NAG本身为大分子蛋白质，在生理情况下不能从肾小球滤过，尿中的NAG主要来自肾小管上皮细胞的溶酶体。相关分析亦发现其与尿微量白蛋白（Alb）、α-微球蛋白（αM）相关，亦提示早期有肾小管损害，可能与肾小管对缺血较敏感有关。因此该酶在肾脏内的特征性分布能较客观反映肾小管损害［2］。通常肾小管上皮细胞在代谢过程中可将少量NAG释放于尿液中，当肾脏损害较严重的急性肾小球肾炎、急性肾衰、肾病综合征等病变发生时，患者尿NAG活性升高幅度较大［3］，其上升幅度与肾损伤的程度大致成正比。本实验发现，当脑血管疾病并发微血管病变时，肾小球毛细血管通透性增强，使尿NAG排出量升高，以NAG-A尤为明显。肾小管受损时，NAG同工酶谱会发生质的改变，其中尿中NAG-B的绝对值与其在总酶活力中的百分比显著增高，同工酶A绝对值升高，但百分比值下降。32例脑梗死患者的尿NAG-B、尿NAG/Cr、血NAG活力分别为对照组均值的1.30，2.93，1.23倍，而15例脑出血患者这3项指标分别为对照组的1.33，3.13，1.30倍，提示脑血管病患者存在潜在的肾脏损害，其原因为脑血管病患者可能继发有肾血管病变。通常这些患者常规的肾功能检查结果在正常范围内波动，所以其肾功能的防护通常不被临床医生重视，以致有些患者最终发生肾衰。综上所述，尿NAG及其同工酶的测定，可以作为早期发现脑血管病时肾功能继发损害的一个灵敏指标，同时也对临床上及早监护肾功能提供了可靠依据。脑血管病患者尿NAG及其同工酶活性升高的幅度与病情的严重性呈一致关系。经动态观察，患者尿NAG及其同工酶活性可随病情好转而降低，提示随着病情的加重肾脏损害将愈加严重，随病情好转又可逐渐恢复。因此尿NAG及其同工酶活性的检测可作为衡量病情轻重和估计疗效的重要指标。
4 参考文献
［1］ 韩平治，丁进芳.尿液NAG总酶及同工酶检测进展［J］.临床检验杂志，2001，19（1）：53-55
［2］ 彭冬迪，李琮辉，王丕荣，等.高血压病患者5种尿微蛋白和NAG酶排泄的临床意义［J］.江西医药，2004，39（1）：9-12
［3］ 周丽清.尿GAL活性及NAG活性联合检测在肾脏病中的应用［J］.实用医技杂志，2004，11（5）上半月版：557-558
450052 河南省郑州市，郑州大学第一附属医院检验科
河南科技大学医学院机能实验室