前列腺癌组织COX2表达及其与MVD关系

【摘要】  目的 探讨环氧化酶2（COX2）在前列腺癌中表达及其与微血管密度（MVD）的关系。方法 应用免疫组织化学方法（SP法），分别检测39例前列腺癌组织和20例前列腺增生组织中COX2的表达和MVD。结果 COX2 在前列腺癌组织和前列腺增生组织表达差异有显著性（χ2=13.846，P<0.05）；前列腺癌高分化组与中分化组、高分化组与低分化组之间差异有显著意义（P=0.022、0.005），而中分化组与低分化组差异无统计学意义（P=0.424）；前列腺癌组织中COX2表达阳性者MVD明显升高（t=30.470,P<0.05）；MVD与COX2的染色积分呈正相关（r=0.647,P<0.05）。结论 COX2的阳性表达可以作为判断前列腺癌预后的一个重要指标，MVD和COX2的表达密切相关，COX2通过上调前列腺癌组织MVD，在前列腺癌发生和发展过程中扮演着重要作用。

【关键词】  前列腺肿癌 环氧化酶2 微血管密度 免疫组织化学

    RELATIONSHIP BETWEEN THE EXPRESSION OF CYCLOOXYGENASE2 AND MICROVESSEL DENSITY IN PROSTATE CARCINOMAWANG PENG, ZHOU RONGXIANG, YANG RONGCHEN,  et al (Department of Urology, The Affiliated Hopspital of Municipal Hospital of Qingdao University Medical College, The Affitiated Hospital of Qingdao 266011, China) ［ABSTRACT］ObjectiveTo study the relationship between the expression of COX2 and microvessel density in prostate carcinoma (PCa). MethodsImmunohistochemical method was used to study COX2 and MVD in tussue samples of 39 prostate carcinoma and 20 benign prostatic hyperplasia (BPH).ResultsThere was a significant difference in COX2 expression between PCa and BPH （P<0.05）. In welldifferentiated PCa, the COX2 expression was significantly upregulated compared with moderately and poorly differentiated. MVD in COX2 positive group was significantly higher than that in COX2 negative (t=30.47,P<0.05). There was a positive correlation between MVD and  COX2 expression (r=0.647,P<0.05）.ConclusionThe expression of COX2 can be regarded as an important index for predicting the prognosis of PCa. The positive correlation between COX2 expression and MVD suggests the role of COX2 in PCa development and progression by upregulating neovascularization of it .

    ［KEY WORDS］prostatic neoplasms; cyclooxygenase2; microvessel density; immunohistochemistry

    环氧化酶是前列腺素合成过程中一个重要的限速酶，目前发现其至少有两种同工酶，即环氧化酶1和环氧化酶2（COX2）。环氧化酶1与机体的正常活动有关，COX2则在炎症状态下及肿瘤组织中表达增多。本实验应用免疫组化染色方法研究人前列腺癌组织中COX2表达及其与微血管密度(MVD)的关系，探讨前列腺癌组织中COX2的表达及其与微血管生成的关系。

    1  资料与方法

    1.1  标本及来源

    本文实验组标本取自青岛市市立医院1999年1月～2006年3月收治的前列腺癌病人，共39例，年龄54～81岁，平均71.2岁，术前未进行任何治疗。病理学证实为前列腺腺癌，其中高分化前列腺腺癌（GLEASON评分1～4分）8例；中分化前列腺腺癌（GLEASON评分5～7分）17例；低分化前列腺腺癌（GLEASON评分8～10分）14例。对照组标本取自青岛市市立医院2003年1月～2006年3月收治的前列腺增生病人，共20例，术前未用保列治等5α还原酶抑制剂及抗炎药物。标本均做5 μm厚的连续组织切片。

    1.2  方法

    采用免疫组织化学SP法染色，COX2、CD34鼠抗人单克隆抗体及SP免疫组化试剂盒均来自北京中杉金桥生物技术有限公司，按试剂盒说明书进行操作。以正常兔血清代替一抗作为阴性对照，以子宫内膜腺癌标本为阳性对照，显微镜下观察结果。

    1.3  结果判定

    COX2蛋白定位于细胞浆内，以镜下细胞浆内出现棕褐色颗粒为阳性染色，采用半定量积分法，即对每张切片的阳性细胞率及阳性细胞着色强度分别进行分级记分，然后根据两项之和确定其阳性强度。仅细胞核着蓝色者为阴性，细胞浆内或核膜上呈棕黄色者为阳性，染色强度(阴性、弱、中、强)及阳性细胞率(≤5%、6%～30%、31%～70%和≥71%)分别积分（0，1，2， 3）；两项之和为染色积分，0～3分为低表达(COX2阴性)，4～6分为高表达(COX2阳性)[1]。MVD：用CD34单克隆抗标记血管内皮细胞，以癌细胞间质内有孤立的棕黄色血管内皮细胞或细胞簇或血管腔面积小于8个红细胞，且管壁无肌层代表1条单独的微血管。先在低倍视野下找肿瘤组织内MVD最高的区域，然后在200倍视野下计数3个视野内的微血管数目，再将总数除以3，取其平均值作为肿瘤该视野下的MVD[2]。MVD测定在双盲法下进行，每张切片由2名病理医师分别计数。

