献血员感染HBV窗口期血清学标志分析

　　［摘要］目的探讨献血员感染乙型肝炎病毒（HBV）窗口期血清学标志的表现模式。方法HBV血清学标志利用酶联免疫吸附试验（ELISA）以Alis多功能全自动酶免疫快速分析仪进行检测。采用聚合酶链反应（PCR）检测HBV DNA。为表述方便，将HBV血清学标记检测项目的表面抗原（HBsAg）、表面抗体（anti-HBs）、e抗原  （HBeAg）、e抗体（anti-HBe）、核心抗体（anti-HBc）分别标为1～5，并分别以出现阳性项目的序号为该模式的代码。结果41例献血员感染HBV窗口期血清病毒学标记模式为:“2”1例（2.44%），“25”1例（2.44% ），“5”   4例   （9.76% ），于3～6个月后对34例献血员随访血清病毒学标记模式为:“245”15例（44.12%），“2”9例（26.47% ），“15”3例（8.82%），“25”2例（5.88%），“135”1例（2.94%），“24”1例（2.94%）。结论 献血员感染HBV窗口期血清免疫学标记的模式较为简单，经3～6个月后其血清免疫学标记的模式仍然较为简单，即使对献血员进行HBV五项筛查也解决不了献血员感染HBV窗口期的问题。   

　　［关键词］肝炎病毒，乙型;献血员;免疫酶技术

　　WINDOW-PHASE SEROLOGIC MARKERS IN BLOOD DONORS WITH HBV 
　　JING YONG-ZHENG，XIE ZAI-HAI， GAO   ZHONG-HUA 

　　（Central Laboratory， People's Hospital of Penglai，Penglai 265600， China）   ［ABSTRACT］  Objective  To explore the pattern of serologic markers of blood donor with HBV in window phase.   Methods   Serologic markers were detected by ELISA assay using Alis multi-function automate analyzer， and HBV DNA detected by real time   PCR. To simplify the illustration， the five kinds of serologic markers of HBsAg， anti-HBs， HBeAg， anti-HBe and anti-HBc were   designated as “1”， “2”， “3”， “4” and “5”， respectively. The code of the positive serologic marker was used to represent the pat-  tern of serologic marker.   Results  The patterns of serologic marker of 41 HBV DNA positive blood donors in window phase   were: “2” positive， 1 unit; “25” positive， 1 unit; and “5” positive， 4 units. Three to six months later， follow-up testing of 34   blood donors showed that 15 units were “245” positive， 9 units were “2” positive， 3 units were “15” positive， 2 units were “25”   positive， 1 unit was “135” positive and 1 unit was “24” positive.   Conclusion  HBV NAT is necessary for blood donor screening   as serologic markers assay of HBV is unable to detect some potentially infectious units in window phase.  

　　［KEY WORDS］hepatitis B virus; blood donors; immunoenzyme techneques     

　　乙型肝炎病毒（HBV）感染是一个全球性的健康问题，根据美国疾病控制中心的报告，全球有将近  20亿的感染人群。我国是乙型肝炎（乙肝）的高发  区，有资料表明我国70%人群曾经被HBV感染过。HBV血清免疫学标志（乙肝五项）检查是目前临床分析是否被HBV感染的重要手段之一。但是，由于目前酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBsAg的灵  敏度为0.5～1.0 μg/L，因此，HBV感染存在50～60 d的检测窗口期，对临床输血安全的危害很大。为了进一步分析献血员感染HBV窗口期血清病毒学标记的表现模式，我们对2年来通过HBV DNA检测证明的感染HBV窗口期的样本进行乙肝五项  检测，探讨其血清病毒学标记模式。   

　　1 材料和方法    

　　1.1 标本来源  

　　利用基因扩增技术（NAT）对蓬莱市人民医院  中心血库2002年3月～2004年11月无偿献血员  捐献的合格血液标本11 456份进行筛查，检测出41  份HBV DNA阳性样本。对照组为蓬莱市人民医  院中心血库158例无偿献血员随机样本。并检测了  494份蓬莱市人民医院临床医务工作者血液样本。   

　　1.2 检测方法  

　　血清免疫学标记:所有样本均在Alis多功能全自动酶免疫分析仪上进行检测，设备操作与质控均按标准SOP文件执行，试剂由上海科华公司提供。HBV DNA检测采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法，具体操作按试剂盒说明书和Roche仪器操作说明书进行，试剂由深圳匹基生物公司提供。   

