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［摘要］目的 探讨乙酰肝素酶（Hpa）在子宫内膜癌中的表达及其与肿瘤临床病理学特征的关系。方法 采用免疫组化PV6000法检测60例子宫内膜癌组织中Hpa的表达。结果 Hpa在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为65.0%（39/60），其表达与子宫内膜癌的组织学病理分级、临床手术分期、肌层浸润深度和淋巴结转移有关（ χ2 =4.40～7.33，P <0.05）。结论 Hpa在子宫内膜癌的进展中起重要作用，可作为判断子宫内膜癌生物学行为的有用指标。
［关键词］ 子宫内膜肿瘤;乙酰肝素酶;病理学，临床
RELATIONSHIP BETWEEN HEPARANASE EXPRESSION AND CLINICOPATHOLOGIC FEATURES OF ENDOMETRIAL CARCI-NOMA
WANG LIN
（Department of Obstetrics and Gynecology， Qingdao Central Hospital， Qingdao 266042， China）
［ABSTRACT］ObjectiveTo study the expression of heparanase （Hpa） in carcinoma of endometrium and the relation with its clinical pathological characteristics. MethodsThe expression of Hpa was detected by immunohistochemistry PV6000 me- thod in 60 cases of endometrial carcinoma. ResultsThe positive Hpa expression of the carcinoma was 65.0%， which was posi-tively associated with histological grade， clinical stage， myometrium invasion， and lymph node metastasis （ χ2 =4.40-7.33， P <0.05）. ConclusionHpa plays an important role in the development of endometrial carcinoma， which can be used as a useful marker in the judgement of the cancer biological behavior.
［KEY WORDS］endometrial neoplasms; heparanase; pathology， clinical
恶性肿瘤发生侵袭和转移，首先必须降解细胞外基质（ECM）和基底膜（BM）。乙酰肝素酶（Hpa）是近几年克隆成功的一种裂解ECM和BM中乙酰硫酸肝素盐蛋白聚糖中乙酰硫酸肝素的内源葡萄糖醛酸酶，其与肿瘤的关系引起医学界的广泛关注［1］。本研究采用免疫组化PV6000法检测HPa在子宫内膜癌组织中的表达，探讨其与子宫内膜癌临床病理学特征的关系。
1 材料与方法
1.1 材料来源 收集青岛市中心医院病理科2002年1月～2004年12月诊断为子宫内膜癌的组织蜡块。病人平均年龄53.4岁（32～78岁）。所有病例术前均未行放、化疗或性激素治疗。根据1988年FIGO的病理分级标准进行分级:G1级24例，G2级20例，G3级16例。按照1989年FIGO的标准进行临床手术分期:Ⅰ期26例，Ⅱ期10例，Ⅲ期14例，Ⅳ期10例;肌层浸润>1/2者28例，肌层浸润≤1/2者32例;无淋巴结转移36例，有淋巴结转移24例。
1.2 检测方法 采用免疫组织化学PV6000法，具体操作步骤 按照试剂盒说明书进行。每次染色均设对照作为染色质量控制标准，阳性对照采用已知的阳性乳癌组织切片，阴性对照采用PBS代替一抗，所有对照与实验标本均在同一条件下严格按照试剂盒推荐方法进行染色。鼠抗人Hpa抗体为美国SantaCruz公司产品（稀释度1∶200），PV6000通用型试剂盒购自ZYMED公司。
1.3 免疫组化结果判定 Hpa蛋白染色阳性为胞浆出现清晰棕黄色颗粒。每张切片在400倍显微镜下选定10个视野，计算阳性细胞的百分数。表达强度判定:胞浆染色阳性的细胞百分率<5%为-，5%～24%为+，25%～50%为 ，>50%为 。
1.4 统计学处理 采用 χ2检验。
2 结果
Hpa在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为 65.0% （39/60），其表达与子宫内膜癌的组织学病理分级、临床手术分期、肌层浸润深度和淋巴结转移有关（ χ2 =4.40～7.33，P <0.05）。见表1。
表1 Hpa蛋白表达与子宫内膜癌临床病理学参数的关系（略）
3 讨论
Hpa基因定位于4q22，包括14个外显子和13个内含子［2，3］，具有多种生物学活性。①通过降解细胞外基质和血管基底膜促进癌细胞的侵袭和转移。②通过促使乙酰肝素释放和活化肝素结合型的生长因子诱导血管生成。③乙酰肝素的降解产物可以抑制活化T淋巴细胞的生物学功能［4］。④促进释放尿激酶型纤溶酶原激活物和组织型纤溶酶原激活物，二者使纤溶酶激活。纤溶酶除具有活化基质金属蛋白酶作用外，还具有促进结合型活性basic-纤维母细胞生长因子（bFGF）释放的功能。⑤可能促进释放组织特异性生长因子，参与肿瘤细胞转移和器官组织特异性的选择。总之，Hpa通过降解细胞和ECM中的乙酰肝素，释放活性物质，产生链式反应，加快血管生成，促进肿瘤生长和转移，这已成为肿瘤发生发展的机制之一。大量的研究证实，Hpa在多种恶性肿瘤，例如食管癌、胃癌、结肠癌、肺癌和甲状腺乳头状癌等的浸润和转移中都发挥着重要的作用［1］。HULETT等［5］研究发现，在高转移性的鼠腺癌细胞系中Hpa mRNA表达水平很高，而在低转移和不转移的细胞系中表达较低。GOHJI等［4］发现，Hpa在侵犯肌层的膀胱癌组织中表达明显高于仅局限于黏膜层的癌组织，在伴有淋巴结转移的原发性膀胱癌组织中表达明显高于无转移的癌组织，临床分期高的癌组织表达高于分期低的癌组织。MIKAMI等［6］用免疫组化检测103例食管癌组织中Hpa的表达发现，晚 期食管癌Hpa的表达强于早期食管癌，该酶的表达与食管癌的静脉及淋巴结转移呈正相关，由此认为，Hpa的表达在肿瘤的转移中发挥着重要作用。关于Hpa与子宫内膜癌关系的研究较少，国内未见报道。WATANABE等［7］收集40例新发现子宫内膜癌病人标本，采用半定量RT-PCR方法检测Hpa mRNA的表达浓度，结果显示，癌组织中Hpa mRNA的表达浓度与子宫内膜癌的临床分期（按照FIGO分级法）、病理学分级及淋巴结是否有转移高度相关。本文采用免疫组化方法检测60例子宫内膜癌组织中Hpa的表达，结果显示，组织学Ⅲ级、临床手术Ⅲ+Ⅳ期、浸润肌层>1/2和有淋巴结转移的癌组织，Hpa阳性表达率明显高于组织学Ⅰ级、临床手术Ⅰ+Ⅱ期、浸润肌层≤1/2和无淋巴结转移者。说明Hpa可促进子宫内膜癌的浸润和转移，并可作为判断子宫内膜癌的分化程度的有用指标。Hpa抑制剂也可能为子宫内膜癌的治疗开辟了一条新思路。
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［7］ WATANABE M， AOKI Y， KASE H， et al. Heparanase ex-pression and angiogenesis in endometrial cancer ［J］. Gynecol Obstet Invest， 2003，56:77-82.
（本文编辑 马伟平）
（青岛市中心医院妇产科，山东 青岛 266042）