    1.4  统计学处理

    采用SPSS 13.0软件包进行数据处理，数据间比较采用χ2检验、精确检验、t检验，相关性分析采用直线相关分析。

    2  结    果

    2.1  前列腺癌和前列腺增生组织COX2表达

    本文39例前列腺癌组织中有31例COX2为阳性表达（79.49%），而在前列腺增生组织中只有6例COX2为阳性表达（30.00%），两者差异有显著意义（χ2=13.846，P<0.05）。

    2.2  前列腺癌组织COX2表达与病理分级关系

    在低分化、中分化和高分化的前列腺癌组织中COX2的阳性表达率分别为92.86%、88.24%和37.5%，经过两两比较，高分化组与中分化组、高分化组与低分化组之间差异有显著意义（P=0.022、0.005），而中分化组与低分化组差异无统计学意义（P=0.424）。见表1。

    2.3  前列腺癌组织中COX2表达与MVD的关系

    在COX2阳性表达的前列腺癌组织中MVD为43.83±13.91，而COX2阴性表达的前列腺癌组织MVD为11.54±4.46，前者明显高于后者(t=30.470,P<0.05)。相关分析显示，MVD的数值与COX2的染色积分呈正相关（r=0.647,P<0.05）。

    表1  前列腺癌组织COX2表达与病理分级关系(例)病理分级nCOX2 阳性COX2阴性低分化14131中分化17152高分化835

    3  讨    论

    COX作为花生四烯酸转变为PGG2及PGG2转变为PGH2的限速酶，其异构体COX1和COX2在不同的组织中有不同的表达，并发挥着不同的生理功能。COX2有促炎症作用和通过促有丝分裂因子、细胞因子、肿瘤转化生长因子诱导细胞分裂的作用[3]。最近的研究表明，在胃肠道肿瘤、乳癌等恶性肿瘤中COX2呈高表达，在泌尿系肿瘤中，已有人证实在膀胱癌、肾癌COX2表达升高。KIRSCHENBAUM用免疫组化的方法研究显示，胎儿的前列腺样本中没有COX2的表达；青春期的前列腺样本中，COX2只微量表达在前列腺移行带细胞中[4]。MADAAN等[5]用免疫组化和免疫印迹的方法研究显示，前列腺癌及前列腺增生组织中COX2的表达差异有显著性，且COX2在前列腺癌组织中呈强阳性表达。丁翔等[6]用免疫组化的方法证实了COX2在前列腺癌组织中呈强阳性表达，阳性表达强度与病理分级相关，随着病理分化程度的降低，阳性表达逐渐增强[6]。本研究结果显示，前列腺癌和前列腺增生的组织中COX2表达差异具有显著性，COX2在不同分化的前列腺癌组织中表达差异有显著性，但这种表达的差异性只体现在高分化组与中分化组、高分化组与低分化组之间，中分化组与低分化组之间的表达差异无显著性。前列腺癌病理学分级与病人的预后密切相关，GLEASON评分大于4分，即中分化和低分化前列腺癌病人预后不良，与文献结果一致。在本实验中，COX2在前列腺癌中分化组及低分化组中的表达要明显高于高分化组。推测COX2的阳性表达可以作为判断前列腺癌预后的一个重要指标，COX2在前列腺癌细胞分化及演进的过程中可能起重要的作用。在前列腺癌发生、发展的过程中，COX2的高表达可能是前列腺癌高侵袭、高转移能力的分子学基础。COX2表达阳性的肿瘤较COX2表达阴性的肿瘤具有更强的转移倾向[7]。

    肿瘤生长和转移是一个多步骤、多因素的复杂过程。其中血管生成起着重要的作用，为肿瘤的发生、发展提供了营养，同时大量的新生血管增加了肿瘤细胞进入循环的机会。当肿瘤体积<1 mm3 时，这一过程可通过组织渗透来完成;当体积>2 mm3时，肿瘤的发展则必须依赖新生血管的生成，此时肿瘤向外浸润生长的过程中，血管生成是同步进行的[8，9]。本研究显示，COX2阳性组MVD的表达显著高于COX2阴性组，且MVD的数值与COX2的染色积分呈正相关。提示COX2在前列腺癌中有诱导肿瘤血管生成的作用，通过上调MVD在前列腺癌的发生和发展中起到重要作用。阻断前列腺癌中COX2的产生可能会降低MVD，这就为治疗前列腺癌提供了新的方向。

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[5]MADAAN S, ABEL, Chaudhary K S, et al. Cytoplasmic induction and overexpression of cyclooxygenase2 in human prostate cancer: implications for prevention and treatment[J]. B J U Intern, 2000,86(6):736741.

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作者单位：青岛大学医学院附属市立医院泌尿外科，山东 青岛 266021