　　1.3 资料分析  

　　为了表述方便，将HBV血清学标记检测项目的表面抗原（HBsAg）、表面抗体（anti-HBs）、e抗原（HBeAg）、e抗体（anti-HBe）、核心抗体（anti-HBc） 分别标为1～5。并以出现阳性项目的序号为该模  式的代码。例如，某献血者血清病毒学标记的检测  结果为HBsAg阴性、anti-HBs阳性、HBeAg阴性、anti-HBe阳性、anti-HBc阳性，则该模式代码为“245”，余类推。

　　2 结  果  

　　41份HVB DNA阳性样本中，其血清学标记模  式有3种，按频度排序为:“5” 4例（9.76%），“2” 1  例（2.44%），“25” 1例（2.44%）。对其中34份  HBV DNA阳性样本于3～6个月后随访，其病毒血清学标记模式有6种，按频度排序分别为:“245” 15  例（44.12%），“2” 9例（26.47%），“15” 3例  （8.82% ），“25” 2例（5.88%），“135” 1例  （   2.94% ），“24” 1例（2.94%）。
     
　　对照组158份无偿献血员样本（HBV DNA均  阴性），乙肝五项血清学标记模式有6种，按频度排  序分别为:“2” 34例（21.52%），“245” 17例（10.76% ），“25” 6例（3.80%），“24” 2例  （   1.27% ），“125” 1例（0.63%），“5” 1例（0.63%）。494例临床医务工作者乙肝五项血清病毒学标记模  式有14种，以“2” 201例（41.02%），“245” 38例  （7.76% ）。“25” 24例（4.90%）为主要表现形式，其  他11种按频度排序依次为:“5”、“45”、“145”、“24”、“15”、“135”、“123”、“1245”、“4”“13”、“125”。   

　　3 讨  论  

　　关于我国HBV血清学标志的表现模式国内已有报道 ［1］，并有学者对低水平血清HBsAg的测定及其临床意义进行探讨［2］ ，证明低水平血清HBsAg  人群占有不小比例。对献血员感染HBV窗口期血清免疫学标志进行研究具有一定的意义。本文资料显示，献血员感染HBV窗口期的血清免疫学标记模式较为简单，仅有3种模式，有表现模式占总数的14.36%。对其中34份样本于3～6个月后进行随访，其血清病毒学标记模式仍较为简单，仅有6种模式，有表现模式占总数的91.18%。对照组无偿献血员常见血清学模式也较为简单，有6种模式，有表现模式占总数的38.61%。临床医务工作者常见血清学模式较为复杂，有14种模式，有表现模式占总数的62.75%。在研究组和对照组中，属常见模式的是“2”和 “245”，两种模式占45.77%。说明我国普通人群乙肝疫苗注射率较高，普通人群曾经被乙肝病毒感染过比例也较高。经研究发现，献血员感染HBV窗口期的血清学标记模式较为简单，进行随访研究，经3～6个月后，其血清病毒学标记模式仍较为简单，以“245”、“2”为主，两种模式占70.59%，因此，通过乙肝五项血清病毒学标记模式，很难判断献血员是否感染HBV。在对照组中，发现几种少见标记模式，“125”、“123”、“1245”共5例（HBV DNA阳性3例），这也  证明我国普通人群中存在HBsAg突变株问题，特别是临床医务工作者面临更多感染风险，国内学者也有一定认识［3］。总而言之，HBV感染是一个全球性的健康威胁，HBsAg突变株的出现给临床诊断HBV感染带来挑战，对献血员血液筛查和诊断会产生严重的后果，各类试剂对突变株的检测有不同的能力，会出现不一致的结果。Anti-HBs阳性不能100%保护个体免受HBV突变株的感染，并会出现HBsAg和  Anti-HBs同时阳性。献血员感染HBV窗口期和我国普通人群中存在HBsAg突变株问题，严重危害我国临床输血安全。献血者感染HBV窗口期血  清免疫学标记的模式较为简单，经3～6个月后随访  其血清免疫学标记的模式仍然较为简单，即使对献血员进行乙肝五项筛查，也解决不了献血员感染  HBV窗口期和我国普通人群中存在HBsAg突变株的问题。因此，尽快在我国实行利用NAT技术  对献血员进行HBV DNA、HCV RNA的筛查工作，是很有必要的。    

　　［参考文献］   

　　［1］郑怀竟. 使用20种试剂盒对106份正常献血员中乙肝标志物  模式的分析［J］. 中华肝脏病杂志，1993（1）:53-54.
     
　　［2］孙南雄，黄祖瑚，刘雁雁，等. 乙型肝炎患者957例血清学标志分析［J］.  中华医学检验杂志，  1999，22:296-298.
     
　　［3］王蕾，张克，姜莉莉，等. 手术室护理人员获得性乙型肝炎的调查［J］.  齐鲁医学杂志，1999，14（4）:302

　　（蓬莱市人民医院中心实验室，山东 蓬莱 265600）